等溫滴定為量熱儀

等溫滴定量熱法(Isothermal Titration Calorimetry, ITC)是近年來發展起來的一種研究生物熱力學與生物動力學的重要方法，它通過高靈敏度、高自動化的微量量熱儀連續、準確地監測和記錄一個變化過程的量熱曲線，原位、線上和無損傷地同時提供熱力學和動力學信息。

方法定義

微量熱法具有許多獨特之處。它對被研究體系的溶劑性質、光譜性質和電學性質等沒有任何限制條件，即具有非特異性的獨特優勢，樣品用量小，方法靈敏度和精確度高(本儀器最小可檢測熱功率2 nW，最小可檢測熱效應0.125uJ，生物樣品最小用量0.4ug，溫度範圍2 ℃ - 80 ℃，滴定池體積(1.43 ml)。實驗時間較短(典型的ITC實驗只需30-60分鐘，並加上幾分鐘的回響時間)，操作簡單(整個實驗由計算機控制，使用者只需輸入實驗的參數，如溫度、注射次數、注射量等，計算機就可以完成整個實驗，再由Origin軟體分析ITC得到的數據)。測量時不需要製成透明清澈的溶液, 而且量熱實驗完畢的樣品未遭破壞，還可以進行後續生化分析。儘管微量熱法缺乏特異性但由於生物體系本身具有特異性，因此這種非特異性方法有時可以得到用特異方法得不到的結果，這有助於發現新現象和新規律，特別適應於研究生物體系中的各種特異過程。

ITC用途

獲得生物分子相互作用的完整熱力學參數，包括結合常數、結合位點數、摩爾結合焓、摩爾結合熵、摩爾恆壓熱容，和動力學參數(如酶活力、酶促反應米氏常數和酶轉換數)。

套用範圍

蛋白質-蛋白質相互作用(包括抗原-抗體相互作用和分子伴侶-底物相互作用)；蛋白質摺疊/去摺疊；蛋白質-小分子相互作用以及酶-抑制劑相互作用；酶促反應動力學；藥物-DNA/RNA相互作用；RNA摺疊；蛋白質-核酸相互作用；核酸-小分子相互作用；核酸-核酸相互作用；生物分子-細胞相互作用；……

加樣體積：（實際體積）cell：1.43 ml，syringe：300 μl

準備樣品體積（最少量）cell：2 ml，syringe：500 μl

樣品濃度cell：幾十μM到幾mM
syringe：幾百μM到幾十mM

測量Kb範圍102-1012 M-1

滴定實驗前恆溫30-60 min
等溫滴定量熱實驗所需時間，一般1.5-4 hr

技術指標：
短期噪音水平：0.5納卡/秒 (2 納瓦)。
基線重複性：優於±20納瓦/小時 。
工作溫度： 2 ℃ 到 80 ℃。
最小回響時間： 17秒
可選擇化學反應的回響時間： 多種選擇（專利技術） 。
攪拌速度有多種選擇。
控溫方式：Peltier電子控溫方式，快速達到控制溫度，不需水浴。
樣品池材質：鉿合金 ，1.3 ml ， 固定式。
檢測方式：功率反饋式,負反饋補償，直接測定熱量。

配置：
超靈敏量熱儀主機， 工作軟體， 進樣、清洗裝置， 基本附屬檔案。
儀器設備的先進性和實用性：
適用學科範圍： 物理化學、生物化學、生物物理、化學生物學、生命科學、藥物學、土壤學、膠體化學 等。

該儀器的特點和優勢 ：
1.該型號儀器的檢測原理為功率反饋式, 功率負反饋補償，直接測定熱量， 測得的結果直接， 準確 。
2.儀器的靈敏度最高，短期噪音水平0.5納卡/秒 (2 納瓦)， 樣品量可以低至微克級 。
3.該儀器可選擇化學反應的回響時間， 從而能提供研究多樣性反應過程的可能性。
4.該型號儀器使用時無其它消耗品需求， 不需固定化、不需修飾， 對包括混懸液、帶顏色的樣品、一定黏度的樣品體系等都可適用。
5.該型號儀器的控溫方式為Peltier電子控溫方式，可快速達到控制溫度，不需水浴， 控溫精度高。
6.該型號儀器的軟體功能全面，專業的控制和數據處理軟體（VPViewer， Origin 7.0 ）包含所發現的全部反應模型和數據解析模型。
7.全球引用該儀器產生的數據而發表的文獻， 占同類文獻的份額為95%以上。

該儀器設備對環境的要求：潔淨， 避免強光、電場、磁場、氣流波動、震動。