《盆底組織成纖維細胞Mfn2表達與盆腔器官脫垂的機制研究》是依託北京大學，由陸葉擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：盆底組織成纖維細胞Mfn2表達與盆腔器官脫垂的機制研究
- 項目負責人：陸葉
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
目前對盆腔器官脫垂（POP）的實驗室研究多集中在細胞外基質，如組織中膠原含量變化方面，而對產生這些膠原的成纖維細胞的功能變化研究很少。線粒體融合蛋白2（Mfn2）可介導線粒體融合，參與細胞信號轉導、調節細胞增殖及凋亡等過程，並與細胞老化相關，因此，明確Mfn2如何影響成纖維細胞的功能意義重大。我們的前期研究發現，POP患者盆底組織成纖維細胞中I、III型前膠原蛋白表達顯著低於非POP患者，而Mfn2表達顯著增高，推測Mfn2通過調節線粒體融合或信號轉導，影響成纖維細胞的增殖和凋亡以及前膠原蛋白合成。因此，我們擬培養POP和非POP患者盆底組織成纖維細胞，同時構建Mfn2真核表達載體，在成纖維細胞中過表達和抑制表達Mfn2，檢測成纖維細胞增殖和凋亡以及I、III型前膠原蛋白表達量及線粒體形態，以證實Mfn2對成纖維細胞的影響。通過在體和離體、整體和細胞不同水平的研究探討POP的發病機制。
結題摘要
目前對盆腔器官脫垂（Pelvic organ prolapse，POP）的研究集中在細胞外基質，很少有人關注產生細胞外基質的成纖維細胞。線粒體融合蛋白2（Mitofusin 2，Mfn2）作為一種和老化相關的蛋白，和老化相關疾病--POP的關係鮮有報導。我們既往體內試驗證實POP患者骶韌帶成纖維細胞Mfn2表達升高，在此基礎上，我們通過培養POP和非POP患者盆底組織成纖維細胞，檢測兩組細胞中Mfn2和前膠原蛋白的表達差異。同時構建慢病毒表達載體，在成纖維細胞中過表達和抑制表達Mfn2，檢測成纖維細胞增殖和凋亡以及I、III型前膠原蛋白表達量，結果為POP組體外培養的成纖維細胞Mfn2表達升高，而I，III型前膠原蛋白表達下降，在非POP組成纖維細胞中轉染慢病毒過表達載體後，Mfn2表達上升，而前膠原蛋白表達下降，且成纖維細胞的增殖被抑制，凋亡增加。而在POP組抑制Mfn2表達後得到了相反的結果，從而通過細胞水平的研究進一步揭示了Mfn2在POP發生髮展過程中作用。另外，老化相關基因--線粒體 DNA 4977缺失情況與POP的關係研究甚少。本課題組通過研究POP患者子宮骶韌帶組織和mtDNA4977缺失的變化，證實DNA4977缺失在POP患者中顯著增加。為揭示POP的發病機制提供了理論依據。
