基本介紹
- 中文名：植板率
- 外文名：efficiency of plating
- 特指對象：單細胞、原生質體
- 含義：長出細胞團的細胞的百分率
- 測定方法：鏡檢觀察
- 注意事項：低於臨界密度細胞時不能分裂
定義,測定方法,方法1,方法2,注意事項,
定義
利用平板法培養單細胞或原生質體時，常以植板率來表示能分裂長出細胞團的細胞占接種細胞總數的百分數。其中每個平板上接種的細胞總數，等於鋪於平板時加入細胞懸浮液的容積和每單位容積懸浮液中細胞數的乘積。
測定方法
方法1
接種培養(植板)後2周直接從輕輕混勻的培養懸浮物中吸取懸液(取樣)滴在載玻片上，在8～10倍解剖鏡下鏡檢觀察，分別記錄每1視野中的原生質體數及可見的克隆數；每1樣品取樣3～5滴，觀察總視野約10～20個，統計所鏡檢觀察到的總克隆數及總原生質體數。依下式得植板率：
植板率=總克隆數/(總克隆數+總原生質體數)或%植板率=100×[總克隆數/(總克隆數+總原生質體數)]
取樣時間依不同材料及不同試驗條件可有不同，也有在培養過程測2次植板率的(如在2周及4周時測)，但均需在鏡檢時克隆的直徑等於或小於0.1mm為宜。
方法2
除直接取樣測定外，也可在培養起始取已知密度、一定體積的原生質體懸液(50～200ul懸液，內含原生質體數約10)，在培養一定時間(如2周)後(培養時要適時加液以保持不乾)，鏡檢觀察並記錄所取樣品內所有的克隆數，重複測定3次，最後依下式得出植板率：
植板率=克隆數仞始植板的原生質體數或%植板率=100×(克隆數砌始植板的原生質體數)
式中初始植板的原生質體數可根據取樣的體積與樣品密度算出，此基數多採用成活原生質體數。此方法多套用於懸滴培養及飼餵培養中。
注意事項
如果在瓊脂培養基或液體培養基中，植板細胞的初始密度是1×10或1×10個細胞/ml，植板後由相鄰細胞形成的細胞群落常常混在一起。由於這種現象出現得很早，不可能在此之前進行分植或稀釋，因而給分離純單細胞無性系的工作帶來很大困難。若能把植板細胞密度減小，或能在完全孤立的情況下培養單個細胞，這個問題則可減輕。但是，就像在懸浮培養中一樣，在正常條件下，每個物種都有一個最適的植板密度，同時也有一個臨界密度。當低於這個臨界密度時，細胞就不能分裂。因此，為了在低密度下進行細胞培養，或是培養完全孤立的單個細胞，必須採用一些特殊的方法。
