異質性胞核核糖核蛋白(RA33/36)

RA33/36可以出現在疾病的起病階段,所以有早期診斷價值。

RA33/36抗原的製備及其抗體的檢測:用Ehrlich腹水癌細胞提取的抗原檢測抗RA 33/36抗體。簡述如下,A型玻璃勻漿器破壞細胞膜,保存細胞核,750 g離心5 分鐘,取沉澱,棄上清。加入4 ml核懸浮(10 mmol/L pH 7.9 HEPES-KOH緩衝液含有2.5 mmol/L MgCl 25%甘油),攪拌30分鐘,加入4 ml破核液(10 mmol/L pH 7.9 HEPES-KOH緩 沖液含有0.88 mmol/L NH4Cl)攪拌30分鐘,50 000 g離心20分鐘,取上清,棄沉澱 。上清液透析24~48小時,分裝,-80 ℃冰櫃保存。選用5%濃縮膠,12%分離膠電泳,樣品 入濃縮膠前5 mA,進入濃縮膠後提高電流至10 mA,樣品進入分離膠後改電流15 mA。電泳結束後,將抗原轉印在硝酸纖維膜上。先後加血清、辣根過氧化物酶標記的羊抗人IgG抗體和 底物液顯色。凡在蛋白質分子量為33 000和/或36 000區帶出現條帶者為陽性。
(1)RA患者:抗RA33/36抗體陽性率?。特異性43.5%?。
(2)正常人:健康成人為?。
(3)其他風濕病:陽性率?。

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