形態特徵
本種的植物形態與杭白芷一致。根圓錐形,表面灰黃色至黃棕色,皮孔樣的橫向突起散生,斷面灰白色,粉性略差,油性較大。
參見白芷(原變種)
分布範圍
祁白芷主產河北安國,禹白芷主產河南長葛、禹縣。北方的一些省區有栽培,多自產自銷,少數調省外。
主要價值
【藥材】:長圓錐形,長10-25cm,直徑1.5-5cm,表面灰黃色至黃棕色,有多數縱皺紋及支根痕。有皮孔樣的橫向突起,習稱“疙瘩丁”。
頂端有凹陷的莖痕,質硬,斷面灰白色,粉性,氣芳香,味辛,微苦。
【飲片】:圓形橫切片,
直徑1.5-2.5cm,厚2-3mm,切面類白色或灰白色,形成層環紋棕色,明顯,圓形,木質部約占斷面的1/3,具放射狀紋理。
皮部有多數棕色油點,周邊灰棕色或黃棕色。
【用途】:功效參見杭白芷。
RAPD分析
【目的】:對中藥白芷的種質資源進行分析。
【方法】:用12個隨機引物對野生白芷、
杭白芷的4個居群超過17個個體的基因組DNA進行RAPD分析。結果:共擴增出40個位點,其中多態位點26個,占6.5%;祁、杭白芷的多態位點的百分率顯示出低水平的
遺傳變異。根據RAPDistance分析,祁、杭間的遺傳距離(0.160)小於祁白芷居群內單株間和杭白芷不同居群間遺傳距離,並且它們都小於野生白芷與祁、杭白芷間的遺傳距離。
【結論】:祁、杭白芷應屬同一類群,與野生白芷有一定區別。 關鍵字野生白芷祁白芷杭白芷RAPD種質分析白芷為常用中藥。按國內用藥歷史和習慣,現代所用
商品藥材均為栽培品,分為祁(禹)白芷和杭(川)白芷兩大類,由於對其原野生植物來源尚未真正搞清,白芷類藥材種名鑑定至今尚無統一的定論。據有關文獻報導[1],祁禹)白芷與分布於東北的興安白芷(大活)為同種植物,定名為白芷Angelicadahurica(Fisch.)Benth.etHook.,而杭(川)白芷則分別作為獨立種或共同作為白芷的變種,定名為A.dahurica(Fisch.)Benth.etHook.varformosana(Boiss)shanetYuan[2]。因此,我們對上述
興安白芷、祁白芷、杭白芷三者進行了RAPD分析,探索相互間分子遺傳關係和分類地位,為正確劃分白芷的種類提供依據。
儀器試劑和材料
1.1儀器PROGENETHERMALCYCLER(Techne公司,
英國);Micro-MB3616型高速離 心機(IEC公司,
美國);UV-Ⅰ型多功能紫外透射儀(北京市新技術套用研究所)。
1.2試劑Taq酶(U-PBiotech.IncUSA);
瓊脂糖(Promega公司);dNTPs(Promega公司);CTA(Sigma公司);澳化乙錠(Fluka公司);其餘試劑為北京化工廠產的分析純。
1.3材料取各種材料的新鮮葉子,見表1。
編號 | 名稱 | 個體數 | 來源 | 位點總 | 多態位點數(%) |
1 | 杭白芷 | 8 | 浙江杭州藥用植物園 | 40 | 20(50) |
2 | 杭白芷 | 4 | 江蘇南京植物研究所 | 40 | 23(57.5) |
3 | 祁白芷 | 5 | 河北安國縣 | 40 | 18(45) |
4 | 興安白芷 | 12 | | 40 | 9(22.5) |
均12
表1實驗材料來源及多態位點百分率的比較
實驗方法
2.1DNA模板的提取和濃度測定取新鮮葉片少許,置1.5mlEp管中,加入
液氮用鑷子研碎,立即加入500Ul保溫60℃的2XCTAB提取液[CTAl32%,Tris一HCI(pH8.0)100mmol·L-
1,EDTA20mmol·L-1,NaCl1.4mol·L-1,琉基乙醇2%]及20Ul琉基乙醇混勻,60℃保溫40min;加入等體積的
氯仿-異丙醇(24:1)抽提,輕輕顛倒混勻,10000r·min-1’離心10min,吸取上清液,加入1/10體積的10%CTAB溶液,再加入等體積氯仿-
異丙醇(24:1)重複抽提1次,吸取上清液加入等體積的沉澱緩衝液[CTAB1%,Tris-HCI(pH8.0)50mmol·L-1,EDTA10mmol·L-1,琉基乙醇1%],室溫下放置30min以上,10000r·min-1離心10min,小心去上清液,分別用70%乙醇和無水
乙醇各洗滌1次,棄掉洗液揮乾。用分光光度計測定DNA濃度後進行PCR擴增。所用引物編號及其序列見表2。2.2RAPD擴增反應體系總體積50UL,其中引物為lmmol·L-1’,總DNA約150ng,Taq酶
2U,dNTPs各0。05mmol·L-1。擴增程度為預變性5min,94℃40s,38℃45s,72℃45s40個循環,後延伸72℃5min。取10UL擴增產物於1.0%
瓊脂糖凝膠上用1XTAE
電泳緩衝液電泳,紫外檢測拍照(見圖1)。