《沙眼衣原體感染過程中的免疫識別和逃逸機理研究》是依託南京大學，由李爾廣擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：沙眼衣原體感染過程中的免疫識別和逃逸機理研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李爾廣
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
沙眼衣原體（CT）是引起性病的最常見病原體，2013年起衛生部將其與梅毒、HIV等列入重點監控性病。CT是嚴格胞內寄生性細菌，感染具有隱蔽性和持續性，但機理不清。前期工作鑑定了CT切斷NF-κB/p65的蛋白酶，近期發現CT具有作用於干擾素調控通路的能力，包括將MAVS蛋白切割成50和20 kDa片段（不是降解）。課題擬（1）鑑定CT切割MAVS蛋白的蛋白酶（2）研究感染過程的天然免疫識別。內容包括用蛋白質化學和分子生物學方法鑑定CT蛋白酶，確定酶活性中心以及底物切割位點；研究其在感染過程中的表達、釋放和再分布等，誘導MAVS切割的條件；用基因敲除以及過表達MAVS片段研究MAVS切割與CT抗凋亡和持續感染的關係；用基因敲除小鼠模型驗證MAVS缺失與持續和潛伏感染的關係等。課題實施可以揭示CT致病機理、豐富對嚴格胞內細菌的免疫識別和逃逸的理論知識，為治療提供思路。
結題摘要
沙眼衣原體（CT）是嚴格胞內寄生性細菌，感染具有隱蔽性和持續性，但機理不清。前期工作發現干擾NF-κB的蛋白酶，該項目主要研究影響干擾素通路蛋白酶，目標包括（1）鑑定CT 切割MAVS 蛋白的蛋白酶（2）研究感染過程的天然免疫識別。主要成果包括（1）鑑定衣原體蛋白酶特點及切割底物位點都已經在體外及重組蛋白層面驗證/證實，該工作由王晶晶博士論文闡述；後期工作利用其底物切割位點製備了螢光探針，希望能夠用於檢測。該部分工作有一個挑戰性問題，即衣原體為嚴格胞內細菌，蛋白酶在感染狀態的釋放、如何穿過由雙層脂質組成的包涵體膜而作用於胞漿蛋白是本課題的疑難點，我們正在利用該螢光探針，在活細胞檢測蛋白切割的特點及意義。收尾工作正在進行中，希望能產生高水平研究論文。（2）感染過程中小分子代謝與宿主免疫應答。項目執行期間，我們利用組學進展，開展了點寫組學研究，鑑定了兩個特異通路，其中鞘脂代謝與衣原體包涵體膜融合以及衣原體成熟密切相關。利用小分子化合物為探針，證明抑制鞘脂從頭合成過程可以阻斷包涵體融合，阻滯衣原體於非感染性 RB 階段。（3）從核苷酸代謝研究宿主抗微生物應答。衣原體基因組編碼一個環二核苷酸合成酶，證明其具有催化 ATP 環合至環二腺苷酸的能力，雖然環二核苷酸具有激活干擾素通路的能力，但是衣原體感染合成的環二核苷酸在時間點上嚴重滯後干擾素通路激活，表明宿主識別其它模式分子。有關工作在衣原體國際和國內會議交流。（4）正在進行的工作：結合人沙眼衣原體工作進展，我們2017年申報了“科技支寧（夏）”計畫，並且得到項目資助，擬將基礎研究成果用於牛羊流產衣原體致病機理和分布特點研究，為西部開發出力。在中國與工業已開發國家一樣，沙眼衣原體感染形勢嚴峻，是女性不孕的主要病原體。但是嚴格胞內細菌研究在國內是小眾領域，整體來講缺少人才和資源。項目執行期間培養研究衣原體的博士研究生3名（一名在讀）、碩士研究生3名，希望他們能繼續相關領域研究。另外，發表研究論文6篇（總 IF＞25），3篇投稿中。
