液相色譜柱

液相色譜柱

液相色譜柱,是一種用於液體色譜分析儀器。

基本介紹

  • 中文名:液相色譜柱
  • 性質:液體色譜分析儀器
基本構造,填料基質,影響因素,相關推薦,

基本構造

柱管、壓帽/卡套、篩板(濾片)、接頭 分析型
常規分析柱(4.0/3.9mm、4.6mm)
色譜柱色譜柱
窄徑柱(1.0mm、2.1mm)
毛細管柱(0.2-0.5mm)
製備型
半製備柱(〉5mm,7.8mm、9.8mm、10mm)
製備柱(21.2mm、30mm、50mm)
保護柱套
保護柱芯

填料基質

1. 矽膠基質- pH 2-8 -----------------高或低pH下,矽膠會溶解
2. Al2O3·nH2O - pH1-14----------化學修飾困難
3. 聚合物基質 - pH1-14-------------孔結構複雜,孔徑不均勻導致柱效不夠高,閥盛講戀有機溶劑可能導致聚合物基質溶漲而受損

影響因素

A:物理因素
1.矽膠純度 ----- 填料矽膠的純度與殘留金屬離子濃度
2.色譜柱尺寸---填料床的長度和內徑
3.顆粒形狀------球型或不規驗艱定則型
4. 粒徑-----------平均顆粒晚戀祖直徑,通常3-10μm
5.表面積---------顆粒外表面和內部孔表面的總和,以m/gram表示
6.孔徑------------顆粒的孔或腔的平均尺寸,範圍80-300Å;
B:化學性質
1.鍵合類型----- 單體鍵合 - 鍵合相分子與基體單點相連
2.碳覆蓋率------與基體物質相連的鍵合相的量
3.封端------------鍵合步驟之後, 用短鏈將裸露的矽羥基鍵合後封閉起來

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在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質,他們的類型結構、極性、抹巴祝酸鹼性、分子量大小等等。
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2. 如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或矽膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否 則民擔很難重複實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用於其它實驗)
3. 若樣品是鹼性的;可選擇高純矽膠柱(高純矽膠缺少金屬雜質,且矽膠端基封尾)或一些經過修飾的C18柱(如極性嵌入技術或鹼去活技術等),他們都會減少鹼性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏鹼的條件下做,因為這樣可增加鹼性樣品的保留
4.如果鹼性化合物的極性太強,或鹼性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優點是方法開發簡單,缺點是目前實 現這一技術的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選全凳重立用HILIC色譜柱(矽膠柱在反相條件下使用,這也是很經典的檢測鹼性樣品贈循洪的方法)選擇強離子交換柱(缺點 是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重複實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱

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