基本介紹
- 中文名:牛血清清蛋白
- 外文名:Bovine serum albumin
- 含義:通過改變離子強度
- 目的:研究了泡沫提取ADR的條件
- 意義:更好的利用
參數
方法
分別取六隻試管,其中一隻加入1.0ml蒸餾水做空白,5隻分別加入不同體積的濃度為100ug/ml牛血清清蛋白標準液,補充水到1.0ml。然後每隻試管加入5.0ml考馬斯亮藍G-250試劑,搖勻放置5min,在紫外-可見分光光度計595nm處測定吸光值。以A595吸光值為縱坐標,牛血清清蛋白的ug數量為橫坐標繪製標準曲線。具體操作見下表。
蛋白質標準曲線測定加樣
試劑空白12345
100ug/ml牛血清清蛋白/ml1.00.10.20.40.60.8
牛血清清蛋白/ug01020406080
去離子水/ml00.90.80.60.40.2
考馬斯亮藍G-250試劑/ml5.05.05.05.05.05.0
吸光值A595
2、蛋白樣品
配製濃度約100ug/ml的待測蛋白質溶液。取一隻試管加入1.0ml蒸餾水做空白,一支加入0.5ml待測蛋白質溶液,補充水到1.0ml。然後每支試管加入5.0ml考馬斯亮藍G-250試劑,搖勻放置5min後,在紫外-可見分光光度計595nm處測定吸光值。用測得的吸光值從標準曲線上查得相當於牛血清清蛋白的ug數量,計算出待測蛋白質的含量。
在標準蛋白質和蛋白質樣品的測定時,為了減小誤差,每一個濃度的蛋白質做3支平行管。
3、試劑配置
牛血清清蛋白標準液結晶牛血清清蛋白或酪蛋白,預先經微量凱氏定氮法標定該蛋白質的百分含量或者根據牛血清清蛋白的消光係數是6.6來計算其百分含量。然後根據該蛋白的純度配置成濃度為100ug/ml的蛋白溶液。