皮膚直接免疫螢光檢查法適用於非感染性大皰性皮膚病如各型天皰瘡、類天皰瘡、皰疹樣皮炎、線狀IgA大皰性皮膚病、獲得性大皰性表皮鬆解症等。
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操作名稱
皮膚直接免疫螢光檢查法
適應證
皮膚直接免疫螢光檢查法適用於:
1.非感染性大皰性皮膚病如各型天皰瘡、類天皰瘡、皰疹樣皮炎、線狀IgA大皰性皮膚病、獲得性大皰性表皮鬆解症等。
2.結締組織病如紅斑狼瘡等。
3.各種血管炎。
4.某些感染性皮膚病。
5.皮膚腫瘤等。
禁忌證
嚴重瘢痕體質者(尤其是特殊部位)應慎重,需要徵求患者同意。
準備
為了檢查各種抗原,需要準備多種特異性螢光抗體;皮膚活檢標本。
方法
1.方法
(1)從患者受累或可能受累的皮膚組織黏膜組織處切取活檢標本,做冷凍切片,或石蠟切片(特殊方法)。
(2)將一定濃度的螢光素標記特異性抗體與組織抗原共同孵育,設定適宜的孵育溫度和時間,使組織抗原與抗體充分結合。
(3)在螢光顯微鏡下觀察,如發現反應部位顯示相應螢光,即為陽性反應,根據螢光分布和形態確定抗原部位和性質。
2.皮膚直接免疫螢光檢查的基本改變
(1)基底膜螢光
①系統性紅斑狼瘡、盤狀紅斑狼瘡、亞急性皮膚型紅斑狼瘡:基底膜帶呈線狀、顆粒狀或團塊狀螢光,以IgG及C3為主。
②皰疹樣皮炎:真皮乳頭內基底膜帶顆粒狀IgA沉積。
③類天皰瘡、獲得性大皰性表皮鬆解症:線狀IgG及C3沉積。
④線狀IgA大皰性皮膚病:基底膜帶線狀IgA沉積。
⑤扁平苔蘚:真皮乳頭層內瀰漫性或灶性、球狀IgM和C3沉積。
(2)表皮細胞間螢光尋常型、紅斑型、落葉型、增殖型天皰瘡及皰疹樣天皰瘡等,可見表皮細胞間IgG沉積。
(3)血管壁螢光多種血管性皮膚病,如白細胞碎裂性血管炎、結節性多動脈炎等顯示管壁及管周螢光。
注意事項
1.原則上,每次實驗應該設有陽性和陰性對照。
2.取材部位 在水皰性皮膚病中,應儘量取最早期水皰損害,保持皰的完整性,或取初發的紅斑性損害;在紅斑狼瘡中,取充分發展的皮損處組織;系統性紅斑狼瘡,亦可取未受累或避光處的皮膚組織,如果為陽性則更有診斷和鑑別診斷價值。
3.標本應及時檢查,並且應避光保存,否則螢光會淬滅。