簡介
甘草甙的簡介
甘草甙,亦名甘草苷。甘草為豆科甘草屬植物,其根、莖是常用的中草
藥,廣泛分布於我國的東北,新疆,雲南,內蒙古,安徽等地,《
神農本草經》把它列為上品稱“此草最為眾藥之王,經方少有不用者”。甘草的成分複雜,主要含有三萜類,
黃酮類,香豆精類化合物, 其中黃酮類是從甘草提取物中得到的一類生物活性較強的成分,其藥化學成分主要有甘草素,異甘草素,甘草甙,異甘草甙,新甘草甙等。近年來, 國內外都有關於甘草黃酮類化合物的清除自由基、
抗氧化、抗促癌、抗致突的作用的報導
化學名稱
4H-1-Benzopyran-4-one, 2- [4-(β-D-glucopyranosyloxy) phenyl]-2, 3-dihydro-7-hydroxy-, (S)
物理性質
一水合物 (稀乙醇或水),
熔點 212~213°℃。
藥理作用
毒 性:無
不良反應:暫未知
成分來源: 豆科植物光甘草 Glycyrrhiza glabra L. 根, 甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch. 根。
甘草甙的提取
甘草原料的前處理
甘草原料中的化學成分十分複雜,為獲得較好的分離效果以及減少雜質對製備
色譜柱的污染,同時提高目標物甘草甙在進樣原料中的含量,本實驗採取萃取方法對原料進行前處理。如下圖 1 用電子天平稱取 4 g 乾草放入燒杯中,用量筒準確量取 100 mL 蒸餾水倒入燒杯中溶解,超聲 15 min 左右,並不斷用玻璃棒攪拌,加速溶解。然後將燒杯放入 90 ℃恆溫槽中加熱 2 h後熱過濾,將濾液加入正丁醇溶劑後,靜置數分鐘後,大部分的甙類溶解於正丁醇溶劑中,接著進行二次萃取,將殘留在水中的少量的甙類萃取出來,最後將二次萃取得到的正丁醇溶液合併濃縮,待層析純化。
甘草甙層析純化
取 10 mL 上述萃取後的產品作為備用的原料,啟動泵,流速設定 25 mL/min,由流動相(甲醇:水=1:4)將原料帶入 500 mm×40 mm 的製備柱內,根據出峰的情況收集乾草甙產品的餾份:前 1 h 的餾份作為前雜質餾份收集在一起,然後改變流動相比例用 50%的甲醇和水的混合液沖洗柱子,每 20 min 接一次產品,然後用旋轉蒸發濃縮各瓶產品後,取 20 µL 進行 HPLC 色譜分析,直到檢測無目標物為止。選取高效液相色譜檢測條件為:流動相:甲醇:水=3.5:6.5;
固定相:矽膠碳 18;色譜柱: 450 mm×4.6 mm;流速 :1 mL/min;檢測波長:254nm 對各瓶產品進行檢測,得到每 20 min 接一次的產品中,第二瓶甘草甙的含量最高。
甘草甙再次層析純化
由於經過一次層析純化後甘草甙的含量不高,所以選取同樣的方法,取 10 mL 上述純化後的產品作為備用的原料流速為 25 mL/min,由
流動相(甲醇:水=2:5)將第二瓶產品帶入 500 mm×20 mm
層析柱內,根據出峰的情況收集乾草甙產品的餾份:每 4 min 接一次產品,然後用旋轉蒸發濃縮各瓶產品後,利用上述相同的檢測條進行 HPLC 色譜分析,直到檢測無目標物為止。經分析發現,得到每 4 min 接一次的產品中,第 6 瓶甘草甙的含量最高,如圖 2 其中保留時間為 5.898 min 為目標峰,經面積歸一法計算含量達到 40%左右。
產品的後處理
將收集的產品在旋轉蒸發器上
減壓蒸餾,溫度為 70 ℃,待溶劑基本全部被蒸出後,用少量的甲醇溶解圓底燒瓶上的固體產品後,併到入試管中在室溫條件下
結晶,直到有白色的粒狀晶體出現。