基本介紹
- 中文名：水溶性醫用幾丁糖製劑及製備方法
- 申請人：侯春林、顧其勝
- 申請日：2000年2月1日
- 申請號：001116460
- 公布號：CN1306824
- 公布日：2001年8月8日
- 發明人：侯春林、顧其勝
- 地址：上海市中興路241弄2號樓1005室
- Int.Cl.：A61K31/715、A61K35/56、A61P19/08、A61P35/00、A61P27/02
- 代理機構：上海醫藥專利事務所
- 代理人：王巍
- 類別：發明專利
專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,臨床套用,改善效果,技術領域,權利要求,實施方式,榮譽表彰,
專利背景
國際上幾丁質主要用於工農業生產，僅有美國、日本等國將幾丁質研製成人造皮及手術縫合線。但未見幾丁糖其他臨床套用報導。
中國國內外採用透明質酸鈉預防組織粘連和用於眼科人工晶體植入手術。而幾丁糖與透明質酸鈉均屬多糖類物質，作用類似，透明質酸鈉從雞冠提取，產量少、成本高、在體內吸收快、作用時間短；而幾丁糖是從廢棄蝦、蟹外殼中提取，成本遠低於透明質酸鈉，且作用時間長，可成為透明質酸鈉的替代產品。醫用幾丁糖能促使上皮細胞生長，抑制成纖維細胞生長，具有廣譜的抑菌作用和聚糖的網路結構，因而它具有預防術後組織粘連、抑制疤痕形成和保護關節軟骨等生理功能，近年來作為一種天然高分子醫用材料已被廣泛套用於醫學臨床領域。
醫用幾丁糖是用幾丁質（chitin）製備得到。幾丁質是一種廣泛存在於自然界的天然高分子聚糖，一般從甲殼類動物如蝦、蟹的外殼中提取製得的，故又稱甲殼質。由於幾丁質的水溶性極差，因而對其套用受到很大限制。
發明內容
專利目的
《水溶性醫用幾丁糖製劑及製備方法》的目的是克服上述幾丁質的不足之處，研製一種水溶性的幾丁質衍生物。該發明提供了一種水溶性醫用幾丁糖製劑，該製劑是由水溶性醫用幾丁糖與藥用輔料組成的。
技術方案
《水溶性醫用幾丁糖製劑及製備方法》該方法包括下列步驟：
（1）蝦殼精揀、清洗：去除蝦頭、腳和尾，並將蝦殼每節分離，用清水清洗、瀝乾；
（2）蝦殼鹼-酸-鹼浸泡：將已清洗、瀝乾的蝦殼浸泡於1-10％NaOH溶液中，於15℃以下環境中放置20-24小時，用清水洗滌至中性、瀝乾，再浸泡於1-10％HCL溶液中，於15℃以下環境中放置20-24小時，用清水洗滌至中性、瀝乾，繼而將已清洗、瀝乾的蝦殼浸泡於10％NaOH溶液中，於15℃以下環境中放置20-24小時，用清水洗滌至中性、瀝乾，製得的幾丁質置於甩水袋中進行脫水，於55-60℃烘箱內烘乾備用；
（3）醫用幾丁質粉末製備：將備用的幾丁質置於0.3％NaOH中煮沸，並保持微煮1小時，用蒸餾水洗清至中性，再置於蒸餾水煮沸30分鐘，用蒸餾水沖洗並瀝乾，置於55-60℃烘箱內烘乾，用不鏽鋼粉碎機進行粉碎，備用；
（4）醫用幾丁糖粗品製備：按幾丁質粉末：NaOH:H2O:十二烷基硫酸鈉＝1:5-15:10-15:0.1-0.5重量比的比例，經充分混合將鹼化醫用幾丁質粉末用絹絲瀝去醫用幾丁質粉末乾重約10倍量體積的NaOH溶液，移入反應瓶中。加入醫用幾丁質粉末乾重8-12倍量體積的異丙醇於12℃左右水浴中，攪拌平衡1小時，另將氯乙酸溶解於異丙醇中（氯乙酸:異丙醇＝5-15:1-10）並置於分液漏斗內，緩慢地加入反應瓶中，控制滴加速度，使反應體系的溫度不超過25℃，氯乙酸滴加完畢後，在攪拌狀態下使其繼續反應18-22小時；
（5）醫用幾丁糖的提純：將反應完畢的醫用幾丁糖用80％左右酒精洗滌3-6次，用加有絹絲的布氏漏斗抽乾，用50-300倍量（v/w）的蒸餾水溶解。用10-20％NaOH溶液將溶液的pH調至6-7，於3#砂蕊漏斗中進行真空抽濾，向濾液中倒入2-5倍量（v/w）的95％的酒精溶液中，攪拌、沉澱，將醫用幾丁糖沉澱先後用95％酒精和無水乙醇各洗滌3次，進行真空乾燥；
（6）醫用幾丁糖製劑的配製：用蒸餾水配製醫用幾丁糖除菌溶液，其濃度為0.1-1.5％，用0.22-0.3μ濾膜進行除菌過濾。另將適量的NaCL溶液經除菌過濾濾入除菌液中，使其NaCL含量在0.85％左右並搖勻，將醫用幾丁糖除菌溶液倒入2.5-3.5倍量（v/w）的95％酒精溶液中，攪拌、沉澱，將醫用幾丁糖沉澱先後用95％酒精，無水乙醇洗滌各3次，進行真空乾燥，然後按處方量加入磷酸二氫鈉，磷酸氫二鈉、氯化鈉和注射用水，最後進行灌裝得成品。
通過上述方法製備的該發明水熔性醫用幾丁糖製劑的技術指標如下：
該發明水熔性醫用幾丁糖製劑的技術指標
該發明的水溶性醫用幾丁糖製劑的常用規格為0.4、1、2.5、3或15毫升以及250毫升。
臨床套用
《水溶性醫用幾丁糖製劑及製備方法》的水溶性醫用幾丁糖製劑的動物試驗和臨床套用驗證，結果如下：
1.動物試驗：
醫用幾丁糖動物試驗共用家兔46隻、昆明種小鼠225隻、白色豚鼠30隻、SD大鼠172隻、wistar大鼠30隻，分別進行醫用幾丁糖毒理學、酶組織化學、傷口II期癒合、預防術後腸粘連、肌腱粘連及關節粘連等實驗研究，同時對醫用幾丁糖進行了體外細胞培養和抑制細菌生長的試驗研究。a.醫用幾丁糖毒理學試驗：醫用幾丁糖製品進行了全身急性毒性、熱源、溶血、細胞毒性、皮內刺激、皮膚致敏、短期肌肉植入、顯性致死、致突變等項試驗，試驗結果表明該製品具有無毒性、無刺激性、無免疫源性、無熱源反應、不溶血、無致突變及無致死性突變效應，它是一種相容性良好的新型體內植入性生物材料。b.酶組織化學試驗：試驗顯示醫用幾丁糖無毒性、無刺激性、具有良好的生物相容性、組織反應小、吸收快。c.傷口II期癒合試驗：試驗顯示醫用幾丁糖具有減少疤痕的作用。d.腸粘連、肌腱粘連及關節粘連試驗：試驗表明醫用幾丁糖具有預防腸粘連、肌腱粘連及關節粘連的作用。e.體外細胞抑制生長試驗：試驗表明醫用幾丁糖具有廣譜的抗菌作用，尤其對革蘭氏陽性細菌的抑菌作用更顯著。動物試驗結果表明該製品是一種無毒、無刺激性、無免疫源性、生物相容性良好的新型生物醫用材料，能促進上皮的細胞生長、抑制成纖維細胞生長、並具有廣譜的抑菌作用。因而該品是一種理想的防止各種外科手術後阻隔劑。
2.臨床套用驗證：
在動物試驗確認醫用幾丁糖是一種安全有效的新型生物醫用材料的基礎上，於人體臨床進行了驗證，我們在上海第二軍醫大學長征醫院等臨床單位進行250例臨床觀察（其中男141例，女109例，另設對照組175例），具體如下表所示：
關節腔內注射 | 95例 |
關節松解手術 | 30例 |
其他骨科松解手術 | 20例 |
肌腱手術 | 35例 |
上腹部手術 | 50例 |
婦產科手術 | 20例 |
關節鏡檢查，手術關節灌洗和擴散液 | 50例 |
臨床套用結果表明，醫用幾丁糖具有預防術後組織粘連的作用，是一種可供臨床套用的組織相容性良好、安全有效的新型生物醫用材料。
該發明的水熔性醫用幾丁糖的毒理學研究和生物學特性研究結果如下：
1.幾丁質毒理學研究
幾丁糖是幾丁質脫乙基後衍生而來的，首先我們對幾丁質進行毒理學研究，包括：a）全身急性毒性試驗；b）熱源試驗；c）原發性皮膚刺激試驗；d）皮內注射試驗；e）皮膚致敏試驗；f）眼結膜刺激試驗；g）溶血試驗；h）細菌毒性試驗；i）顯性致死試驗；j）致突變試驗；k）短期肌肉植入試驗。研究結果證明幾丁質具有無毒性、無刺激性、無免疫抗原性、無熱源反應、不溶血、無致突變及無致死性突變反應，是一種組織形容性良好的新的體內植入生物材料（論文1）
2.幾丁糖毒理學檢測
將研製的水溶性幾丁糖送國家醫藥管理局醫用高分子產品質量檢測中心檢測，全部檢測項目均合格[補充附屬檔案一/（一）]。
檢驗項目 | 技術要求 | 檢驗結果 |
無菌 | 應無菌 | 合格 |
細菌內毒素 | 細菌內毒素量不超過0.5EU/毫克 | 合格 |
急性毒性 | 應無急性毒性 | 合格 |
溶血 | 溶血率應不大於5% | 1.7%合格 |
細胞毒性 | 細胞毒性反應不大於1級，細胞形態應正常 | 0級合格 |
皮內刺激 | 應無皮內刺激反應 | 合格 |
皮膚致敏 | 皮膚致敏率應不大於8% | 0%合格 |
皮下植入 | 植入14日組織相容性應良好，炎性反應程度不大於III級 | 合格 |
3.生物學特性研究
①幾丁糖抑制細菌生長的實驗研究
將幾丁糖按等比稀釋法加入細菌培養液中（選用金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸艾希氏菌、綠膿假單胞菌、白色念球菌等五種細菌）。在35℃恆溫下培養18小時觀察細菌生長情況，結果幾丁糖對各種菌株均有抑制作用，說明幾丁糖具有廣譜的抑菌作用，特別對於革蘭氏陽性細菌效果顯著（論文2）
②幾丁糖影響體外細胞生長的實驗研究
將不同劑量的幾丁糖溶液分別加入人表皮角化細胞和人成纖維細胞培養液中，培養72小時，用NAG酶反應定量測定法，測定細胞數，結果人表皮角化細胞數在一定濃度範圍內，隨幾丁糖溶液劑量增加而增加，呈正比關係；而人成纖維細胞數隨著幾丁糖溶液劑量的增加而減少，呈反比關係。實驗結果證實幾丁糖具有促進人表皮角化細胞生長而抑制成纖維細胞生長的作用。
上述研究結果證實幾丁糖是一種無毒、無刺激性、組織相容性良好的生物材料，植入體內是安全的。
該發明的水溶性醫用幾丁糖的臨床套用研究結果如下：
根據幾丁糖具有促進上皮細胞生長、抑制成纖維細胞生長的生物學特性，以及作為一種粘彈劑，緩釋劑的特點，進行以下四個方面相關的套用基礎研究，探索臨床套用的可能性。
1.幾丁糖預防組織粘連的研究
①幾丁糖預防肌腱粘連的實驗研究
將32隻家兔後肢屈肌腱造成實驗性損傷，實驗組鞘內注入2％幾丁糖溶液，對照組不放，石膏固定6周后處死，行粘連等級分級、肌腱滑動距離、末節趾間關節活動度及所耗功生物力學測試、光鏡和透射電鏡觀察。結果經統計學處理，兩組相差非常顯著，說明幾丁糖具有明顯預防肌腱粘連作用。
②幾丁糖預防關節粘連的實驗研究
將32隻家兔膝關節造成實驗損傷，實驗組關節腔內滴入2％幾丁糖溶液，對照組不放，石膏固定，分別於3周和6周后處死，檢查關節活動度，行大體、光鏡及透射電鏡觀察。經統計學處理，兩組結果相差非常顯著，說明幾丁糖具有明顯預防關節粘連作用。
③幾丁糖預防術後腸粘連的實驗研究
選用SD大鼠60隻，製成腸粘連動物模型，採用1％幾丁糖、2％幾丁糖和右旋糖酐溶液作腹腔灌注，並與對照組比較，2周后處死全部大鼠，剖腹觀察腹腔粘連情況。結果幾丁糖組大部分無粘連現象，少數僅有輕度粘連（I～II級），而另二組均有嚴重腸粘連，大部分已引起不完全性腸梗阻。說明幾丁糖溶液能有效地預防術後腸粘連。
上述研究結果說明幾丁糖具有明顯預防組織粘連的作用。其機理與幾丁糖的潤滑作用、生物屏障作用及抑制成纖維細胞生長、減少疤痕形成有關。
2.幾丁糖防治關節軟骨退變的研究
①幾丁糖關節內注射對創傷性關節軟骨的保護作用
將24隻家兔造成膝關節Hulth退變模型，每3天關節內注射2％幾丁糖或生理鹽水，於4、8、12周處死，透射電鏡觀察。結果幾丁糖組關節軟骨退變程度較輕，而生理鹽水組軟骨退變明顯。
②幾丁糖對關節創傷後非生理位制動軟骨退變的保護作用
將32隻家兔膝關節造成實驗性損傷，實驗組關節腔內滴入2％幾丁液，對照組不放，非生理位石膏固定3、6周后處死，檢查關節活動度，攝X光片、光鏡及電鏡觀察。結果實驗組關節間隙正常、軟骨面光滑、退變程度輕，而對照組關節間隙變窄、軟骨面粗糙、退變程度重。
③幾丁糖溶液灌注對關節軟骨退變的保護作用
對18隻家兔膝關節切開後分別用0.1％幾丁糖、生理鹽水持續灌注，並與空氣暴露組對照。分別於術後1小時、3小時對關節軟骨進行掃描電鏡觀察。結果：幾丁糖組軟骨正常，生理鹽水組在術後1小時軟骨正常，3小時有明顯退變，而暴露組術後1小時軟骨即有明顯破壞。
上述實驗結果說明幾丁糖能有效地保護關節軟骨、防止和減輕關節軟骨的退變過程，從而為幾丁糖用於防治退變性關節炎提供了實驗依據。幾丁糖保護關節軟骨的機理與幾丁糖理化性質有關，幾丁糖是一種氨基多糖在理化性質上與關節內氨基多糖相似，具有粘彈性、緩吸收性，而氨基多糖是軟骨及軟骨基質構成與代謝的基礎。
3.幾丁糖眼內套用的實驗研究
2000年之前眼科人工晶體植入手術常規使用透明質酸鈉作為眼內粘彈劑，幾丁糖來源廣，成本低，同樣具有粘彈性，能否作為粘彈劑用於眼內手術？是否對眼內組織造成損害？為此，我們將幾丁糖與進口透明質酸鈉（HealonGV）進行對比研究，實驗用紐西蘭白兔20隻，左眼前房內注入幾丁糖，右眼前房內注入進口透明質酸鈉作為對照。觀察球結膜充血、角膜混濁、前房滲出、眼壓變化、角膜內皮活細胞染色及計數。結果兩組無顯著性差異（P＞0.05），光鏡、電鏡觀察細胞形態亦無明顯異常。提示幾丁糖在眼內的反應與進口透明質酸鈉相似，可以作為眼內粘彈劑用於眼內手術。
4.幾丁糖藥物緩釋的研究
幾丁糖作為緩釋劑中國國外已用於醫藥工業，該研究結合骨科臨床工作需要，研究用於骨髓炎和骨腫瘤治療的幾丁糖緩釋藥。
①幾丁糖慶大黴素緩釋藥的實驗研究
鑒於幾丁糖具有廣譜抑菌作用和藥物緩釋作用，我們研製成幾丁糖慶大黴素緩釋藥，並進行預防骨感染的實驗研究，先將緩釋藥棒植入兔脛骨幹骺端，檢測術後不同時間血藥濃度、局部骨組織和血腫中的慶大黴素濃度，結果血藥濃度在24h出現，維持時間為3周，而局部骨組織和血腫中的慶大黴素在第10周時仍為金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度的數倍以上，說明幾丁糖慶大黴素是一種良好的緩釋藥。然後按Norden法制丁糖組、慶大黴素組、對照組。術後觀察動物一般情況、X線片、骨培養及細菌計數。結果幾丁糖慶大黴素組骨感染率及細菌數明顯低於其它各組，幾丁糖組骨感染率雖無下降，但細菌計數明顯少於對照組，而慶大黴素觀察指標和對照組無差別。動物實驗證實單純幾丁糖凝膠可減輕骨感染的發生。而幾丁糖慶大黴素能有效預防骨感染的發生，幾丁糖慶大黴素是一種良好的緩釋藥，隨著幾丁糖的吸收而逐漸緩釋藥物，其效果明顯優於慶大黴素株鏈。
②幾丁糖阿黴素緩釋藥的研究
骨腫瘤術後局部復發是臨床較為棘手的問題，主要原因是手術不徹底，造成腫瘤組織殘留。因此，骨腫瘤術後局部用藥，以消滅殘存腫瘤細胞，有非常現實的意義。2000年之前，骨腫瘤術後局部用藥多為化療藥物的直接套用或用明膠海綿吸附的局部套用，但因藥物吸收快，毒副作用大，效果並不理想。利用幾丁糖的藥物緩釋作用，研製成幾丁糖阿黴素緩釋藥，通過藥代動力學研究及該藥的抑殺腫瘤的研究，證實在腫瘤局部刮除後，局部使用該藥，既減少阿黴素全身毒副作用，又較長時間維持抑殺腫瘤的有效濃度，有利於提高骨腫瘤的治癒率。
幾丁糖用於骨科、手外科、普外科、婦產科及眼科臨床，用來預防術後肌腱粘連、關節粘連、神經粘連、腸粘連，防治退變性骨關節炎，以及眼科人工晶體植入手術。幾丁糖慶大黴素緩釋藥和幾丁糖阿黴素緩釋藥用於治療慢性骨髓炎及骨巨細胞瘤，已臨床套用1000餘例，證明幾丁糖臨床套用是安全、有效的。中國國內21所醫院套用1292例，同樣獲得滿意的治療效果。
5.預防組織粘連
①病例介紹：李某某，女性，22歲，住院號220508。因左手創傷後半年，示指伸屈活動障礙而行手術松解，術中見腱鞘損傷，屈肌腱與周圍組織廣泛粘連，切除損傷腱鞘，保留A2，A4兩個滑車，徹底松解粘連，用2％幾丁糖2毫升塗布於肌腱周圍，術後切口一期癒合，無任何不良反應。術後10天伸屈活動基本恢復正常。
②預防關節粘連
上海第九人民醫院骨科在對20例脛骨平台骨折病人採用關節鏡手術同時結合關節內注射2％幾丁糖5毫升，預防脛骨平台骨折後膝關節粘連，注射2周后，60％的病例膝關節活動度超過90°，注射4周后，90％超過90°，其中45％甚至超過135°。證實幾丁糖具有良好預防關節粘連作用。
③醫用幾丁糖預防椎板切除後硬膜外粘連的臨床對比研究
上海長海醫院骨科在採用選擇性脊神經根切斷治療下肢痙攣性腦癱時，64例病人術中使用醫用幾丁糖硬膜外塗布預防粘連，15例未用作為對照，術後半年進行功能評定和MRI檢查，結果醫用幾丁糖組明顯優於對照組。
6.醫用幾丁糖與透明質酸鈉用於白內障人工晶體植入手術臨床對比研究
該組共80例，隨機分成二組，醫用幾丁糖組40例，進口透明質酸鈉40例，（HealonGV）比較手術後一周內眼壓變化和術後1周及1月角膜內皮損失率以及矯正視力情況，經統計學處理，P＞0.05，二組結果無差異（見下表）。說明醫用幾丁糖與進口透明質酸鈉在內眼手術中的反應相似，作為眼內粘彈劑有良好的套用前景，可安全、有效的用於白內障復明手術。
時間 | 幾丁糖組 | 透明質酸鈉組 | t值 | P值 |
術前 | 2.22±0.18 | 2.20±0.18 | 5.02 | >0.05 |
術後12小時 | 2.73±0.35 | 2.60±0.38 | 6.80 | >0.05 |
術後1天 | 2.59±0.67 | 2.50+0.26 | 4.32 | >0.05 |
術後2天 | 2.21±0.11 | 2.22±0.08 | 3.58 | >0.05 |
術後7天 | 2.13±0.13 | 2.05±0.09 | 4.13 | >0.05 |
表三、表四
改善效果
該發明的水溶性醫用幾丁糖的臨床效果優於透明質酸鈉，且其原料的來源十分豐富，生產成本低，是一種天然高分子醫用材料，套用前景寬廣。
技術領域
《水溶性醫用幾丁糖製劑及製備方法》屬醫用材料，具體涉及一種水溶性醫用幾丁糖製劑及製備方法。
權利要求
1.一種水溶性醫用幾丁糖製劑，其特徵在於該製劑是由水溶性幾丁糖與藥用輔料組成的。
2.一種如權利要求1所述的水溶性醫用幾丁糖製劑的製備方法，該方法包括下列步驟；
（1）蝦殼精揀、清洗
去除蝦頭、腳和尾，並將蝦殼每節分離，用清水清洗、瀝乾；
（2）蝦殼鹼-酸-鹼浸泡
將已清洗、瀝乾的蝦殼浸泡於1-10％NaOH溶液中，於15℃以下環境中放置20-24小時，用清水洗滌至中性、瀝乾，再浸泡於1-10％HCL溶液中，於15℃以下環境中放置20-24小時，用清水洗滌至中性、瀝乾，繼而將已清洗、瀝乾的蝦殼浸泡於10％NaOH溶液中，於15℃以下環境中放置20-24小時，用清水洗滌至中性、瀝於，製得的幾丁質置於甩水袋中進行脫水，於55-60℃烘箱內烘乾備用；
（3）醫用幾丁質粉末製備
將備用的幾丁質置於0.3％NaOH中煮沸，並保持微煮1小時，用蒸餾水洗清至中性，再置於蒸餾水煮沸30分鐘，用蒸餾水沖洗並瀝乾，置於55-60℃烘箱內烘乾，用不鏽鋼粉碎機進行粉碎，備用；
（4）醫用幾丁糖粗品製備：
按幾丁質粉末：NaOH:H2O:十二烷基硫酸鈉＝1:5-15:10-15:0.1-0.5的比例，經充分混合將鹼化醫用幾丁質粉末用絹絲瀝去醫用幾丁質粉末乾重約10倍量體積的NaOH溶液，移入反應瓶中。加入醫用幾丁質粉末乾重8-12倍量體積的異丙醇於12℃左右水浴中，攪拌平衡1小時，另將氯乙酸溶解於異丙醇中（氯乙酸:異丙醇＝5-15:1-10）並置於分液漏斗內，緩慢地加入反應瓶中，控制滴加速度，使反應體系的溫度不超過25℃，氯乙酸滴加完畢後，在攪拌狀態下使其繼續反應18-22小時；
（5）醫用幾丁糖的提純
將反應完畢的醫用幾丁糖用80％左右酒精洗滌3-6次，用加有絹絲的布氏漏斗抽乾，用50-300倍量（v/w）的蒸餾水溶解。
用10-20％NaOH溶液將溶液的pH調至6.9左右，於3砂蕊漏斗中進行真空抽濾，向濾液中倒入2-5倍量（v/w）的95％的酒精溶液中，攪拌、沉澱，將醫用幾丁糖沉澱先後用95％酒精和無水乙醇各洗滌3次，進行真空乾燥；
（6）醫用幾丁糖製劑的配製
用蒸餾水配製醫用幾丁糖除菌溶液，其濃度為0.1-1.5％，用0.22-0.3μ濾膜進行除菌過濾。另將適量的NaCL溶液經除菌過濾濾入除菌液中，使其NaCL含量在0.85％左右並搖勻。
將醫用幾丁糖除菌溶液倒入2.5-3.5倍量（v/w）的95％酒精溶液中，攪拌、沉澱，將醫用幾丁糖沉澱先後用95％酒精，無水乙醇洗滌各3次，進行真空乾燥，然後按處方量加入磷酸二氫鈉，磷酸氫二鈉、氯化鈉和注射用水，最後進行灌裝得成品。
3.一種如權利要求1所述的水溶性醫用幾丁糖製劑在預防組織粘連和防治退變性關節炎及眼科人工晶體植入手術中的套用。
4、一種如權利要求1所述的水溶性醫用幾丁糖慶大黴素緩釋藥在治療骨髓炎病中的套用。
5、一種如權利要求1所述的水溶性醫用幾丁糖阿黴素緩釋藥在治療骨巨細胞瘤中的套用。
實施方式
實例1製備醫用幾丁糖凝膠
1.蝦殼用2％（w/v）NaOH浸泡24小時，用清水洗至中性，再用1％（w/v）HCL浸泡24小時，用清水洗至中性，然後烘乾獲得幾丁質。
2.將烘乾幾丁質粉碎，以幾丁質粉：NaOH:H2O:SDS＝1:9:12:0.01，攪勻後冷藏放置16小時，再以幾丁質粉：異丙醇:氯乙酸＝1:10:2.5，進行反應3小時，之後用95％乙醇洗滌，抽乾。
3.反套用加100倍量的蒸餾水溶解，pH調至中性，再用3倍量乙醇作沉澱，收集沉澱，真空乾燥。
4.乾粉用無菌無熱原蒸餾水溶解，採用0.3μ濾膜除菌過濾，加入NaCL使其為0.85％濃度，再用乙醇沉澱，收集沉澱，按所需濃度配成醫用幾丁糖凝膠。
實例2製備醫用幾丁糖凝膠
1.蝦殼用4％（w/v）NaOH浸泡24小時，用清水洗至中性，再用5％（w/v）HCL浸泡24小時，用清水洗至中性，然後烘乾獲得幾丁質。
2.將烘乾幾丁質粉碎，以幾丁質粉：NaOH:H2O:SDS＝1:5:10:0.02，攪勻後冷藏放置16小時，再以幾丁質粉：異丙醇:氯乙酸＝1:8:5，進行反應5小時，之後用95％乙醇洗滌，抽乾。
3.反套用加200倍量的蒸餾水溶解，pH調至中性，再用3倍量乙醇作沉澱，收集沉澱，真空乾燥。
4.乾粉用無菌無熱原蒸餾水溶解，採用0.3μ濾膜除菌過濾，加入NaCL使其為0.85％濃度，再用乙醇沉澱，收集沉澱，按所需濃度配成醫用幾丁糖凝膠。
實例3製備醫用幾丁糖凝膠
1.蝦殼用5％（w/v）NaOH浸泡24小時，用清水洗至中性，再用5％（w/v）HCL浸泡24小時，用清水洗至中性，然後烘乾獲得幾丁質。
2.將烘乾幾丁質粉碎，以幾丁質粉：NaOH:H2O:SDS＝1:12:15:0.05，攪勻後冷藏放置16小時，再以幾丁質粉：異丙醇:氯乙酸＝1:12:6，進行反應3小時，之後用95％乙醇洗滌，抽乾。
3.反套用加150倍量的蒸餾水溶解，pH調至中性，再用3倍量乙醇作沉澱，收集沉澱，真空乾燥。
4.乾粉用無菌無熱原蒸餾水溶解，採用0.22μ濾膜除菌過濾，加入NaCL使其為0.85％濃度，再用乙醇沉澱，收集沉澱，按所需濃度配成醫用幾丁糖凝膠。
實例4製備醫用幾丁糖凝膠
1.蝦殼用8％（w/v）NaOH浸泡24小時，用清水洗至中性，再用9％（w/v）HCL浸泡24小時，用清水洗至中性，然後烘乾獲得幾丁質。
2.將烘乾幾丁質粉碎，以幾丁質粉：NaOH:H2O:SDS＝1:15:15:0.05，攪勻後冷藏放置16小時，再以幾丁質粉：異丙醇:氯乙酸＝1:15:10，進行反應3小時，之後用95％乙醇洗滌，抽乾。
3.反套用加200倍量的蒸餾水溶解，pH調至中性，再用3倍量乙醇作沉澱，收集沉澱，真空乾燥。
4.乾粉用無菌無熱原蒸餾水溶解，採用0.22μ濾膜除菌過濾，加入NaCL使其為0.85％濃度，再用乙醇沉澱，收集沉澱，按所需濃度配成醫用幾丁糖凝膠。
實例5製備醫用幾丁糖凝膠
1.蝦殼用3％（w/v）NaOH浸泡24小時，用清水洗至中性，再用4％（w/v）HCL浸泡24小時，用清水洗至中性，然後烘乾獲得幾丁質。
2.將烘乾幾丁質粉碎，以幾丁質粉：NaOH:H2O:SDS＝1:10:12:0.05，攪勻後冷藏放置16小時，再以幾丁質粉：異丙醇:氯乙酸＝1:8:5，進行反應3小時，之後用95％乙醇洗滌，抽乾。
3.反套用加300倍量的蒸餾水溶解，pH調至中性，再用3倍量乙醇作沉澱，收集沉澱，真空乾燥。
4.乾粉用無菌無熱原蒸餾水溶解，採用0.3μ濾膜除菌過濾，加入NaCL使其為0.85％濃度，再用乙醇沉澱，收集沉澱，按所需濃度配成醫用幾丁糖凝膠。
榮譽表彰
2015年11月27日，《水溶性醫用幾丁糖製劑及製備方法》獲得第十七屆中國專利獎優秀獎。
