《新型卵巢癌相關抗原CA166-9的生物學功能及作用機制研究》是依託北京大學，由崔恆擔任負責人的專項基金項目。
基本介紹
- 中文名：新型卵巢癌相關抗原CA166-9的生物學功能及作用機制研究
- 項目負責人：崔恆
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：專項基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
CA166-9 是我們新近克隆獲得的、由我中心研製的卵巢癌單克隆抗體COC166-9 特異識別的抗原。生物信息學和生物學功能等初步研究發現該抗原為人免疫球蛋白樣分子，陽性表達該抗原的卵巢癌細胞，具有顯著的遷移性與侵襲性，而抗CA166-9 抗體可明顯抑制該種癌細胞的遷移與侵襲，並發現該抗原是判斷卵巢癌病人預後的獨立危險因素，提示CA166-9 在卵巢癌發生髮展中起重要作用。本項目擬在上述工作的基礎上，在體外系統對CA166-9 的生物學功能進行研究；為後續進一步進行體內生物學功能研究、相關機制（如CA166-9 的相互作用蛋白、相關信號通路及活性調控等）及探討其在小鼠體內作為疫苗預防和治療卵巢癌的可行性提供理論基礎。
結題摘要
CA166-9是北京大學人民醫院婦科腫瘤研究中心自主研發的卵巢癌單克隆抗體COC166-9特異識別的抗原分子。該抗原在上皮性卵巢癌中表達率約為80%，正常成人組織及卵巢良性腫瘤中罕見表達。通過前期的實驗研究及生物信息學挖掘發現該抗原為人免疫球蛋白gamma-1重鏈恆定區（IGHG1），命名為CA166-9。陽性表達CA166-9的卵巢癌細胞具有較強的遷移及侵襲能力，且該抗原的陽性表達是判斷卵巢癌病人預後的獨立因素，提示CA166-9可能在卵巢癌的發生髮展中發揮重要作用。研究通過siRNA基因干擾、構建CA166-9質粒轉染等基因轉入的方法轉染不同的卵巢癌細胞，分別降低和升高CA166-9表達水平，研究其對卵巢癌細胞惡性表型如細胞增殖、凋亡，細胞遷移、侵襲能力，細胞周期以及細胞克隆形成能力的影響。同時體外表達CA166-9蛋白，分別用該蛋白處理CA166-9低表達細胞，並用單克隆抗體COC166-9處理CA166-9高表達卵巢癌細胞，進一步探究其對卵巢癌細胞惡性表型的影響。通過MTS實驗測定細胞增殖能力發現CA166-9對卵巢癌細胞系的增殖無顯著影響，降低或升高CA166-9表達水平細胞增殖能力無明顯差異（P＞0.05）。克隆形成實驗發現降低CA166-9表達可促進細胞克隆形成（P＜0.01），而升高CA166-9表達水平可以抑制細胞克隆形成（P＜0.05）。通過Annexin V/PI染色運用流式細胞儀檢測CA166-9低表達和過表達卵巢癌細胞的凋亡率，細胞早期凋亡率及總凋亡率均無統計學差異（P＞0.05）。Transwell小室細胞遷移及侵襲實驗發現過表達CA166-9可促進細胞的遷移及侵襲能力（P＜0.001），而干擾CA166-9表達後細胞的遷移及侵襲能力明顯降低（P＜0.05）。外源性加入體外表達的CA166-9蛋白可以促進CA166-9表達陰性的卵巢癌細胞的遷移及侵襲能力，但對細胞增殖能力無明顯影響。綜上所述，CA166-9可能通過促進卵巢癌細胞遷移及侵襲能力影響腫瘤細胞的運動，從而促進卵巢癌細胞的轉移擴散。
