《CD147在卵巢癌細胞糖酵解過程中的作用及機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由王宇擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：CD147在卵巢癌細胞糖酵解過程中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王宇
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
糖代謝異常是腫瘤細胞的重要特徵，在腫瘤發生及進展中具有關鍵作用，其調控機制的研究是腫瘤領域的熱點問題。既往文獻和我們最近發表的研究證明，CD147在腫瘤細胞中普遍高表達，並可通過調控MCT1的膜定位與表達促進肝癌細胞乳酸分泌，激活PI3K/Akt信號通路，下調p53的表達，進而發揮促進肝癌細胞糖酵解的功能。我們最近發現CD147在卵巢癌細胞中也具有促進糖酵解的功能，干涉其表達後，p-Akt與轉錄因子FoxM1的表達也隨之下降，且GLUT1啟動子區域存在FoxM1的結合位點。我們推測在卵巢癌細胞中存在CD147-Akt-FoxM1的順序調節，且該途徑不依賴於p53。本課題擬在此基礎上，構建p53基因敲除細胞，深入研究CD147參與卵巢癌細胞葡萄糖代謝的作用及分子網路調控機制。這些研究可進一步加深對卵巢癌能量代謝異常的理解，也為CD147作為卵巢癌治療靶點提供更為豐富的分子理論基礎。
結題摘要
本課題藉助p53缺失型卵巢癌細胞系，深入研究CD147參與卵巢癌細胞糖代謝重編程的生物學作用，系統分析CD147通過非依賴p53途徑促進卵巢癌細胞有氧糖酵解的分子網路調控機制。 第一部分：CD147通過非依賴p53途徑促進卵巢癌細胞糖酵解的作用研究 為闡明CD147在卵巢癌細胞糖代謝過程中的作用，我們構建了穩定干涉CD147的卵巢癌細胞系。我們發現在p53野生型和缺失型的卵巢癌細胞中，干涉CD147的表達均會降低細胞糖攝取、糖酵解速率和乳酸排出，而氧消耗則有所升高。小動物PET/CT成像系統顯示干涉CD147的表達會顯著降低裸鼠移植瘤的18F-FDG攝取能力，且移植瘤的細胞增殖速度有所降低。總之，我們的實驗結果表明CD147具有促進卵巢癌細胞糖酵解的作用，並有可能成為基於能量代謝失調的靶點。 第二部分：CD147在卵巢癌細胞中調控FoxM1的機制研究 為明確CD147促進卵巢癌細胞糖酵解的分子機制，我們使用shRNA技術在卵巢癌細胞A2780和SKOV3中干涉了CD147的表達。Western blot結果顯示，在卵巢癌細胞A2780和SKOV3中下調CD147會明顯降低CD147, pAKT、 pSTAT3和FoxM1的表達。Real time PCR結果顯示，在卵巢癌細胞中下調CD147會明顯降低FoxM1 mRNA的表達水平。AKT抑制劑LY294002和STAT3抑制劑S3I-201在卵巢癌細胞中會顯著降低過表達CD147對FoxM1的上調作用。我們還發現CD147和CD44在卵巢癌細胞中共定位。通過免疫組織化學染色檢測，我們發現CD147、pAKT、pSTAT3和FoxM1在卵巢癌組織中共表達，且與卵巢癌患者FIGO分期和淋巴結轉移相關。 第三部分：轉錄因子FoxM1促進卵巢癌細胞糖代謝重編程的機制研究 我們首先篩選了轉錄因子FoxM1可能調控的糖酵解關鍵酶，在卵巢癌細胞中干涉FoxM1的表達後，發現GLUT1和HK2的表達水平也隨之下降，且細胞糖酵解和增殖明顯受到抑制。進一步研究發現，GLUT1和HK2的DNA啟動子序列存在轉錄因子FoxM1的結合位點，FoxM1能在卵巢癌細胞中激活GLUT1和HK2的轉錄與表達。我們還發現FoxM1、GLUT1和HK2在卵巢癌組織中的表達水平遠高於正常卵巢組織，且FoxM1的表達分別與GLUT1和HK2的表達正相關。
