有限稀釋法

有限稀釋法是一種常用的克隆方法，是指將需要再克隆的細胞株自培養孔內吸出並作細胞計數，計出1mL的細胞數。

基本介紹

• 中文名：有限稀釋法
• 釋義：一種常用的克隆方法
• 稀釋：HT培養液
• 環境：使細胞濃度為50～60個/mL

用HT培養液稀釋， 使細胞濃度為50～60個/mL，於96孔培養板中每孔加0.1mL(五六個細胞/孔)。接種2排，剩餘細胞懸液用HT培養液作倍比稀釋，再接種2排，如此類推，直至使每孔含0.5～1個細胞。培養7～10d後，選擇單個克隆生長的陽性孔再一次進行克隆。一般需要如此重複3～5次，直至達100%陽性孔率時即可，以確保抗體由單個克隆所產生。