梅毒螺旋體制動試驗

梅毒螺旋體（treponema pallidum，TP）屬密螺旋體屬，是人類梅毒的病原體，梅毒是人類的主要性病之一。梅毒患者血清中有兩類抗體；一類是反應素，是IgA與IgM型混合抗體，能與哺乳動物心肌提取的心類脂抗原發生非特異反應，對機體無保護作用，但可供血清學診斷篩選試驗用。另一類是梅毒螺旋體特異性抗體，在厭氧條件下和有補體存在時，能抑制活的梅毒螺旋體運動，並能將其殺死或溶解，可以用來對梅毒進行確證實驗。梅毒螺旋體培養非常困難，故主要用血清學診斷方法進行診斷。

概述

梅毒螺旋體（treponema pallidum，TP）屬密螺旋體屬，是人類梅毒的病原體，梅毒是人類的主要性病之一。梅毒患者血清中有兩類抗體；一類是反應素，是IgA與IgM型混合抗體，能與哺乳動物心肌提取的心類脂抗原發生非特異反應，對機體無保護作用，但可供血清學診斷篩選試驗用。另一類是梅毒螺旋體特異性抗體，在厭氧條件下和有補體存在時，能抑制活的梅毒螺旋體運動，並能將其殺死或溶解，可以用來對梅毒進行確證實驗。梅毒螺旋體培養非常困難，故主要用血清學診斷方法進行診斷。

別名

密螺旋體活動試驗；TPIT

檢查名稱

梅毒螺旋體制動試驗

分類

血清學檢查 > 其他

化驗取材

血液

梅毒螺旋體制動試驗的原理

用活的梅毒螺旋體Nichols株與患者滅活血清及新鮮補體混合，在厭氧條件下孵育16h，然後在暗視野顯微鏡下觀察有活動力的螺旋體的百分數，並與正常人血清對比。若血清內有梅毒螺旋體抗體，則可抑制梅毒螺旋體，使其失去活動力。若有活動力的螺旋體數為對照組的40%或40%以下，則為陽性。

試劑

本試驗有商品試劑盒。2～10℃避光可保存1年。但試劑瓶開啟後應及時使用。

操作方法

（1）用吸收劑對業經56℃水浴30min滅活的被檢血清作1∶5稀釋，充分混勻。

（2）加0.03ml分別用PBS和吸收劑作1∶5稀釋過的非特異性控制血清於固著抗原螺旋體的玻片反應圈內。此為陰性對照。

（3）加0.03ml經吸收劑作1∶5稀釋過的最小反應性（+）控制血清於玻片反應圈內。此為陽性對照。

（4）加0.03ml經吸收劑作1∶5稀釋過的被檢血清於玻片反應圈內。

（5）將此玻片置於濕盒內，36℃±1℃，保溫30min。

（6）將玻片置於玻片架上，用PBS（pH值7.2±0.1）沖淋玻片5s，然後浸入此PBS中5min。再拎出、浸沒玻片，濯洗30次。

（7）用業經120℃ 15min消毒的蒸餾水沖淋5min。用吸水紙輕輕將玻片吸乾。

（8）加0.03ml異硫氰酸螢光素標記的抗人IgG（FITC-標記抗人IgG）於每個反應圈內。重複5～7步驟。

（9）加固定液1小滴於玻片上，再復上蓋玻片，切勿形成氣泡。

（10）將玻片置螢光顯微鏡下，先用鎢燈為光源，在暗視野下尋找Nichols螺旋體。然後改用高壓汞燈，經濾光片選取紫外光段即可觀看螢光結果。讀片應在4h內完成。

正常值

陰性。

化驗結果臨床意義

本試驗敏感性和特異性均高，但操作複雜，臨床上少用，僅用於疑難病人的診斷和研究工作。

附註

早期梅毒菌先出現陽性，特異性為94%～100%。

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梅毒