《甘草酸及其鹽的腸溶製劑和製備方法》是江蘇正大天晴藥業股份有限公司於2003年7月18日申請的專利，該專利的申請號為031320678，公布號為CN1569005，公布日為2005年1月26日，發明人是張來芳、田心、夏春光、張喜全。
《甘草酸及其鹽的腸溶製劑和製備方法》是將甘草酸及其鹽與一定比例的卵磷脂混合，加其他輔料，裝入腸溶膠囊中。該發明的甘草酸及其鹽腸溶製劑，明顯提高了甘草酸及其鹽口服製劑的生物利用度。該發明的製備方法重現性好，適合工業化生產。
2007年，《甘草酸及其鹽的腸溶製劑和製備方法》獲得第五屆江蘇省專利項目獎優秀獎。
基本介紹
- 中文名：甘草酸及其鹽的腸溶製劑和製備方法
- 公布號：CN1569005
- 公布日：2005年1月26日
- 申請號：031320678
- 申請日：2003年7月18日
- 申請人：江蘇正大天晴藥業股份有限公司
- 地址：江蘇省連雲港市新浦區巨龍北路8號
- 發明人：張來芳、田心、夏春光、張喜全
- 分類號：A61K31/56、A61K47/24、A61K9/48、A61P1/16、A61P31/12、A61P37/08
- 代理機構：南京天華專利代理有限責任公司
- 類別：發明專利
- 代理人：徐冬濤
專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,權利要求,實施方式,榮譽表彰,
專利背景
天然植物藥甘草（Glycyrrhiza Uralensis）的根中主要含β構型的甘草酸和極少數的α構型的甘草酸，通過一定的反應，β構型的甘草酸可轉化為α構型的甘草酸，見專利CN1381462A。2003年7月前，中國國內外已有一些甘草酸及其鹽的製劑上市。中國國外以甘草酸為主藥的口服片劑由日本Minophagen藥廠研製的“甘思榮片”（Glycyron），用於治療肝炎及過敏性疾病，臨床常用於慢性肝炎的鞏固性治療，即靜脈給藥至肝功能正常或接近正常後，改為口服治療；以及以甘草酸單銨為主要成分的製劑複方甘草甜素片、複方甘草甜素注射液，用於慢性肝病及濕疹、皮炎、蕁麻疹等的治療。中國國內以甘草酸單鉀為原料的甘草甜素片，由湖南長沙中藥一廠生產，治療慢性肝炎的療效不及靜脈給藥的複方甘草甜素注射液（商品名強力寧），不良反應也較多。江蘇正大天晴藥業股份有限公司生產和銷售的甘草酸二銨注射液及膠囊（商品名甘利欣），套用於臨床已有8年（截至2003年7月），取得了較好的臨床效果。
甘草酸二銨通過甘草酸兩步氨化後精製而得。藥理試驗證明，甘草酸二銨對四氯化炭、D-氨基半乳糖及硫代乙醯胺引起的血清谷丙轉氨酶、穀草轉氨酶升高，具有明顯的降低作用，還能顯著減輕D-氨基半乳糖對肝臟的形態損傷和改善免疫因子對肝臟形態的慢性損傷，甘草酸二銨具有較強的抗炎、保護肝細胞及改善肝功能的作用。甘草酸二銨膠囊具有服用方便、不需長期住院治療等優點。但與注射劑相比，由於甘草酸或其鹽屬於高極性、親水性大分子物質，在胃腸道內吸收較差。但甘草酸二銨與甘草酸相比，由於不形成分子聚合體（膠束），因而口服後，甘草酸的血藥濃度得到提高，一定程度改善了甘草酸消化道吸收差的特點。
磷脂為含磷酸根的脂類物質的總稱，主要有卵磷脂（PC）、腦磷脂（PE）、肌醇磷脂（PI）和磷脂酸（PA）等，它們是動植物細胞中細胞膜、核膜和類質膜的基本成分，在生物體代謝中有著重要的生理功能。磷脂廣泛存在於動物的腦髓、內臟、血液、乳汁、蛋黃及植物的種子中，具有來源廣泛、無毒等優點。卵磷脂具有乳化、分散、助滲、潤濕等特性，並對皮膚和黏膜有很強的親和力，在藥劑中用作分散劑、潤濕劑、乳化劑、穩定劑、透皮促進劑、前體藥物載體等。
發明內容
專利目的
《甘草酸及其鹽的腸溶製劑和製備方法》的目的是提供一種甘草酸及其鹽的腸溶製劑。
《甘草酸及其鹽的腸溶製劑和製備方法》的另一目的是提供一種甘草酸及其鹽的腸溶製劑的製備方法，該方法通過在輔料中添加一定量的卵磷脂，並裝入腸溶膠囊中，來促進甘草酸在腸道的吸收，提高甘草酸及其鹽的生物利用度，從而增加口服甘草酸製劑的療效，減少不良反應。
技術方案
《甘草酸及其鹽的腸溶製劑和製備方法》的目的可以通過以下措施來達到：
一種甘草酸及其鹽的腸溶製劑，其特徵在於：甘草酸或其鹽與卵磷脂的重量比為1:1-20，優選1:1-5。
根據以上所述的甘草酸及其鹽的腸溶製劑，其特徵在於：甘草酸包括α構型和β構型的甘草酸。甘草酸鹽包括甘草酸的無機鹽如銨鹽、鎂鹽、鈉鹽、鉀鹽、鋅鹽等。卵磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂或氫化卵磷脂。
該發明的甘草酸及其鹽的腸溶製劑，其製備方法為將甘草酸及其鹽按重量比為1:1-20比例與卵磷脂混合，加其他輔料，裝入腸溶膠囊中。由於卵磷脂具有乳化、分散、助滲、潤濕等特性，可促進甘草酸及其鹽從腸道吸收，明顯提高了甘草酸及其鹽口服的生物利用度。
該發明甘草酸鹽優選為甘草酸二銨。在處方中加入了卵磷脂，促進主藥甘草酸二銨的吸收，且製成腸溶膠囊後能避免藥物與胃酸的直接接觸而部分水解或形成膠團及膠束而影響其吸收，減少不良反應。
下面通過甘草酸二銨腸溶膠囊與甘草酸二銨膠囊大鼠口服的生物利用度和小腸吸收試驗的比較，來進一步說明該發明甘草酸鹽腸溶膠囊的實用性。
一、大鼠口服甘草酸二銨腸溶膠囊和甘草酸二銨膠囊的生物利用度研究。
1、材料和方法：
藥物：甘草酸二銨膠囊、甘草酸二銨腸溶膠囊各含活性成分甘草酸二銨50毫克，由江蘇正大天晴藥業股份有限公司提供。
配製方法：兩膠囊內容物用0.9％氯化鈉溶液製成每毫升含甘草酸二銨22毫克的溶液，pH5.0～7.0。
動物：SD清潔級大鼠，購自浙江省醫學實驗動物中心。雄性大鼠178克±6克，每組大鼠6隻，試驗前動物禁食12小時，試驗期間所有動物均自由飲水。
試驗主要步驟：
（1）藥品與試劑：內標吲哚美辛，Sigma產品；乙酸為分析純；無水甲醇、乙腈為HPLC級；甘草酸二銨標準品（含量99.32％）
（2）方法：取SD♂大鼠12隻，隨機分2組，每組6隻。一組大鼠用甘草酸二銨膠囊內容物ig，給藥量1.5毫升/100克；另一組用甘草酸二銨腸溶膠囊內容物ig，給藥量1.5毫升/100克。給藥後10分鐘、30分鐘、1小時、1.5小時、2小時、3小時、4小時、6小時、8小時、10小時、24小時尾靜脈採血，分離血漿，-20℃貯存，待測。
（3）樣品處理血漿樣品100微升，精密加入300微升無水甲醇，渦旋均勻，20,000克×5分鐘離心，精密移取上清液300微升，50℃水浴中氮氣吹乾，殘渣用50微升內標甲醇液（含吲哚美辛20毫克/升）溶解，進樣20微升作HPLC分析。
（4）測定方法採用高效液相色譜法測定。
A、色譜條件
色譜儀 | 島津LC-9A液相色譜儀 |
色譜柱 | ODS，4.6×150毫米，5微米 |
流動相 | 甲醇:水:乙酸＝76:20:4 |
流速 | 1.0毫升/分鐘 |
檢測波長 | 245納米 |
甘草酸二銨和內標的保留時間分別約為2.9分鐘和4.0分鐘，兩者的分離度＞1.5，血漿中的內源性物質不干擾測定。
B、標準曲線製備
取大鼠空白血漿100微升，分別加入甘草酸二銨標準品溶液使其濃度分別為0.375、1.875、3.75、5.625、7.5毫克/升，按“樣品處理”項下操作，以甘草酸二銨與內標峰面積之比為應變數（Y），甘草酸二銨濃度為變數（X），作線性回歸，回歸方程為：Y＝0.0432X-0.0153（r＝0.9996）。
該法測定的線性範圍為0.375～7.5毫克/升。
2、試驗結果
兩組大鼠分別口服甘草酸二銨膠囊與其腸溶膠囊內容物後，平均血藥濃度見表1。數據經3P87軟體選擇模型，結果符合兩室模型。主要藥物動力學參數計算結果見表2。
表1：大鼠口服甘草酸二銨膠囊與其腸溶膠囊內容物的平均血藥濃度（n＝6，x±s，毫克/升）
時間（小時） | 膠囊 | 腸溶膠囊 |
0.1667 | 1.845±0.263 | 10.571±1.683 |
0.5 | 3.328±0.415 | 13.166±2.089 |
1 | 5.335+0.444 | 14.528±1.837 |
1.5 | 6.726±0.313 | 13.345±1.594 |
2 | 7.862±0.408 | 12.037±1.366 |
3 | 7.152±0.331 | 9.685±1.032 |
4 | 5.935+0.268 | 7.893±0.901 |
6 | 4.132±0.190 | 5.295±0.558 |
8 | 2.802±1.171 | 3.550±0.396 |
10 | 2.141±0.105 | 2.550±0.258 |
24 | 0.192±0.026 | 0.234±0.026 |
表2：大鼠口服甘草酸二銨膠囊與其腸溶膠囊內容物後的藥物動力學參數（n＝6，x±s）
參數 | 膠囊 | 腸溶膠囊 |
Cmax（毫克/升） | 7.904±0.398 | 14.196±1.867 |
Tmax（小時） | 1.655±0.064 | 0.962±0.073 |
K21 | 0.534±0.056 | 0.422+0.021 |
K10 | 0.185±0.006 | 0.211±0.003 |
K12 | 0.034±0.023 | 0.060±0.008 |
t1/2（Ka） | 0.515±0.022 | 0.256±0.028 |
t1/2（α） | 1.032±0.348 | 1.329±0.067 |
t1/2（β） | 4.087±0.139 | 4.068±0.072 |
AUC0-T（毫克/升·時） | 63.307±3.269 | 93.826±10.616 |
兩者AUC0-T和Cmax經雙單側t檢驗顯示有極顯著性差異（P＜0.001）。
研究結果表明，甘草酸二銨腸溶膠囊大鼠口服的生物利用度明顯優於甘草酸二銨膠囊，AUC0-T約為後者的1.5倍。
二、比較甘草酸二銨腸溶膠囊內容物與甘草酸二銨膠囊內容物在小腸的吸收情況。
1、材料和方法：
藥物：甘草酸二銨膠囊、甘草酸二銨腸溶膠囊各含活性成分甘草酸二銨50毫克，由江蘇正大天晴藥業股份有限公司提供。
配製方法：精密稱取取除澱粉後的甘草酸二銨膠囊及其腸溶膠囊內容物用含有酚紅的磷酸鹽緩衝液（pH6.5）分別溶解製成每100毫升含甘草酸二銨80毫克的溶液。
動物：SD清潔級大鼠，購自浙江省醫學實驗動物中心。雄性大鼠181克±10克，每組大鼠6隻，試驗前動物禁食20小時。
2、試驗主要步驟：
（1）大鼠吸收試驗：將禁食20小時的大鼠用戊巴比妥納45毫克/kg腹腔麻醉，背部固定，沿腹中線切開腹部，在十二指腸上端和迴腸下端各伸入細玻璃管並用線紮緊，從十二指腸緩慢注入37℃生理鹽水充分洗淨腸管後，接通微量輸液器和藥液（37℃）製成循環迴路，棄去10毫升循環液後的藥液為0時，然後在2.3毫升/分鐘流速下，按循環時間30、60、90、120分鐘取樣測定循環藥液的藥量變化，以酚紅為體積指示劑按下式計算甘草酸二銨的含量並計算吸收率。
G＝Gt×A0/At，G：甘草酸二銨含量；Gt：甘草酸二銨在t時含量；A0：酚紅在0時的吸收度；At：酚紅在t時的吸收度（酚紅的測定：取循環藥液1毫升，加入氫氧化鈉液（1摩爾/升）3毫升，搖勻後，於560納米處測定吸收度。）
（2）甘草酸二銨的含量測定
測定方法：採用紫外分光光度法測定
樣品處理：甘草酸二銨對照品在80℃減壓真空乾燥至恆重，含量為99.32％，甘草酸膠囊內容物加稀鹽酸後用正丁醇提取，減壓濃縮至乾，甘草酸二銨腸溶膠囊內容物用氯仿溶解除去不溶物後減壓蒸乾，兩蒸乾物在P2O5真空乾燥器乾燥24小時。
最大吸收波長選擇：精確稱取甘草酸二銨標準品溶液，用磷酸鹽緩衝液製成每1毫升中約含0.04毫克的溶液，在190～300納米間掃描（日本島津UV-2201），結果在252±2納米處有最大吸收。
表4：甘草酸二銨膠囊與甘草酸二銨腸溶膠囊內容物大鼠小腸累積吸收結果
時間（分鐘） | n | 累積吸收值（%） | P | |
膠囊 | 腸溶膠囊 | |||
30 | 6 | 3.22±0.4 | 8.53±0.5 | <0.01 |
60 | 6 | 7.39±0.7 | 17.02±0.6 | <0.01 |
90 | 6 | 11.65±0.5 | 19.51±0.9 | <0.01 |
120 | 6 | 14.21±0.7 | 27.18±0.9 | <0.01 |
研究結果表明：腸溶膠囊處方可以提高甘草酸二銨在大鼠小腸的吸收，在30分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘時分別約為普通膠囊的2.6、2.3、1.7、1.9倍，均有顯著性差異。
權利要求
1、一種甘草酸及其鹽的腸溶製劑，其特徵在於：甘草酸或其鹽與卵磷脂的重量比為1:1。
2、根據權利要求1所述的甘草酸及其鹽的腸溶製劑，其特徵在於：甘草酸包括α構型和β構型的甘草酸或其鹽。
3、根據權利要求1或2所述的甘草酸及其鹽的腸溶製劑，其特徵在於：甘草酸鹽為甘草酸的無機鹽如銨鹽、鎂鹽、鈉鹽、鉀鹽、鋅鹽。
4、根據權利要求4所述的甘草酸及其鹽的腸溶製劑，其特徵在於：甘草酸鹽優選為甘草酸二銨。
5、根據權利要求1或2所述的甘草酸及其鹽的腸溶製劑，其特徵在於：卵磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂或氫化卵磷脂。
6、根據權利要求1所述的甘草酸及其鹽的腸溶製劑的製備方法，其特徵在於：將甘草酸及其鹽按重量比為1:1～20比例與卵磷脂混合，加其他輔料，裝入腸溶膠囊中。
7、根據權利要求7所述的甘草酸及其鹽的腸溶製劑，其特徵在於：卵磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂或氫化卵磷脂。
實施方式
原輔料名稱 | 生產廠家 | 質量標準 |
|---|---|---|
甘草酸二銨 | 江蘇正大天晴藥業股份有限公司 | WS-019（X-015）-94 |
大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化卵磷脂 | 上海油脂一廠 | 滬衛藥準字（1995）第2178號-088005 |
澱粉 | 山東聊城安華製藥有限公司 | 2000年版中國藥典 |
十二烷基硫酸鈉 | 上海焱晨化工實業有限公司 | 2000年版中國藥典 |
乙醇 | 南京化學試劑一廠 | GB679-94 |
組分 | 量（克/粒） |
|---|---|
甘草酸二銨 | 0.05 |
大豆卵磷脂 | 0.05 |
澱粉 | 0.15 |
十二烷基硫酸鈉 | 0.0025 |
乙醇 | 適量 |
組分 | 量（克/粒） |
|---|---|
甘草酸二銨 | 0.05 |
大豆卵磷脂 | 0.25 |
磷酸氫鈣 | 0.10 |
硬脂酸鎂 | 0.0025 |
乙醇 | 適量 |
組分量 | （克/粒） |
|---|---|
甘草酸二銨 | 0.05 |
大豆卵磷脂 | 0.5 |
β-環狀糊精 | 0.15 |
滑石粉 | 0.05 |
硬脂酸鎂 | 0.001 |
乙醇 | 適量 |
組分量 | （克/粒） |
|---|---|
甘草酸二銨 | 0.05 |
大豆卵磷脂 | 0.75 |
乳糖 | 0.05 |
十二烷基硫酸鈉 | 0.0035 |
乙醇 | 適量 |
組分量 | （克/粒） |
|---|---|
甘草酸二銨 | 0.05 |
大豆卵磷脂 | 1.00 |
澱粉 | 0.15 |
微粉矽膠 | 0.0035 |
硬脂酸鎂 | 0.0035 |
乙醇 | 適量 |
組分量 | （克/粒） |
|---|---|
甘草酸二銨 | 0.025 |
蛋黃卵磷脂 | 0.125 |
羧甲基澱粉 | 0.1 |
聚乙二醇6000 | 0.005 |
乙醇 | 適量 |
組分 | 量（克/粒） |
|---|---|
甘草酸二銨 | 0.10 |
氫化卵磷脂 | 0.10 |
羧甲基澱粉 | 0.1 |
聚乙二醇6000 | 0.005 |
乙醇 | 適量 |
組分 | 量（克/粒） |
|---|---|
甘草酸銨 | 0.05 |
大豆卵磷脂 | 0.05 |
澱粉 | 0.15 |
十二烷基硫酸鈉 | 0.0025 |
乙醇 | 適量 |
組分 | 量（克/粒） |
|---|---|
甘草酸 | 0.05 |
大豆卵磷脂 | 0.05 |
澱粉 | 0.15 |
十二烷基硫酸鈉 | 0.0025 |
乙醇 | 適量 |
組分 | 量（克/粒） |
|---|---|
甘草酸鉀 | 0.05 |
蛋黃卵磷脂 | 0.05 |
澱粉 | 0.15 |
十二烷基硫酸鈉 | 0.0025 |
乙醇 | 適量 |
組分 | 量（克/粒） |
|---|---|
甘草酸鎂 | 0.05 |
蛋黃卵磷脂 | 0.05 |
澱粉 | 0.15 |
十二烷基硫酸鈉 | 0.0025 |
乙醇 | 適量 |
組分 | 量（克/粒） |
|---|---|
甘草酸鈉 | 0.05 |
氫化卵磷脂 | 0.05 |
澱粉 | 0.15 |
十二烷基硫酸鈉 | 0.0025 |
乙醇 | 適量 |
組分 | 量（克/粒） |
|---|---|
甘草酸鋅 | 0.05 |
氫化卵磷脂 | 0.05 |
澱粉 | 0.15 |
十二烷基硫酸鈉 | 0.0025 |
乙醇 | 適量 |
以上實施例產品的製備工藝為：
1.將原料甘草酸或其鹽過60目篩，備用。
2.將卵磷脂加至適量乙醇中，加熱使其回流溶解後，加入澱粉或其他輔料，攪拌混勻後，回收乙醇，乾燥，粉碎，過60目篩，備用。
3.將上述原、輔料混合，加入潤滑劑，置混勻機內混合30分鐘後，測定中間體含量，灌裝於腸溶膠囊殼中，鋁塑壓模，包裝，即得。
榮譽表彰
2007年，《甘草酸及其鹽的腸溶製劑和製備方法》獲得第五屆江蘇省專利項目獎優秀獎。
