生物化學實驗技術的發展，使生物化學的理論研究和實際套用得到了快速發展，不僅進一步推動了生命科學研究的迅猛發展，而且為工業、農業、食品、醫藥、環保等科學的發展提供了重要的理論基礎和實驗手段。因此，生物化學實驗技術是推動生物化學及其他相關學科發展的重要工具，是生物科學工作者必須掌握的知識與技能。 李菡、郭興啟編寫的《生物化學實驗技術原理和方法(第2版全國高等農林院校十二五規劃教材)》是為配合生物化學理論課學習而編寫的一本實驗教材。全書分為兩篇，上篇為生物化學實驗技術原理，包括生物化學實驗樣品製備技術、電泳技術、離心技術、層析技術、光譜分析技術、核技術在生物科學中的套用和免疫化學技術等；下篇為生物化學實驗方法，共選編了50個實驗項目，內容包括糖類化學、脂類化學、蛋白質化學、核酸化學、酶化學、維生素、新陳代謝和免疫化學等。該書所選的實驗均系編者多年來在教學和科研中反覆驗證的比較成熟的實驗方法，使用者可根據專業性質和教學條件選擇適當的內容。
基本介紹
- 書名：生物化學實驗技術原理和方法
- 出版社：中國農業出版社
- 頁數：255頁
- ISBN：7109078094
- 語種：簡體中文
- 作者：王憲澤
- 出版日期：2002年9月1日
- 開本：16開
- 品牌：中國農業出版社
內容簡介,圖書目錄,目錄,
內容簡介
生物化學實驗技術的發展，使生物化學的理論研究和實際套用得到了快速發展，不僅進一步大大推動了生命科學研究的迅猛發展。同時為工業、農業、食品、醫藥、環保等科學的發展提供了重要的理論基礎和實驗手段。因此，生物化學實驗技術是推動生物化學及其他相關學科發展的重要工具，成為生物科學工作者必須掌握的知識與技能。
本教材是為配合生物化學基礎理論課學習而編寫的一本實驗課教材。全書分為兩篇，第一篇為實驗技術原理，包括生物化學實驗樣品製備技術、離心技術、層析技術、電泳技術、分光光度法、酶的分離純化及活力測定、放射性同位素技術和免疫化學技術；第二篇為實驗方法部分，共選編了51個實驗項目，內容包括糖類化學、脂類化學、蛋白質化學、核酸化學、酶化學、維生素、新陳代謝和免疫化學等。本教材所選的實驗均系編者所在單位多年來在教學和科研中反覆驗證的比較成熟的實驗方法，大多數實驗項目可在2～3學時內完成，使用者可根據專業性質和教學條件選擇適當的內容。
本教材是為配合生物化學基礎理論課學習而編寫的一本實驗課教材。全書分為兩篇，第一篇為實驗技術原理，包括生物化學實驗樣品製備技術、離心技術、層析技術、電泳技術、分光光度法、酶的分離純化及活力測定、放射性同位素技術和免疫化學技術；第二篇為實驗方法部分，共選編了51個實驗項目，內容包括糖類化學、脂類化學、蛋白質化學、核酸化學、酶化學、維生素、新陳代謝和免疫化學等。本教材所選的實驗均系編者所在單位多年來在教學和科研中反覆驗證的比較成熟的實驗方法，大多數實驗項目可在2～3學時內完成，使用者可根據專業性質和教學條件選擇適當的內容。
圖書目錄
前言
第一章 生物化學實驗樣品製備技術
第二章 離心技術
第三章 層析技術
第四章 電泳技術
第五章 分光光度法
第六章 酶的分離純化及活力測定
第七章 放射性同位素技術
第八章 免疫化學技術
第九章 糖類化學
第十章 脂類化學
第十一章 蛋白質化學
第十二章 核酸化學
第十三章 酶化學
第十四章 維生素
第十五章 新陳代謝
第十六章 免疫化學
附錄
主要參考文獻
第一章 生物化學實驗樣品製備技術
第二章 離心技術
第三章 層析技術
第四章 電泳技術
第五章 分光光度法
第六章 酶的分離純化及活力測定
第七章 放射性同位素技術
第八章 免疫化學技術
第九章 糖類化學
第十章 脂類化學
第十一章 蛋白質化學
第十二章 核酸化學
第十三章 酶化學
第十四章 維生素
第十五章 新陳代謝
第十六章 免疫化學
附錄
主要參考文獻
目錄
第二版前言
第一版前言
上篇 生物化學實驗技術原理
第一章 生物化學實驗樣品製備技術
第一節 植物樣品的製備
一、植株組織樣品的採集、製備和保存
二、籽粒樣品的採集、製備和保存
三、瓜果樣品的採集、製備和保存
四、丙酮乾粉的製備
第二節 動物樣品的製備
一、血液樣品
二、組織樣品
三、尿液樣品
第三節 微生物樣品的製備
一、微生物細胞的收集方法
二、幹細胞製劑的製備
三、破碎細胞的方法
第二章 電泳技術
第一節 基本原理
一、影響電泳的因素
二、電泳的分類
第二節 幾種常用電泳技術介紹
一、醋酸纖維素薄膜電泳
二、瓊脂糖凝膠電泳
三、聚丙烯醯胺凝膠電泳
四、聚丙烯醯胺梯度凝膠電泳
五、等電聚焦電泳
六、雙向電泳
七、變性梯度凝膠電泳
第三章 離心技術
第一節 基本原理
一、離心力
二、沉降係數
第二節 離心機的種類和基本結構
一、種類
二、基本結構
三、分析型超速離心機
第三節 製備超離心法
一、差速離心法
二、密度梯度離心法
第四章 層析技術
第一節 層析技術的原理和分類
一、層析技術的原理
二、層析技術的分類
第二節 幾種常用的層析法
一、分配層析
二、薄層層析
三、凝膠層析
四、親和層析
五、離子交換層析
六、吸附層析
七、高效液相色譜
八、氣相色譜
第五章 光譜分析技術
第一節 基本原理
第二節 可見及紫外吸收光譜分析
一、可見及紫外分光光度計
二、常用的可見及紫外吸收光譜分析方法
三、影響可見及紫外吸收光譜分析的因素
第三節 螢光發射光譜分析
一、螢光分光光度計
二、常用的螢光分析方法
三、影響螢光分析的因素
四、螢光分析的套用
第六章 核技術在生物科學中的套用
第一節 放射性核素的特點
一、同位素及其穩定性
二、原子核衰變及放射性
三、放射性衰變規律
四、核素的測量
第二節 同位素示蹤技術在生化分析中的套用
一、同位素示蹤技術在代謝分析中的套用
二、同位素示蹤技術在分子雜交中的套用
第三節 輻射安全防護及放射性實驗室規則
一、核輻射的個人劑量限制
二、放射性污染
三、放射性廢物的處理
四、放射性實驗室規則
第七章 免疫化學技術
第一節 免疫化學技術理論基礎
一、抗原的相關概念
二、抗體的結構和功能
三、抗原抗體的結合
四、動物的常規免疫
第二節 常見免疫化學技術
一、酶聯免疫吸附試驗
二、免疫印跡
三、原位雜交組織化學
主要參考文獻
下篇 生物化學實驗方法
第八章 糖類化學
實驗1 可溶性糖的定量測定
方法一 蒽酮法
方法二 苯酚-硫酸法
實驗2 還原糖和總糖的測定——3，5-二硝基水楊酸比色法
實驗3 血糖的定量測定
方法一 葡萄糖氧化酶法
方法二 鄰甲苯胺法
實驗4 直鏈澱粉和支鏈澱粉含量的測定——碘比色法
實驗5 可溶性糖的矽膠G薄層層析
第九章 脂類化學
實驗6 粗脂肪的提取和定量測定——索氏抽提法
實驗7 血清三醯甘油的含量測定
實驗8 血清總膽固醇含量的測定
方法一 磷硫鐵法
方法二 鄰苯二甲醛法
實驗9 酮體的生成與利用
第十章 蛋白質化學
實驗10 紙層析法分離鑑定胺基酸
實驗11 穀物種子中賴氨酸含量的測定
實驗12 種子蛋白的胺基酸組分分析——胺基酸自動分析儀法
實驗13 穀物種子蛋白質組分的分離提取
實驗14 蛋白質的兩性性質和酪蛋白等電點的測定
實驗15 血紅蛋白的兩性解離
實驗16 蛋白質含量測定
方法一 凱氏定氮法
方法二 雙縮脲法
方法三 Folin-酚法
方法四 考馬斯亮藍G-250法
方法五 紫外吸收法
方法六 BCA法
實驗17 蛋白質相對分子質量測定
方法一 凝膠過濾法
方法二 SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳法
實驗18 血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳
實驗19 小麥高分子質量麥谷蛋白亞基聚丙烯醯胺凝膠電泳
實驗20 蛋白質印跡——Westernblotting
第十一章 核酸化學
實驗21 核酸含量的測定
方法一 定磷法測定核酸含量
方法二 紫外吸收法測定核酸含量
實驗22 核酸的電泳分離鑑定
方法一 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
方法二 RNA的甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳
方法三 尿素變性聚丙烯醯胺凝膠電泳
實驗23 酵母RNA的分離及組分鑑定
實驗24 質粒DNA的提取與檢測
實驗25 總DNA的提取
方法一 植物總DNA的提取——CTAB法
方法二 動物肝臟中總DNA的提取
實驗26 RNA的提取
方法一 總RNA的小量提取——TRlzol法
方法二 總RNA的大量提取——異硫氰酸胍法
實驗27 聚合酶鏈式反應(PCR)
實驗28 核酸的分子雜交
方法一 Southern印跡雜交
方法二 Northem印跡雜交
第十二章 酶化學
實驗29 枯草桿菌蛋白酶活力測定
實驗30 澱粉酶活性的測定
實驗31 硝酸還原酶活性的測定
實驗32 NBT法測定超氧化物歧化酶(SOD)活力
實驗33 胰凝乳蛋白酶的製備及活力測定
實驗34 精氨酸激酶的分離純化及活力測定
實驗35 影響唾液澱粉酶活力的因素
實驗36 底物濃度對酶促反應速度的影響——過氧化氫酶Km值的測定
實驗37 酶濃度對酶促反應速度的影響——鹼性磷酸酶活性測定
實驗38 過氧化物同工酶聚丙烯醯胺凝膠電泳
第十三章 維生素
實驗39 維生素A的定量測定
實驗40 還原型維生素C含量的測定——2，6-二氯酚靛酚法
實驗41 維生素C含量的測定——紫外比色法
實驗42 維生素B1的定性測定
實驗43 維生素B2的螢光測定
第十四章 新陳代謝
實驗44 糖酵解中間產物的鑑定
實驗45 轉氨基反應的定性鑑定
實驗46 谷丙轉氨酶活性的測定
實驗47 脂肪酸的β氧化
第十五章 免疫化學
實驗48 免疫血清的製備
實驗49 瓊脂擴散法測定抗體效價
實驗50 酶聯免疫吸附法
主要參考文獻
附錄
一、生物化學實驗室規則
二、實驗室安全及防護知識
三、常用儀器的使用方法
四、常用緩衝溶液的配製
五、常用酸鹼指示劑
六、常用酸鹼試劑的濃度及相對密度
七、標準溶液的配製和標定
八、25℃時調整硫酸銨溶液銨飽和度計算表
九、常見元素的相對原子質量
十、數據處理
第一版前言
上篇 生物化學實驗技術原理
第一章 生物化學實驗樣品製備技術
第一節 植物樣品的製備
一、植株組織樣品的採集、製備和保存
二、籽粒樣品的採集、製備和保存
三、瓜果樣品的採集、製備和保存
四、丙酮乾粉的製備
第二節 動物樣品的製備
一、血液樣品
二、組織樣品
三、尿液樣品
第三節 微生物樣品的製備
一、微生物細胞的收集方法
二、幹細胞製劑的製備
三、破碎細胞的方法
第二章 電泳技術
第一節 基本原理
一、影響電泳的因素
二、電泳的分類
第二節 幾種常用電泳技術介紹
一、醋酸纖維素薄膜電泳
二、瓊脂糖凝膠電泳
三、聚丙烯醯胺凝膠電泳
四、聚丙烯醯胺梯度凝膠電泳
五、等電聚焦電泳
六、雙向電泳
七、變性梯度凝膠電泳
第三章 離心技術
第一節 基本原理
一、離心力
二、沉降係數
第二節 離心機的種類和基本結構
一、種類
二、基本結構
三、分析型超速離心機
第三節 製備超離心法
一、差速離心法
二、密度梯度離心法
第四章 層析技術
第一節 層析技術的原理和分類
一、層析技術的原理
二、層析技術的分類
第二節 幾種常用的層析法
一、分配層析
二、薄層層析
三、凝膠層析
四、親和層析
五、離子交換層析
六、吸附層析
七、高效液相色譜
八、氣相色譜
第五章 光譜分析技術
第一節 基本原理
第二節 可見及紫外吸收光譜分析
一、可見及紫外分光光度計
二、常用的可見及紫外吸收光譜分析方法
三、影響可見及紫外吸收光譜分析的因素
第三節 螢光發射光譜分析
一、螢光分光光度計
二、常用的螢光分析方法
三、影響螢光分析的因素
四、螢光分析的套用
第六章 核技術在生物科學中的套用
第一節 放射性核素的特點
一、同位素及其穩定性
二、原子核衰變及放射性
三、放射性衰變規律
四、核素的測量
第二節 同位素示蹤技術在生化分析中的套用
一、同位素示蹤技術在代謝分析中的套用
二、同位素示蹤技術在分子雜交中的套用
第三節 輻射安全防護及放射性實驗室規則
一、核輻射的個人劑量限制
二、放射性污染
三、放射性廢物的處理
四、放射性實驗室規則
第七章 免疫化學技術
第一節 免疫化學技術理論基礎
一、抗原的相關概念
二、抗體的結構和功能
三、抗原抗體的結合
四、動物的常規免疫
第二節 常見免疫化學技術
一、酶聯免疫吸附試驗
二、免疫印跡
三、原位雜交組織化學
主要參考文獻
下篇 生物化學實驗方法
第八章 糖類化學
實驗1 可溶性糖的定量測定
方法一 蒽酮法
方法二 苯酚-硫酸法
實驗2 還原糖和總糖的測定——3，5-二硝基水楊酸比色法
實驗3 血糖的定量測定
方法一 葡萄糖氧化酶法
方法二 鄰甲苯胺法
實驗4 直鏈澱粉和支鏈澱粉含量的測定——碘比色法
實驗5 可溶性糖的矽膠G薄層層析
第九章 脂類化學
實驗6 粗脂肪的提取和定量測定——索氏抽提法
實驗7 血清三醯甘油的含量測定
實驗8 血清總膽固醇含量的測定
方法一 磷硫鐵法
方法二 鄰苯二甲醛法
實驗9 酮體的生成與利用
第十章 蛋白質化學
實驗10 紙層析法分離鑑定胺基酸
實驗11 穀物種子中賴氨酸含量的測定
實驗12 種子蛋白的胺基酸組分分析——胺基酸自動分析儀法
實驗13 穀物種子蛋白質組分的分離提取
實驗14 蛋白質的兩性性質和酪蛋白等電點的測定
實驗15 血紅蛋白的兩性解離
實驗16 蛋白質含量測定
方法一 凱氏定氮法
方法二 雙縮脲法
方法三 Folin-酚法
方法四 考馬斯亮藍G-250法
方法五 紫外吸收法
方法六 BCA法
實驗17 蛋白質相對分子質量測定
方法一 凝膠過濾法
方法二 SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳法
實驗18 血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳
實驗19 小麥高分子質量麥谷蛋白亞基聚丙烯醯胺凝膠電泳
實驗20 蛋白質印跡——Westernblotting
第十一章 核酸化學
實驗21 核酸含量的測定
方法一 定磷法測定核酸含量
方法二 紫外吸收法測定核酸含量
實驗22 核酸的電泳分離鑑定
方法一 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
方法二 RNA的甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳
方法三 尿素變性聚丙烯醯胺凝膠電泳
實驗23 酵母RNA的分離及組分鑑定
實驗24 質粒DNA的提取與檢測
實驗25 總DNA的提取
方法一 植物總DNA的提取——CTAB法
方法二 動物肝臟中總DNA的提取
實驗26 RNA的提取
方法一 總RNA的小量提取——TRlzol法
方法二 總RNA的大量提取——異硫氰酸胍法
實驗27 聚合酶鏈式反應(PCR)
實驗28 核酸的分子雜交
方法一 Southern印跡雜交
方法二 Northem印跡雜交
第十二章 酶化學
實驗29 枯草桿菌蛋白酶活力測定
實驗30 澱粉酶活性的測定
實驗31 硝酸還原酶活性的測定
實驗32 NBT法測定超氧化物歧化酶(SOD)活力
實驗33 胰凝乳蛋白酶的製備及活力測定
實驗34 精氨酸激酶的分離純化及活力測定
實驗35 影響唾液澱粉酶活力的因素
實驗36 底物濃度對酶促反應速度的影響——過氧化氫酶Km值的測定
實驗37 酶濃度對酶促反應速度的影響——鹼性磷酸酶活性測定
實驗38 過氧化物同工酶聚丙烯醯胺凝膠電泳
第十三章 維生素
實驗39 維生素A的定量測定
實驗40 還原型維生素C含量的測定——2，6-二氯酚靛酚法
實驗41 維生素C含量的測定——紫外比色法
實驗42 維生素B1的定性測定
實驗43 維生素B2的螢光測定
第十四章 新陳代謝
實驗44 糖酵解中間產物的鑑定
實驗45 轉氨基反應的定性鑑定
實驗46 谷丙轉氨酶活性的測定
實驗47 脂肪酸的β氧化
第十五章 免疫化學
實驗48 免疫血清的製備
實驗49 瓊脂擴散法測定抗體效價
實驗50 酶聯免疫吸附法
主要參考文獻
附錄
一、生物化學實驗室規則
二、實驗室安全及防護知識
三、常用儀器的使用方法
四、常用緩衝溶液的配製
五、常用酸鹼指示劑
六、常用酸鹼試劑的濃度及相對密度
七、標準溶液的配製和標定
八、25℃時調整硫酸銨溶液銨飽和度計算表
九、常見元素的相對原子質量
十、數據處理
