《整合素激活因子點燃素-3在深靜脈血栓形成中作用的研究》是依託上海大學，由馬衍青擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：整合素激活因子點燃素-3在深靜脈血栓形成中作用的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：馬衍青
- 依託單位：上海大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
深靜脈血栓症是目前世界上致死和致殘的一個重要病因，其形成的誘因一般是局部深靜脈血流凝滯，進而促使中性粒細胞的粘附和血小板的聚集，並誘發凝血反應，最終導致血栓的形成。目前深靜脈血栓形成的分子基礎尚不清楚。本課題將對在中性粒細胞和血小板中調控多種整合素激活的關鍵因子點燃素-3進行系統的研究，並重點分析點燃素-3信號通路在不同血細胞中對深靜脈血栓形成的影響。為此，我們製作了點燃素-3基因條件性剔除小鼠，然後與組織特異性Cre小鼠雜交分別獲得了在中性粒細胞和血小板中點燃素-3表達缺失的小鼠。另外，我們還製作了點燃素-3基因點突變敲入小鼠，阻斷點燃素-3在血細胞中與整合素的識別。同時，我們通過腹腔靜脈結紮手術建立了小鼠體內深靜脈血栓形成的病理模型。由此，我們可利用這些點燃素-3基因模式小鼠分析整合素信號通路在不同血細胞中對深靜脈血栓形成的作用，進而闡明深靜脈血栓發生的分子機理。
結題摘要
本項目主要內容是評價血小板和中性粒細胞中Kindlin-3分子對深靜脈血栓形成的影響和相應的調控機制。 Kindlin-3分子表達在血細胞中，是重要的胞內整合素激活因子。首先，利用Kindlin-3基因突變敲入小鼠（K3KI）模型來阻斷其與整合素的結合，我們證明了K3KI小鼠相對於野生型小鼠深靜脈血栓的形成明顯降低，說明血細胞中整合素信號通路是影響深靜脈血栓形成的關鍵因素。因為血液細胞中血小板和中性粒細胞對深靜脈血栓形成都有重要的促進作用，所以我們製作了Kindlin-3的條件性基因剔除小鼠（Kindlin-3fl/fl）並獲得了血小板中Kindlin-3特異敲除的Kindlin-3fl/fPF4-Cre小鼠和髓系粒細胞中Kindlin-3特異敲除的Kindlin-3fl/fLysM-Cre小鼠。通過功能驗證，我們發現血小板中Kindlin-3分子缺失可顯著抑制深靜脈血栓的形成；但是我們意外地發現Kindlin-3分子在粒細胞中表達缺失對深靜脈血栓的形成反而有明顯的促進作用。進一步機理研究發現中性粒細胞中Kindlin-3的表達缺失可促進其細胞核物質(NETs)的釋放，從而容易誘發深靜脈血栓的形成，但是該過程是受到血小板Kindlin-3信號的正向調控。這些發現不僅進一步揭示了不同血細胞中Kindlin-3信號對深靜脈血栓形成的影響和調控機理，而且也為將來開發更安全高效的抗深靜脈血栓形成藥物提供了新的靶點和理論基礎。
