基本介紹
- 中文名： 等溫滴定微量熱儀
- 外文名：Isothermal Titration Calorimetry, ITC
- 適用範圍：物理化學、生物化學、生物物理、化學生物學、生命科學、藥物學、土壤學、膠體化學等
方法定義,ITC用途,套用範圍,
方法定義
微量熱法具有許多獨特之處。它對被研究體系的溶劑性質、光譜性質和電學性質等沒有任何限制條件，即具有非特異性的獨特優勢，樣品用量小，方法靈敏度和精確度高，本儀器最小可檢測熱功率2 nW，最小可檢測熱效應0.125uJ，生物樣品最小用量0.4ug，溫度範圍2 ℃ - 80 ℃，滴定池體積（1.43 ml）。實驗時間較短（典型的ITC實驗只需30-60分鐘，並加上幾分鐘的回響時間），操作簡單（整個實驗由計算機控制，使用者只需輸入實驗的參數，如溫度、注射次數、注射量等，計算機就可以完成整個實驗，再由Origin軟體分析ITC得到的數據）。測量時不需要製成透明清澈的溶液, 而且量熱實驗完畢的樣品未遭破壞，還可以進行後續生化分析。儘管微量熱法缺乏特異性但由於生物體系本身具有特異性，因此這種非特異性方法有時可以得到用特異方法得不到的結果，這有助於發現新現象和新規律，特別適應於研究生物體系中的各種特異過程。
ITC用途
獲得生物分子相互作用的完整熱力學參數，包括結合常數、結合位點數、摩爾結合焓、摩爾結合熵、摩爾恆壓熱容，和動力學參數（如酶活力、酶促反應米氏常數和酶轉換數）。
套用範圍
蛋白質-蛋白質相互作用（包括抗原-抗體相互作用和分子伴侶-底物相互作用）；蛋白質摺疊/去摺疊；蛋白質-小分子相互作用以及酶-抑制劑相互作用；酶促反應動力學；藥物-DNA/RNA相互作用；RNA摺疊；蛋白質-核酸相互作用；核酸-小分子相互作用；核酸-核酸相互作用；生物分子-細胞相互作用；……
加樣體積：（實際體積）cell：1.43 ml，syringe：300 μl
準備樣品體積（最少量）cell：2 ml，syringe：500 μl
樣品濃度cell：幾十μM到幾mM
syringe：幾百μM到幾十mM
測量Kb範圍102-1012 M-1
滴定實驗前恆溫30-60 min
等溫滴定量熱實驗所需時間，一般1.5-4 hr
技術指標：
短期噪音水平：0.5納卡/秒 （2 納瓦）。
基線重複性：優於±20納瓦/小時 。
工作溫度： 2 ℃ 到 80 ℃。
最小回響時間： 17秒
可選擇化學反應的回響時間： 多種選擇（專利技術） 。
攪拌速度有多種選擇。
控溫方式：Peltier電子控溫方式，快速達到控制溫度，不需水浴。
樣品池材質：鉿合金 ，1.3 ml ， 固定式。
檢測方式：功率反饋式,負反饋補償，直接測定熱量。
配置：
超靈敏量熱儀主機， 工作軟體， 進樣、清洗裝置， 基本附屬檔案。
儀器設備的先進性和實用性：
該儀器的特點和優勢 ：
1.該型號儀器的檢測原理為功率反饋式, 功率負反饋補償，直接測定熱量， 測得的結果直接， 準確 。
2.儀器的靈敏度最高，短期噪音水平0.5納卡/秒 （2 納瓦）， 樣品量可以低至微克級 。
3.該儀器可選擇化學反應的回響時間， 從而能提供研究多樣性反應過程的可能性。
4.該型號儀器使用時無其它消耗品需求， 不需固定化、不需修飾， 對包括混懸液、帶顏色的樣品、一定黏度的樣品體系等都可適用。
5.該型號儀器的控溫方式為Peltier電子控溫方式，可快速達到控制溫度，不需水浴， 控溫精度高。
6.該型號儀器的軟體功能全面，專業的控制和數據處理軟體（VPViewer， Origin 7.0 ）包含所發現的全部反應模型和數據解析模型。
7.全球引用該儀器產生的數據而發表的文獻， 占同類文獻的份額為95%以上。
該儀器設備對環境的要求：潔淨， 避免強光、電場、磁場、氣流波動、震動。
