異硫氰酸胍

異硫氰酸胍是一種化學物質，分子式是CH5N3·HSCN。

基本介紹

• 中文名：異硫氰酸胍
• 外文名：Guanidine isothiocyanate 
• 分子式：CH5N3·HSCN
• 分子量：118.16

基本信息

簡稱 GITC

外觀:白色結晶

熔點:115-120℃

PH(4%水溶液):4.5-7.0

紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit

紫外吸收(410nm,6M):≤0.05abs unit

乾燥失重:≤0.5%

用途：用於變性裂解細胞；提取RNA和DNA。無RNA酶和DNA酶活性

TRIzol是一種新型總RNA抽提試劑，可以直接從細胞或組織中提取總RNA。其含有苯酚、異硫氰酸胍等物質，能迅速破碎細胞並抑制細胞釋放出的核酸酶。

提取

異硫氰酸胍法提取製備模板核酸此法主要用於RNA的提取.標本為組織細胞及血清等.

1.異硫氰酸胍消化液

異硫氰酸胍4mol/L

檸檬酸鈉(PH7.0)25mmol/L

十二烷基肌酸鈉0.5%

β-巰基乙醇0.1mol/L

2.消化方法：用50～100ul細胞懸液及血清，加等體積的異硫氰酸胍消化液振混勻後，或65℃1小時，或室溫放置數分鐘，然後加1/10體積的3mmol/LpH5.2的醋酸鈉緩衝液，再加等體積的酚：氯仿，用力振搖約10s，10000r/min，離心5min，取上清加等體積異丙醇-20℃放置3h後，14000r/min離心15min，沉定用75%冰冷乙醇離心洗滌1～2次，真空乾燥，沉澱用TE緩衝液溶解即可用於逆轉錄PCR擴增，或放-20℃保存。