《植物基因工程實驗手冊》是清華大學出版社出版的一本圖書。作者是何光源。本書介紹了植物基因工程中常用的實驗方法和技術。
基本介紹
- 書名：植物基因工程實驗手冊
- 作者：何光源
- ISBN：9787302141594
- 出版社：清華大學出版社
基本信息,內容簡介,目錄,
基本信息
作 者：何光源編
叢 書 名：植物基因工程實驗手冊
出 版 社：清華大學出版社
ISBN：9787302141594
出版時間：2007-04-01
版 次：1
頁 數：156
裝 幀：平裝
開 本：
所屬分類：圖書 > 科學與自然 > 生物科學
內容簡介
《植物基因工程實驗手冊》全書共分6章，詳細闡述了目的基因的分離、載體構建、目的基因的轉化、轉基因植物鑑定、轉基因植物的基因安全評價、計算機在植物基因工程研究中的套用等內容。本末還附有植物基因工程實驗中常用溶液、緩衝液和培養基的配製，常用抗生素及使用濃度，凝膠濃度的有效分離範圍和常用的分子質量標準以及核酸的量與質量間的換算等資料數據。
目錄
第1章 目的基因的分離
1.1植物組織DNA的提取1
1.1.1植物組織總DNA的提取2
1.1.2植物細胞核DNA的提取6
1.1.3植物細胞葉綠體DNA的提取7
1.1.4植物細胞線粒體DNA的提取10
1.2植物組織RNA的提取12
1.2.1植物組織總RNA的提取12
1.2.2mRNA的分離純化14
1.3目的基因的PCR擴增18
1.3.1mRNA差別顯示技術19
1.3.2抑制性扣除雜交技術23
1.3.3保守序列PCR克隆技術27
參考文獻29
第2章 載體構建
2.1擴增體系建立31
2.1.1大腸桿菌質粒DNA的提取31
2.1.2DNA的限制性內切酶消化34
2.1.3DNA片段的純化回收35
2.1.4目的基因與載體的連線37
2.1.5重組質粒DNA轉化大腸桿菌39
2.1.6重組質粒細胞菌落的鑑定43
2.2植物遺傳轉化載體構建44
2.2.1根癌農桿菌Ti質粒DNA的提取44
2.2.2Ti質粒轉化載體的構建46
2.2.3髮根農桿菌Ri質粒DNA的提取47
2.3組織特異性表達載體的構建48
2.3.1組織特異性啟動子與質粒DNA的酶切及回收48
2.3.2組織特異性啟動子與載體DNA片段的連線50
參考文獻50
第3章 目的基因的轉化
3.1農桿菌轉化法51
3.1.1菸草農桿菌葉盤轉化52
3.1.2擬南芥花序浸潤轉化55
3.1.3水稻愈傷組織農桿菌轉化56
3.1.4髮根農桿菌轉化58
3.2基因槍轉化法59
3.2.1小麥幼胚基因槍轉化60
3.2.2葉...
3.2.2葉綠體遺傳轉化62
3.3電穿孔法66
3.4PEG介導的基因轉化法68
參考文獻71
第4章轉基因植物的鑑定
4.1標記基因的檢測73
4.1.1gus基因檢測74
4.1.2bar基因的檢測80
4.1.3GFP的檢測83
4.2目的基因的整合鑑定83
4.2.1Southern印跡雜交83
4.2.2RTPCR96
4.2.3Northern雜交98
4.2.4螢光原位雜交（FISH）107
4.3基因的表達分析112
4.3.1SDSPAGE分析112
4.3.2Western印跡114
參考文獻116
第5章轉基因植物的基因安全評價
5.1轉基因小麥環境釋放中花粉介導的基因漂移檢測117
5.2土壤微生物群落的檢測120
5.3轉基因食品的毒理學評價122
5.3.1急性毒性試驗123
5.3.2微核實驗124
5.3.330天和90天餵養試驗125
5.3.4慢性毒性和致癌試驗127
參考文獻128
第6章計算機在植物基因工程研究中的套用
6.1生物學相關軟體131
6.1.1Primer131
6.1.2RasMol2.6135
6.1.3DNAStar137
6.1.4進化樹的軟體139
6.2生物學實用網站142
參考文獻144
附錄
附錄1主要溶液（母液）及緩衝液的配製145
附錄2常用培養基的配製150
附錄3常用抗生素的配製及使用濃度152
附錄4凝膠濃度的有效分離範圍152
附錄5常用的相對分子質量標準153
附錄6核酸的量與質量間的換算156
