《煙酸受體PUMA-G信號通路對胰島Beta細胞的保護作用及機制》是依託汕頭大學，由許文燦擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：煙酸受體PUMA-G信號通路對胰島Beta細胞的保護作用及機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：許文燦
- 依託單位：汕頭大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
煙酸及其G-蛋白偶聯受體PUMA-G通路在脂肪代謝及血脂調控中具有重要作用，本研究組發現PUMA-G在小鼠胰島Beta細胞高表達並影響胰島素分泌。我們推測PUMA-G通路可能通過Beta-抑制蛋白抑制NF-kB在胰島Beta細胞中的核轉位，從而抑制胰島Beta細胞的凋亡。因此，本研究擬用轉座子技術建立穩定表達PUMA-G和NF-kB報告基因的胰島Beta細胞株NIT-1，觀察該信號通路在炎症因子、毒素、高糖及高脂刺激下對NIT-1細胞的保護作用，及其調節機制：即對Beta-抑制蛋白的激活和對NF-kB及其下游炎症因子的抑制作用等；用基因沉默等技術在體外進一步驗證該信號通路對NF-kB的抑制作用和對胰島Beta細胞的保護作用；檢測PUMA-G在2型糖尿病db/db模型小鼠胰島中的表達情況，探索煙酸給藥對db/db小鼠胰島的影響，為2型糖尿病的防治提供新的途經。
結題摘要
課題組全體成員圍繞“煙酸受體PUMA-G信號通路對胰島beta細胞的保護作用及機制”進行全方位、系統的研究，包括細胞實驗、動物實驗及臨床實驗。研究員、博士生、碩士生、臨床醫生、護理人員之間密切合作、優勢互補，促進課題組的團隊合作精神，並取得了一定的研究成果。 在細胞實驗中，我們首次發現MIN6細胞表達內源性的PUMA-GmRNA及蛋白質，INF-γ促進PUMA-GmRNA的表達，高糖抑制PUMA-GmRNA的表達，3-HB作用於PUMA-G後能抑制胰島beta細胞炎症，提示胰島beta細胞中PUMA-G的表達參與了糖代謝的調節，且能保護胰島細胞。在高脂實驗中，予棕櫚酸鈉誘導MIN6細胞內炎症因子INF-γ表達上升，同時可見到Akt、mTOR、p70S6K的磷酸化水平上升，再予煙酸干預後可部分逆轉。提示PUMA-G可能通過抑制Akt/mTOR信號通路實現抗炎作用，保護胰島細胞。我們用PB-CMV-PUMA-G-EGFP 質粒和表達PUMA-G的微環質粒分別轉染INS-1 和MIN6細胞，我們發現煙酸可通過PUMA-G降低細胞株內cAMP水平，抑制葡萄糖刺激的胰島素分泌（GSIS），減輕胰島細胞工作負荷。 在動物實驗中，我們發現糖尿病小鼠db/db小鼠beta胰島細胞PUMA-G表達水平較正常小鼠下降，予煙酸干預後PUMA-G表達水平上升。但血糖、血清胰島素、胰島素抵抗指數、β細胞分泌指數及各項血脂指標改善並不明顯。 在臨床實驗中，我們發現與正常人相比，PUMA-G在胰島素瘤和糖尿病病人的胰島細胞中的表達降低，同時胰島素的表達也相應降低。糖尿病人白細胞PUMA-G與NF-κB及IL-1β與血糖、血脂存在一定的正相關關係，提示PUMA-G信號可能參與T2DM的發生和發展，且對炎症因子有一定的調節作用。而給予二甲雙胍治療的糖尿病人，白細胞PUMA-G與IL-1β均明顯下調。提示二甲雙胍跟PUMA-G、炎症之間的密切關係。 通過這些實驗，我們發現PUMA-G或許可以通過抗炎作用為糖尿病的治療提供另一個思路與方法。
