《新型BAFF拮抗劑在系統性紅斑狼瘡中治療作用的研究》是依託天津大學，由孫劍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：新型BAFF拮抗劑在系統性紅斑狼瘡中治療作用的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：孫劍
- 依託單位：天津大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
隨著BAFF抗體-BENLYSTA (Belimumab)成功用於系統性紅斑狼瘡的治療，BAFF拮抗劑成為新的藥物研究熱點。而小分子BAFF拮抗劑的相關研究匱乏。我們前期基於BAFF與受體結構設計的小分子BAFF拮抗肽顯著抑制BAFF的生物學活性。為進一步提高BAFF拮抗肽的活性以及驗證其成藥性，我們將運用計算機輔助分子設計，理論上模擬、最佳化BAFF拮抗肽，並分析以人IgG1 Fc為支架展示BAFF拮抗肽的活性。在理論分析的基礎上，指導化學合成和基因重組技術製備BAFF拮抗肽和拮抗肽-Fc融合蛋白。體外實驗分析BAFF拮抗劑抑制BAFF與受體結合的能力、阻斷BAFF的信號傳導通路的機制和抑制BAFF生物學功能的作用。並利用動物模型和系統性紅斑狼瘡病人外周血B細胞，分析BAFF拮抗劑的生物學活性。闡明小分子BAFF拮抗劑在系統性紅斑狼瘡中的治療作用機制，為獲得治療這類疾病的潛在藥物奠定基礎。
結題摘要
隨著BAFF抗體-BENLYSTA (Belimumab)成功用於系統性紅斑狼瘡的治療，BAFF拮抗劑成為新的藥物研究熱點。而小分子BAFF拮抗劑的相關研究匱乏。為此，本項目在以下幾個方面開展了新型BAFF拮抗劑的研究：1.通過計算機輔助分子設計以及高通量虛擬篩選技術，篩選得到活性較好的4條BAFF拮抗肽：BC、TA、TC和SS12。2.競爭ELISA實驗發現,這些拮抗肽顯著抑制BAFF結合其受體BCMA和TACI。3.為增加肽的穩定性，我們將拮抗肽與人IgG1 Fc片段融合，形成肽體（peptibody），在大腸桿菌中大量表達、純化肽體。4.獲得的肽體與其相應的拮抗肽具有相同的活性。5.為了驗證計算機輔助設計BAFF拮抗肽的可行性，我們比較了自行設計的BAFF拮抗肽與文獻報導的噬菌體庫來源BAFF拮抗肽的活性，二者活性相近，噬菌體庫來源BAFF拮抗肽明顯好些。提示，計算機設計BAFF拮抗肽的思路可行。6.我們進一步探討了噬菌體庫來源BAFF拮抗肽與計算機設計BAFF拮抗肽的結合模式。計算機理論分析顯示：噬菌體庫來源BAFF拮抗肽和計算機設計BAFF拮抗肽的結合模式類似，噬菌體庫來源BAFF拮抗肽還具有BAFF受體結合BAFF的經典DxL結構域，可以解釋為什麼其結合BAFF好些。這為下一步設計拮抗肽提供了新的思路。7.我們比較了三拷貝與單拷貝BAFF拮抗肽-Fc融合蛋白活性，但發現BAFF拮抗肽數量增加後沒有明顯提高拮抗活性。8.在類風濕關節炎（CIA）小鼠中，我們自行設計的拮抗肽TC-Fc顯著降低發病小鼠臨床和組織病理學指數，顯著改善動物四肢腫脹、關節組織的退行性病變，降低B細胞和T細胞亞群細胞。表明計算機設計的BAFF拮抗劑對類風濕關節炎有預防和治療效應。在狼瘡小鼠中，TC-Fc能夠降低尿蛋白含量、血清中抗dsDNA和ANA抗體水平以及脾臟中生髮中心B（GC-B）細胞的比例，延緩SLE的發展。綜上所述，本項目系統研究了計算機輔助設計新型BAFF拮抗肽及其在體內、外的活性。發表了發表了11篇論文，其中6篇為SCI文章（一篇接受待發表）；申請專利3項，其中兩項已經授權；培養10名碩士研究生畢業。較好的完成了此項基金。
