異煙肼比色法是甾體激素類藥物常用的一種含量測定方法。
基本介紹
- 中文名:異煙肼比色法
- 外文名:Isoniazide colorimetry
- 所屬類別:藥物分析
- 反應條件:酸性
原理,影響因素,反應的專屬性,套用,
原理
甾體激素C3-酮基及其他位置上的酮基能在酸性條件下與羰基試劑異煙肼縮合,形成黃色的異煙腙,在240nm波長附近具有最大吸收。反應方程式如下:
影響因素
溶劑的選擇
用無水乙醇和無水甲醇作為溶劑均能得到滿意的結果。試劑在無水甲醇中的穩定性較好,呈色強度也比在乙醇中高,但是由於它對植物油的溶解度較乙醇小,所以,若樣品為植物油溶液時,一般選用乙醇作溶劑。
酸的種類和濃度
呈色反應當須在酸性條件下進行,當酸與異煙肼的摩爾比為2:1時可獲得最大吸光度。鹽酸最常用。
水分、溫度、光線和氧的影響
當溶液中含水量增高時,吸光度隨之下降。因為甾體激素與異煙肼的縮合反應為可逆反應,水分可促使產物水解而使反應逆轉。溫度升高,反應速度加快。在具塞玻璃容器反應,光與氧對反應的影響不大。
反應的專屬性
C3=O> C17O,C20=O ,C11=O不反應。
套用
由於比色法影響因素較多,該方法已被高效液相色譜法取代。