湖北省進口冷鏈食品新冠病毒實驗室檢測技術指南

一、樣本採集

（一）採集對象

進口冷鏈食品和貨物的外包裝、裝卸運載工具。對於食品和貨物，各環節容許拆分的最小獨立包裝。

（二）採集要求

從事新冠病毒檢測樣本採集的技術人員應當經過生物安全培訓合格並具備相應的實驗技能。

（三）採樣方法

1.食品與貨物表面採樣

對於貨櫃、冷庫、儲運空間內的食品與貨物，在各個角落及正中間設採樣點。對各採樣點的冷鏈食品、貨物外包裝各表面進行塗抹採樣。採樣時，宜使待檢的物表處於非冰凍狀態，採用拭子塗抹面積不低於100cm 的樣本，不超過10個同類型樣本作為1個混合樣，置於10mL病毒採樣液中。

2.環境表面採樣

對貨櫃、冷庫、裝卸運載工具、儲運空間的內表面，選擇人員或貨物接觸頻次較多的部位，採用拭子塗抹面積不低於100cm 的樣本，10個以內同類型樣本作為1個混合樣，置於10mL病毒採樣液中。

採樣時機為消毒處理前。對於經含氯或過氧化物類消毒劑消毒處理後需要即刻採樣時，採樣液應含0.2%硫代硫酸鈉。對於經季銨鹽消毒劑處理後的對象進行採樣本時，採樣液中應含增加1%吐溫80和0.5%卵磷脂。

（四）樣本保存

24小時內檢測的樣本可置於4℃保存；24小時內無法檢測的樣本則應置於-20℃以下條件保存。

（五）樣本送檢

樣本採集後應當儘快低溫送往實驗室，如果需要長途運輸，應攜帶足夠的冰袋或乾冰等。

1.上送樣本

從事或受委託從事採樣的機構負責樣本採集，並上送從事或受委託從事病毒檢測機構開展樣本檢測。檢測機構將檢測陽性樣本上送市州疾控中心進行實驗覆核。市州疾控中心將覆核陽性樣本上送省疾控中心進行病毒分離培養與測序。

2.新型冠狀病毒陽性樣本及毒株運輸

陽性樣本運輸包裝按A類UN2814進行，運輸應當按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規定》進行。

（六）樣本處置

陽性樣本上送檢測與保存，其他樣本按照醫療廢物進行處置。

二、實驗室檢測

（一）新型冠狀病毒核酸檢測

採用實時螢光RT-PCR方法檢測新型冠狀病毒核酸。針對新型冠狀病毒基因組中開放讀碼框ORF1ab和核殼蛋白N。核酸提取和實時螢光RT-PCR反應體系及反應條件參考相關廠家試劑盒說明。

（二）結果判斷

以試劑盒廠家說明書提供的判定方法為準。

（三）陽性結果確認

實驗室確認陽性樣本需滿足以下條件之一：

1.同一份樣本中新冠病毒2個靶標（ORF1ab、N）實時螢光RT-PCR檢測結果均為陽性。

基本介紹