水生生物急性毒性試驗

測定高濃度污染物在短時期（一般不超過幾天）內對水生生物所產生的急性毒作用，用以評價污染物毒性的實驗方法。

基本介紹

• 中文名：水生生物急性毒性試驗
• 目的：評價污染物的毒性大小和性質
•  常用：小型水生生物,主要是魚類
• 選擇：年齡、大小、體重差別不大

試驗目的

通過水生生物急性毒性試驗可以確定半數存活濃度(TLm)或<A 半數致死濃度 a>(LC50)，並用來評價污染物的毒性大小和性質。此外，還可粗略了解毒物引起生物體中毒的症狀和特點，以判斷毒物的毒性強弱和水環境的污染程度，並為制定在環境中的毒物最大容許濃度提供基本數據。

試驗要求

用於急性毒性試驗的水生生物種類很多, 常用的是小型水生生物,主要是魚類。<A a 毒性實驗的魚類>另外,也有用<A a 浮游生物>作急性毒性試驗的,如中國常用的有隆線溞(Daphnia carinata)大型溞(Daphnia mana)等類，斜生柵藻<A a 柵藻>(Scenedesmus)、小球藻屬<A a 小球藻>(Chlorella)等藻類。

為了避免受試生物個體差異過於懸殊，應選擇種屬較純,年齡、大小、體重差別不大,雌雄性別各半的動物。受試魚一般採用體重輕於5克、體長短於7厘米的，最長的不超過最短的1.5倍。

試驗方法

將受試魚隨機分組。每組至少10尾，要設定5個以上不同濃度的毒物組,另有一個對照組，毒物濃度應按對數濃度分級，包括使動物完全死亡和完全不死亡的濃度。

試驗前,受試動物要先在實驗室內飼養7～10天，以觀察其活動是否正常，去除有病的或畸形的。試驗期間，對照組動物的死亡率應低於 5%。試驗容器是用無毒的玻璃、聚乙烯、搪瓷等材料製成的，形狀可為橢圓形或柱形。為了便於比較，試驗時環境因素要恆定。例如稀釋水要無毒，要預先脫氯，溶解氧要超過5ppm，pH值在6.5～8.5之間，水溫對溫水魚為25℃，對冷水魚為15℃，保持水質恆定。靜水試驗每天至少換一次試驗溶液，每克體重的魚平均要有2升的水。流水試驗每 24小時要換入95%的新試液。

急性毒性試驗期間一般不餵食，從致毒開始就觀察記錄動物中毒表現，生理、生化變化和死亡情況，並將觀察結果在半對數坐標紙上用內插法或外推法求出動物的LC50或TLm、動物全部死亡的最小濃度(LC100)和動物全部存活的最大毒物濃度(MDT)即最大耐受濃度。

急性毒性試驗的結果同受試動物的種屬和稀釋水的水質等因素有關例如比較谷硫磷對藍鰓魚和金魚的TLm值,藍鰓魚比金魚高900倍。但是,金魚對銅最敏感,而藍鰓魚對銅抗性較強。許多種重金屬的毒性由於受稀釋水的硬度和pH值的影響可相差兩個數量級以上。一般硬度增加會使毒性減弱，而溶解氧降低會增加生物的生理負擔,從而使毒性增強。水溫對毒性的影響比較複雜,有些物質因升溫而增加毒性，有些物質則因升溫而降低毒性。

發展歷史

急性毒性試驗已有悠久的歷史，早在公元 750年中國唐代王燾所著《外台秘要》中就記載：“若有毒，其物即死”，提出將動物放在有毒氣的場所來作試驗，以檢查氣體的毒性。西方最早關於用動物研究毒物毒性的論文發表於1809年（R.德萊爾和M.弗朗科伊斯）。1933年J.H.加德姆提出用對數轉化法求半數致死濃度，此法至今仍在套用。40年代以後，隨著化學工業的發展，農藥、殺蟲劑、除草劑的普遍施用，急性毒性試驗逐漸被重視並得到廣泛套用。近年來對影響急性毒性試驗的各種因素進行了深入的研究。為了克服動物個體差異的影響，已開始使用離體器官和細胞作為試驗材料，試圖從細胞和分子水平進行急性毒性試驗。