懸浮細胞的同步化

細胞同步化是指同一懸浮培養體系的所有細胞都同時通過細胞周期的某一特定時期。

基本介紹

  • 中文名:懸浮細胞的同步化
  • 處理方法:物理方法化學方法
  • 物理方法: 分選法 冷處理法
  • 化學方法:飢餓法,抑制劑法,有絲分裂阻抑
常用的處理方法:
1)物理方法:①分選法,通過細胞體積大小分級,直接將處於相同周期的細胞進行分選,然後將同一狀態的細胞繼代培養於同一培養體系中。
②冷處理法。低溫處理可以提高培養體系中細胞同步化的程度
2)化學方法:①飢餓法,懸浮培養細胞中,若斷絕供應一種細胞分裂所必需的營養成分或激素,使細胞停滯在G1或G2期,經過一段時間的飢餓之後,當在培養基中重新加入這種限制因子時,靜止細胞就會同步進入分裂。
②抑制劑法,通過一些DNA 合成抑制劑處理細胞,使細胞停留在DNA 合成前期,當解除抑制後,即可獲得處於同一細胞周期的細胞。
③有絲分裂阻抑,用秋水仙素處理指數生長的懸浮培養物,濃度一般控制在0.2%,處理時間以4-6小時為宜。
在進行同步化處理之前,細胞必須進行充分的活化培養。用於處理的細胞系最好處於對數生長期。

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