等位基因特異的寡核苷酸探針(allele-specific oligonucleotide probe)是1995年發布的醫學名詞。
基本介紹
- 中文名:等位基因特異的寡核苷酸探針
- 外文名:allele-specific oligonucleotide probe
- 所屬學科:醫學
- 公布時間:1995年
等位基因特異的寡核苷酸探針(allele-specific oligonucleotide probe)是1995年發布的醫學名詞。
等位基因特異的寡核苷酸探針(allele-specific oligonucleotide probe)是1995年發布的醫學名詞。公布時間1995年經全國科學技術名詞審定委員會審定發布。1出處《醫學名詞 第三分冊》第一...
Taqman探針,是一種檢測寡核苷酸的螢光探針,優點為特異性高,重複性好。探針屬性 Taqman探針是一種雙標記的水解探針。相關介紹 TaqMan螢光探針是一種寡核苷酸探針,其5’末端攜帶螢光基團,如FAM、TET、VIC、HEX等,3’端攜帶淬滅基團,如TAMRA、BHQ等。PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的螢光探針,探針...
等位基因特異性寡核苷酸印跡是2007年公布的免疫學名詞。定義 一種測定基因突變的方法。即套用等位基因特異性寡核苷酸(ASO)僅與完全互補的序列結合,故1個鹼基錯配即足以阻止ASO探針與目的基因片段雜交;將ASO探針連線dT多聚尾巴,結合於固相支持物上,受檢基因在雜交液中,生物素標記的DNA可結合辣根過氧化物酶,藉助...
等位基因特異性寡核苷酸(allele-specific oligonucleotide)是2019年公布的運動醫學名詞。定義 設計合成的,可以在適當的條件下與特異序列雜交而不與其相關的序列雜交的寡核苷酸。用針對每一個等位基因序列設計的等位基因特異性寡核苷酸可以容易地檢出單個核苷酸的變異。在幾種設計相識、用來區分密切相關等位基因的方法中,還...
RNA探針是指帶有標記的能與組織內相對應的核苷酸序列互補結合的一段單鏈cDNA或cRNA分子。根據在RNA雜交中所使用的探針依其來源可分為三種:即特異性cDNA、cRNA探針和人工合成寡核苷酸探針。概念 RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由於RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應效率極高。早期採用的RNA探針是細胞mRNA...
寡核苷酸探針診斷法當基因的突變部位和性質已完全明了時,可以合成等基因特異的寡核苷酸探針(allele-specific oligonucleotide,ASO)用同位素或非同位素標記進行診斷。探針通常為長20bp左右的核苷酸。用於探測點突變時一般需要合成兩種探針,一種與正常基因序列完全一致,能與之穩定地雜交,但不能與突變基因序列雜交;另一...
RFLR按孟德爾方式遺傳,在某一特定家族中,如果某一致病基因與特異的多態性片斷緊密連鎖,就可用這一多態性片段為一種“遺傳標誌”,來判斷家庭成員或胎兒是否為致病基因的攜帶者。甲型血友病、囊性纖維病變和苯丙酮尿症等均可藉助這一方法得到診斷。(3)等位基因特異寡核苷酸探針雜交法。遺傳疾病的遺傳基礎是基因...
cDNA探針是從相應的基因經轉錄獲得mRNA,再通過逆轉錄酶的作用得到的探針,不含內含子序列。在體外通過機器可以合成小片段單鏈寡核苷酸探針。寡核苷酸探針穩定、特異性高,在非常嚴格的條件下.用寡核苷酸探針進行的雜交試驗能檢測單個鹼基突變和單個鹼基的錯配,但寡核苷酸探針短,帶有的標記物少,敏感性較低。優點 ①...
基因表達晶片的兩個重要參數是檢測的靈敏度和特異性。cDNA晶片由於基因長短不同以至Tm值各異,眾多的基因在同一張晶片上雜交,使得雜交條件很難同一,使得傳統的cDNA晶片的分辨能力受到限制。寡聚核苷酸晶片序列選擇經過最佳化,利用合成的一定長度(如20,30,70-mer等)的寡核苷酸單鏈探針代替全長cDNA點樣,製成晶片...
基因探針技術又稱分子雜交技術,是利用DNA分子的變性、復性以及鹼基互補配對的高度精確性,對某一特異性DNA序列進行探查的新技術。基因探針是利用同位素、生物素等標記的特定DNA片斷,該片斷可大至寄生蟲基因組DNA,小至20個鹼基。基本原理 互補的DNA單鏈能夠在一定條件下結合成雙鏈,即能夠進行雜交。這種結合是特異的...
寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸殘基以磷酸二酯鍵連線而成的線性多核苷酸片段,但在使用這一術語時,對核苷酸殘基的數目並無嚴格規定,在不少文獻中,把含有30甚至更多核苷酸殘基的多核苷酸分子也稱作寡核苷酸。寡核苷酸可由儀器自動合成,它可作為DNA合成的引物(Primer)、基因探針(Probe)等,在現代分子...
《PCR/SSO鑑定我國彝族HLA系統D區核苷酸順序特徵》是依託上海交通大學,由費虹明擔任項目負責人的面上項目。項目摘要 80例彝族隨機標本,用PCR法擴增HLA-DRBl、DRB3、DQA1、DQB1基因座第二外顯子,用第11屆國際組織相容性會議的一套序列特異的寡核苷酸探針進行斑點雜交,根據各等位基因核苷酸序列特徵,定出每一樣本的...
序列特異的寡核苷酸探針 序列特異的寡核苷酸探針(sequence-specific oligonucleotide probe)是1995年公布的醫學名詞。公布時間 1995年,經全國科學技術名詞審定委員會審定發布。出處 《醫學名詞 第三分冊》第一版。
RNA型探針是指帶有標記的能與組織內相對應的核苷酸序列互補結合的一段單鏈cDNA或cRNA分子。根據在RNA雜交中所使用的探針依其來源可分為三種:即特異性cDNA、cRNA探針和人工合成寡核苷酸探針。由於RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應效率極高。一些RNA型探針主要用於研究目的,而不是用於檢測。例如,在篩選逆...
反向打點雜交技術(reverse line blot hybridization,RLB hybridization)是一種分子遺傳學研究手段,由Innner等人於1983年首創的等位基因特異性寡核苷酸探針雜交技術上發展起來,由聚合酶鏈式反應(PCR)技術創立者之一Saiki等人改進並建立的。內容簡介 傳統的A.SCI探針雜交技術是將靶DNA(基因組DNA或PCR擴增片段)點在膜上,...
等位基因的特異 寡核苷酸探針診斷法當基因的突變部位和性質已完全明了時,可以合成等基因特異的寡核苷酸探針(allele-specific oligonucleotide,ASO)用同位素或非同位素標記進行診斷。探針通常為長20bp左右的核苷酸。用於探測點突變時一般需要合成兩種探針,一種與正常基因序列完全一致,能與之穩定地雜交,但不能與突變基因...
(4)寡核苷酸探針分析法:當基因突變的部位和性質明確時,可套用同位素標記的等位基因特異的寡核苷酸探針進行診斷。寡核苷酸探針分析法還可以和聚合酶鏈反應技術結合,以減少雜交時的非特異性信號。臨床套用 1.染色體遺傳性疾病 通過細胞遺傳學檢查即可確診。2.單基因遺傳性疾病 (1)直接診斷:用聚合酶鏈反應基因...
3、PCR-ASO探針法(PCR-allele specific oligonucleotide, ASO):即等位基因特異性寡核苷酸探針法。在PCR擴增DNA片段後,直接與相應的寡核苷酸探雜交,即可明確診斷是否有突變及突變是純合子還是雜合子。其原理是:用PCR擴增後,產物進行斑點雜交或狹縫雜交,針對每種突變分別合成一對寡核苷酸片段作為探針,其中一個...
將PCR擴增片段製成斑點,用等位基因特異性寡核苷酸探針(ASO)雜交,通過探針放射自顯影結果進行HLA分型。反向斑點雜交(RDB):把探針預先固定在膜上,標記PCR引物。7、比較HLA血清學分型和DNA分型方法的可靠性 HLA個體遺傳差異的本質不是在於血清學方法所檢測的抗原,而是在編碼基因產物的DNA分子上。
(7)α-地貧基因診斷:方法主要有4種:①限制性酶切圖譜直接分析法。②限制性片段長度多態性(RLFP)間接分析法。③寡核苷酸探針(ASO)分析法。④聚合酶鏈式反應(PCR)基因診斷法:對缺失型的HbH病基因多採用PCR法;對非缺失型者則常用PCR加等位基因特異寡核苷酸探針斑點雜交(ASO),仍未知突變點者則用測序法明確。
擴增含有密碼子6的β珠蛋白片段的引物,及能夠區別這兩個特異的等位基因的寡核苷酸探針(ASO)已經報導過。βA純事細胞和βb純合細胞和βS純合細胞在同一組織培養瓶中共同培養數天。將用相差顯微鏡觀察到的混合培養的單個細胞轉入溥塑膠胡管內。分別將單個細胞轉入含裂解液的pCR管中,保溫後,加入pCR緩衝液,緩中有...
原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交。使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內RNA表達的一種原位雜交技術。其...
二級學科),主要組織相容性複合體和遺傳(三級學科)常用技術有:PCR-SSO(對PCR擴增產物作特異性寡核苷酸探針雜交)、PCR-SSP(以等位基因特異性引物擴增模板DNA直接分析PCR產物的特性)、PCR-RLFP(對類別特異性引物擴增產物作限制性內切酶切割,分析片段長度多態性)和基於測序的HLA分型(對PCR擴增產物直接測序)。
儘管克隆探針較特異,但通過細心篩選序列和/或選擇相對長的序列(>30nt)亦可設計出非常特異的寡核苷酸探針。最常用的寡核苷酸探針有18~40個鹼基,合成儀可有效地合成至少50個鹼基的探針。篩選寡核苷酸針的原則 下面是篩選寡核苷酸針的一些原則。一.長18~50nt,較長探針雜交時間較長,合成量低;較短探針特異性會...
套用較多的檢測染色體亞端粒的方法包括染色體核型分析,螢光原位雜交(FISH),但是前者不能檢出亞端粒微小的基因重排,而後者費時、費力、又非常昂貴,不易推廣。MLPA-P036和MLPA-P070試劑盒,針對每一個染色體的末端都設計有一個特異性探針,它經濟、高效、快速,可以用於檢測亞端粒的基因重排[P,Q],揭示部分智障...
(1)點突變導致的疾病 如肝豆狀核變性、家族性肌萎縮側索硬化症、多巴反應性肌張力障礙等,可通過限制性片段長度多態性聚合酶鏈反應(PCR-RFLP)技術、PCR產物結合等位基因特異性寡核苷酸(PCR-ASO)雜交法等技術檢測已知突變,也可先用PCR-單鏈構象多態性(SSCP )進行篩選,還可直接進行基因測序。(2)基因...
1999年已完成全部序列分析及基因定位,在此區域內共確認了224個基因座位中128個為功能性基因,其中39.8%和免疫功能相關。HLA基因根據其編碼分子的分布與功能不同分為3個區,即Ⅰ類基因區,Ⅱ類基因區,Ⅲ類基因區。HlA複合體中很多基因座位的DNA序列在人群中存在許多變異體,即HLA含大量的等位基因。由於來自父母的...
已經獲得一些生物的全部基因序列,包括141種病毒,幾種細菌(流感嗜血桿菌、產甲烷球菌、支原體M.genitalium及實驗室常用的大腸桿菌等)和一種真核生物(釀酒酵母),且數量還在增長。因此,將一種或幾種病原微生物的全部或部分特異的保守序列集成在一塊晶片上,可快速、簡便地檢測出病原體,從而對疾病作出診斷及鑑別診斷...