真養產鹼桿菌，隨著上世紀塑膠工業的發展，人們的衣食住行已直接或間接地和塑膠聯繫在一起了，塑膠為人類的發展作出了巨大貢獻。但是，由於塑膠的不可降解性，其給人類生存環境帶來的危害也越來越大。為解決這一問題，國內外科學家相繼開展了生物可降解塑膠的研究與開發。
利用微生物生產的生物降解塑膠：聚-β-羥基丁酸(Poly-β-hydroxybutyrate,PHB)、聚-β-羥基丁酸-co-β-羥基戊酸共聚物(Poly-β-hydroxybutyrate-co-β-hydroxyvalerate,PHBV)成了這類研究中的一個熱門。研究表明，PHB、PHBV具有很好的熱可塑性，其抗衝擊強度，延展性和熱穩定性均可和化學塑膠相媲美，甚至更優。PHB、PHBV是細菌細胞內的儲存物質，它作為細胞內碳源和能量參與細胞的物質代謝。PHB、PHBV被微生物徹底分解後，其最終產物是二氧化碳和水，對環境無任何危害。
基本介紹
- 中文名：真養產鹼桿菌
- 外文名：Alcaligenes eutrophus
- 類型：微生物
- 作用：積累PHB、PHBV
形態特徵,經濟用途,培養方式,分析方法,參考文獻,
形態特徵
【待完善】
經濟用途
研究表明，真養產鹼桿菌(Alcaligenes eutrophus)是一種優良的積累PHB、PHBV的細菌。因而真養產鹼桿菌被套用於發酵法生產PHB、PHBV
培養方式
1)基礎培養基(g/L) 果糖20g(單獨滅菌)；磷酸氫二鈉4g；硫酸鎂0.4g；硫酸銨1.5g；磷酸二氫鉀1.3g；微量元素溶液1ml/L；蒸餾水1L；pH7.0；115℃滅菌20min。
2)微量元素溶液(g/L) FeSO4·7H2O 10g；ZnSO4·7H2O 2．25g;CuSO4·5H2O 1g;MnSO4·5H2O 0.5g;CaCl2·2H2O 2g;Na2B4O4·10H2O 0.23g;(NH4)6Mo7O24 0.1g;35%HCl 10ml。
3)斜面培養基(g/L) 酵母浸膏10g；蛋白腖10g；牛肉膏5g；氯化鈉3g；瓊脂20g；蒸餾水1000ml，pH7.0，115℃滅菌20min。
4)選擇培養基(g/L) 葡萄糖10g；(NH4)2SO4 0.75g；Na2HPO4·12H2O 2g；KH2PO4 0.65g；MgSO4 0.2g；微量元素溶液0.5ml；蒸餾水1000ml；pH7.0；115℃滅菌20min。
5)斜面培養 恆溫培養箱中，30℃，培養48h。用於菌種傳代及保藏。
6)搖瓶培養 250ml三角瓶，裝入20ml培養基，接種後置旋轉式搖床上，200r/min，30℃，振盪培養48h。
7)平皿培養 直徑9cm的平皿，裝入20ml選擇培養基，恆溫培養箱中，30℃，培養48h。用於突變株的篩選。
分析方法
1)生長量 (1)菌體濃度：將發酵液適當稀釋後，於620nm處測O.D值。(2)菌體乾重：取發酵液10ml，離心收集菌體，經水洗2次後，於80℃乾燥至恆重後稱重。
2)氨態氮的測定 甲醛法。
3)還原糖的測定 3，5－二硝基水楊酸法。
4)PHB的測定 (1)氣相色譜法。(2)硫酸色譜法。
參考文獻
〔1〕章名春.工業微生物誘變育種.北京：科學出版社，1984
〔2〕Karel k,Jozef Deley.Arch Microbiol,1977,114:101
〔3〕Schlegel H G,Gottschal K G.Biochem.Z,1965,341:249
〔4〕Holmes PA,Wright LF,Collins SH.European Patent Ep,1983,0069497
〔5〕陳琦等.利用葡萄糖發酵產聚-β-羥基丁酸菌株的選育.微生物學通報，1994，21(6)：333
〔6〕北京大學生物系生物化學教研室.生物化學試驗指導.北京：高等教育出版社，1984
〔7〕G.Braunegg,B.Sonnleither,and R M,Lafferty,European J.Appl.Microbiol.Biotechnol,1978,6,29-37
〔8〕Takahiro Suzuki,Appl.Microbiol Biotechnol,1986,23:322～329
〔9〕Biotechnology and bioengineering,1994.439
〔10〕Sei Kwang hahn.Biotechnology Techniques,1993,7(3):17～21
