定義
散射光當一束平行單色光照射在液體樣品上時,大部分光線透過溶液,小部分由於光子和物質分子相碰撞,使光子的運動方向發生改變而向不同角度散射,這種光稱為散射光(scattering light) 。
分類及影響
光子和物質分子發生彈性碰撞時,不發生能量的交換,僅僅是光子運動方向發生改變,這種散射光叫做瑞利光(Rayleigh scattering light),其波長與入射光波長相同。
光子和物質分子發生非彈性碰撞時,在光子運動方向發生改變的同時,光子與物質分子發生能量的交換,光子把部分能量轉移給物質分子或從物質分子獲得部分能量,而發射出比入射光稍長或稍短的光,這種散射光叫做拉曼光(Raman scattering light)。
散射光對螢光測定有干擾,尤其是波長比入射光波長更長的拉曼光,因其波長與螢光波長接近,對螢光測定的干擾更大,必須採取措施消除。選擇適當的激發波長可消除拉曼光的干擾。
消除方法
瑞利光與入射光波長相同,主要是由溶劑,容器以及膠體散射形成,距離螢光峰較遠,只要選擇適當的波長,由單色器消除即可。
拉曼光發射波長與螢光波長相近,難區別,由空白溶劑產生。因為螢光波長不隨著激發光的改變而改變,而拉曼光會改變,所以,只要採用波長較短的激發光進行激發,就可以避免。
舉例說明
(1)以硫酸奎寧為例,從圖a可見,無論選擇320或350mn為激發光,螢光峰總是在448nm,將空白溶劑分別在320及350mn激發光照射下進行測定。從圖b可見,當激發光波長為320mn時,溶劑的拉曼光波長是360nm,對螢光測定無干擾;當激發光波長為350mn時,拉曼光波長是400nm,對螢光測定有干擾,因而應選擇320mn為激發波長。
(2)三氯甲烷五種常用溶劑在不同波長激發光照射下拉曼光的波長,可供選擇激發光波長或溶劑時參考。從表中可見,四氯化碳的拉曼光與激發光的波長極為相近,所以其拉曼光幾乎不干擾螢光測定。而水、乙醇及環己烷的拉曼光波長較長,使用時必須注意。
溶劑 | 激發光(nm) |
248 | 313 | 365 | 405 | 436 |
水 | 271 | 350 | 416 | 469 | 511 |
乙醇 | 267 | 344 | 409 | 459 | 500 |
環己烷 | 267 | 344 | 408 | 458 | 499 |
四氯化碳 | 無 | 320 | 375 | 418 | 450 |
氯仿 | 無 | 346 | 410 | 461 | 502 |
相關知識
攝影照明光線有
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