淋巴細胞分化抗原檢測

檢查前準備

向被檢測者解釋本操作的目的、方法等，消除顧慮；一般選取靜脈血進行檢測，採血前一天應清淡飲食、晚8點後避免進食和劇烈運動、避免飲酒以免影響結果，採血時避免情緒緊張。

1.免疫組織化學染色法

（1）免疫螢光顯微技術：使螢光抗體與細胞表面的淋巴細胞分化抗原進行反應，洗滌除去游離的螢光抗體後，在螢光顯微鏡下觀察。

（2）免疫金銀染色技術：利用膠體金標記淋巴細胞分化抗原對應的特異性抗體，通過免疫反應使膠體金顆粒沉積在抗原位置，加入銀顯影液，用對苯二酚將銀離子還原成銀原子，被還原的銀原子沉積在膠體金顆粒周圍形成“銀殼”，最終在光鏡下就能看到被放大的黑褐色物質。易於辨別陽性物質，而且能檢測微量的抗原。

2.流式細胞術

利用螢光素標記的淋巴細胞分化抗原對應的單克隆抗體做分子探針，在流式細胞儀上檢測淋巴細胞分化抗原的表達，計數淋巴細胞分化抗原陽性細胞的百分率。

1.B淋巴細胞分化抗原

（1）CD5：表達CD5的B細胞可以被各種激活B細胞的試劑激活，在臍帶血、成人血和所有主要的外周淋巴樣器官中都可以發現。

（2）CD19：主要表達在B細胞上，在成熟的B細胞各個分化階段上有表達，在定向B細胞的祖細胞上也有表達，但在濾泡樹突狀細胞上只有弱的表達，因此它是鑑別泛B細胞最好的表面抗原標誌。

（3）CD28：在B細胞系列中，漿細胞顯著地表達CD28，在骨髓漿細胞和骨髓瘤細胞系中可以發現CD28。

（4）CD20、CD79：與免疫球蛋白有關，只有產生免疫球蛋白的細胞表達這兩種CD抗原，因而可用來區分B細胞和漿細胞的不同功能，CD20和CD79陽性時，患有B細胞性淋巴瘤的可能性大。

2.T淋巴細胞分化抗原

（1）CD1：在所有胸腺皮質中的胸腺細胞都可以檢測到CD1分子的表達，在激活的單核細胞和朗格漢斯細胞中也表達CD1。

（2）CD2：在T細胞發育的早期階段表達，由於抗CD2單克隆抗體可以激活早期T淋巴細胞祖細胞，因此CD2抗原可能出現在功能性T細胞受體表達之前，是胸腺細胞激活中可以利用的一種受體。

（3）CD3：在早期胸腺細胞和成熟T細胞中表達，與T淋巴細胞密切聯繫，這種抗原經常在急性T淋巴細胞白血病中表達。

（4）CD5：在所有的T細胞上都可以發現CD5抗原，它出現在T淋巴細胞個體發育的早期階段，在外周血和臍帶血中B細胞的一些細胞亞群上也可以檢測到CD5的存在。

（5）CD7：在T細胞個體發育的非常早期就會有所表達，但在T細胞成熟的最後階段這一抗原會丟失，CD7的功能還不清楚，單核細胞和NK細胞也表達這種CD7抗原。