梅毒螺旋體基因擴增檢測

梅毒螺旋體基因擴增檢測是指利用基因擴增技術對梅毒螺旋體DNA進行體外核酸擴增，從而診斷梅毒的方法。通過梅毒螺旋體基因擴增檢測可早期確診梅毒感染，儘早治療梅毒，防止蔓延及病情的惡化。

基本介紹

• 中文名：梅毒螺旋體基因擴增檢測
• 操作方法：變性、退火、延伸
• 臨床意義：確診梅毒的主要依據

檢查前準備

向被檢測者解釋本操作的目的、方法等，消除顧慮，選取血液、腦脊液等進行檢測。

操作方法

選擇47kDa膜抗原基因（tpp47基因）、39kDa鹼性蛋白基因（bmp基因），TPF1蛋白基因或TYF1蛋白基因和TmpA基因等作為引物，向緩衝液中加入引物，在模板DNA存在下，經變性、退火和延伸即可合成產物DNA，經若干個這樣的循環後，DNA即得到大量擴增。

1.變性

加熱使模板DNA在高溫（約94℃）變性，雙鏈間的氫鍵斷裂而形成兩條單鏈。

2.退火

使溶液溫度逐漸降至50℃～60℃，模板DNA即可與引物按鹼基配對原則互相結合。

3.延伸

再將溶液溫度逐漸升至72℃，耐熱DNA聚合酶以單鏈DNA為模板，在引物的引導下，利用反應混合物的4種脫氧核苷酸，複製出互補DNA。

上述3步為一個循環，樣本中的DNA量即可增加一倍，新形成的鏈又可為下一輪循環的模板。

臨床意義

梅毒螺旋體基因擴增檢測腦脊液中的梅毒螺旋體DNA可作為確診梅毒的主要依據，但本方法不能取代梅毒的血清學反應試驗。梅毒螺旋體基因擴增檢測血清中的梅毒螺旋體DNA，尚不能作為一種常規的檢測方法，同時，本方法不能用於抗菌素對梅毒治療效果的監測。通過梅毒螺旋體基因擴增還可監測先天性梅毒患兒梅毒螺旋體是否持續存在、持續的時間等。