病料是從得病的動物(多為死後)身上採集的組織或器官,用來進行疾病的研究工作。
病料的採取,剖檢前檢查,取材時間,器械的消毒,病料採取,病料的保存,病料的運送,
病料的採取
剖檢前檢查
凡發現患畜(包括馬、牛、羊及豬等),急性死亡時,必須先用顯微鏡檢查其末 梢血液抹片中是否有炭疽桿菌存在。如懷疑是炭疽,則不可隨意剖檢,只有在確定不是炭疽時方可 進行剖檢。
取材時間
內臟病料的採取,須於死亡後立即進行,最好不超過6h,否則時間過長,由腸內 侵人其他細菌,易使屍體腐敗,影響病原微生物的檢出。
器械的消毒
刀、剪、鑷子、注射器、針頭等煮沸消毒30min。器皿(玻璃製品、陶製品、琺 琅製品等)可用高壓滅菌或乾烤滅菌。軟木塞、橡皮塞置於0.5%石炭酸水溶液中煮沸lOmin。採取 一種病料,使用一套器械和容器,不可混用。
病料採取
應根據不同的傳染病,相應地採取該病常侵害的臟器或內容物。如敗血性傳染病 可採取心、肝、脾、肺、腎、淋巴結、胃、腸等;腸毒血症採取小腸及其內容物;有神經症狀的傳 染病採取腦、脊髓等。如無法估計是哪種傳染病,可進行全面採取。檢查血清抗體時,採取血液 ,凝固後析出血清,將血清裝入滅菌小瓶送檢。為了避免雜菌污染,病變檢查應待病料採取完畢後再進行。各種組織及液體的病料採取方法如下。
(1)膿汁 用滅菌注射器或吸管抽取或吸出膿腫深部的膿汁,置於滅菌試管中。若為開口的化膿 灶或鼻腔時,則用無菌棉簽浸蘸後,放在滅菌試管中。
(2)淋巴結及內臟 將淋巴結、肺、肝、脾及腎等有病變的部位各採取1~2cm3的小方塊,分別置 於滅菌試管或平皿中。若為供病理組織切片的材料,應將典型病變部分及相連的健康組織一併切取 ,組織塊的大小每邊約2cm左右,同時要避免使用金屬容器,尤其是當病料供色素檢查時(如馬傳貧 、馬腦炎及焦蟲病等),更應注意。
(3)血液
血清:以無菌操作吸取血液lOml,置於滅菌試管中,待血液凝固(經1~2天)析出血清後,吸出血清 置於另一滅菌試管內,如供血清學反應時,可於每毫升中加入5%石炭酸水溶液l~2滴。
全血:
採取lOml全血,立即注入盛有5%檸檬酸鈉lml的滅菌試管中,搓轉混合片刻後即可。
心血:
心血通常在右心房處採取,先用燒紅的鐵片或刀片烙燙心肌表面,然後用滅菌的尖刃外 科刀自烙燙處刺一小孔,再用滅菌吸管或注射器吸出血液,盛於滅菌試管中。
(4)乳汁
乳房先用消毒藥水洗淨(取乳者的手亦應事先消毒),並把乳房附近的毛刷濕,最初所 擠的3~4股乳汁棄去,然後再採集10mi左右乳汁於滅菌試管中。若僅供顯微鏡直接染色檢查,則可 於其中加人o.5%的福馬林液。
(5)膽汁
先用燒紅的刀片或鐵片烙燙膽囊表面,再用滅菌吸管或注射器刺人膽囊內吸取膽汁, 盛於滅菌試管中。
(6)腸
用燒紅刀片或鐵片將欲採取的腸表面烙燙後穿一小孔,持滅菌棉簽插入腸內,以便採取 腸管黏膜或其內容物;亦可用線紮緊一段腸道(約6cm)兩端,然後將兩端切斷,置於滅菌器皿內。
(7)皮膚
取大小約10cm×10cm的皮膚一塊,保存於30%甘油緩衝溶液中,或10%飽和鹽水溶液 中,或10%福馬林液中。
(8)胎兒
將流產後的整個胎兒,用塑膠薄膜、油布或數層不透水的油紙包緊,裝入木箱內,立 即送往實驗室。
(9)小家畜及家禽
將整個屍體包入不透水塑膠薄膜、油紙或油布中,裝入木箱內,送往實驗室。
(10)骨頭
需要完整的骨頭標本時,應將附著的肌肉和韌帶等全部除去,表面撒上食鹽,然後包 於浸過5%石炭酸水或o.1%升汞液的紗布或麻布中,裝於木箱內送到實驗室。
(11)腦、脊髓
如採取腦、脊髓作病毒檢查,可將腦、脊髓浸入50%甘油鹽水液中或將整個頭部 割下,包人浸過o.1%升汞液的紗布或油布中,裝入木箱或鐵桶中送檢。
供顯微鏡檢查用的膿汁、血液及粘液,可用載玻片作成抹片,組織塊可作成觸片,然後在兩塊玻 片之間靠近兩端邊沿處各墊一根火柴棍或牙籤,以免抹片或觸片上的病料互相接觸。如玻片有多張 ,可按上法依次墊火柴棍或牙籤重疊起來,最上面的一張玻片上的塗、抹面應朝下,最後用細線包紮,玻片上應註明口碼,並另附說明。
病料的保存
病料採取後,如不能立即檢驗,或需送往有關單位檢驗,應當加入適量的保存劑病料儘量保持新鮮狀態。
1.細菌檢驗材料的保存 將採取的臟器組織塊,保存於飽和的氯化鈉溶液或30%甘油緩衝鹽水 溶液中,容器加塞封固。如系液體,可裝在封閉的毛細玻管或試管運送。飽和氯化鈉溶液的配製法 是:蒸餾水l00ml,氯化鈉38~39g,充分攪拌溶解後,用數層紗布過濾, 高壓滅菌後備用。30%甘油緩衝鹽水溶液的配製法是:中性甘油30ml,氯化鈉0.5g,鹼性磷酸鈉 1.0g,加蒸餾水至100ml,混合後高壓滅菌備用。
2.病毒檢驗材料的保存 將採取的臟器組織塊,保存於50%甘油緩衝鹽水溶液或雞蛋生理鹽水 中,容器加塞封固。50%甘油緩衝鹽水溶液的配製法是:氯化鈉2.5g,酸性磷酸 鈉0.46g,鹼性磷酸鈉10.74g,溶於100ml中性蒸餾水中,加純中性甘油150m1,中性蒸餾水50ml, 混合分裝後,高壓滅菌備用。雞蛋生理鹽水的配製法是:先將新鮮的雞蛋表面用碘酒消毒,然後打 開將內容物傾人滅菌容器內,按全蛋9份加入滅菌生理鹽水1份,搖勻後用滅菌紗布過濾,再加熱至 56~58℃,持續30min,第2天及第3天按上法再加熱一次, 即可套用。
3.病理組織學檢驗材料的保存 將採取的臟器組織塊放人lo%福馬林溶液或95%酒精中固定 ;固定液的用量應為送檢病料的10倍以上。如用10%福馬林溶液固定,應在24h後換新鮮溶液一 次。嚴寒季節為防病料凍結,可將上述固定好的組織塊取出,保存於甘油和10%福馬林等量混合 液中。
病料的運送
裝病料的容器要一一標號,詳細記錄,並附病料送檢單。病料包裝容器要牢固,做到安全穩妥 ,對於危險材料。怕熱或怕冷的材料要分別採取措施。一般病原學檢驗的材料怕熱,應放人加有冰 塊的保溫瓶或冷藏箱內送檢,如無冰塊,可在保溫瓶內放人氯化銨450~500g,加水1500ml,上層 放病料,這樣能使保溫瓶內保持0℃達24h。供病理學檢驗的材料放在10%福馬林溶液中,不必冷藏。包裝好的病料要儘快運送,長途以空運為宜。