《急性白血病新基因MLAA-34及其多肽疫苗的研究》是依託西安交通大學，由何愛麗擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：急性白血病新基因MLAA-34及其多肽疫苗的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：何愛麗
- 依託單位：西安交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
急性單核細胞白血病（AML-M5）迄今缺乏特異性的腫瘤標識分子。MLAA-34(GenBank:AY288977.2)是我們實驗室用SEREX法篩選並鑑定的一個候選M5腫瘤相關抗原新基因。本項目擬對MLAA-34開展進一步研究：①擴大標本檢測MLAA-34在不同腫瘤（包括M5）以及正常組織內的表達差異，確定其用於M5分子診斷的可能性；②擴大標本研究MLAA-34表達與M5患者臨床特徵、疾病預後間的關係，以及用於監測化療緩解或造血幹細胞移植後的微小殘留病灶（MRD）、預測疾病復發的臨床意義；③在我們原有白血病細胞瘤苗主動免疫治療的基礎上，設計MLAA-34多肽疫苗進行動物實驗研究，以提高免疫治療療效為下一步臨床套用奠定基礎。通過以上研究，以期為急性單核細胞白血病的分子診斷、預後判定以及臨床治療提供新的研究依據。
結題摘要
急性單核細胞白血病（M5）迄今缺乏特異性標誌分子。MLAA-34是我們實驗室用SEREX法篩選並鑑定的一個候選M5相關抗原新基因。本項目對MLAA-34開展進一步研究：①完善MLAA-34在血液腫瘤細胞系及實體瘤細胞系蛋白及轉錄水平上表達譜，MLAA-34在急性單核系白血病細胞高表達，粒系及淋巴系中低表達；實體腫瘤細胞系中MLAA-34均有低表達，但在高轉移性癌細胞株中表達高於其低轉移潛能細胞株；MLAA-34沉默後U937細胞Transwell下室細胞數小於空載組及陰性對照組，MLAA-34表達水平下降後會導致U937細胞侵襲能力下降；擴大標本檢測MLAA-34在不同白血病骨髓細胞以及正常PBMC的表達差異，與非M5白血病患者和健康對照相比，MLAA-34在M5中呈高表達，確定其可用於M5分子診斷。②擴大標本研究MLAA-34表達與M5患者臨床特徵、疾病預後間的關係，MLAA-34在初診M5患者中表達增高，隨疾病緩解而降低，且對M5患者進行隨訪，MLAA-34高表達的患者無復發生存期及總體生存期較短，其可用於監測化療緩解或造血幹細胞移植後的MRD、預測復發，是M5的獨立預後因素。③採用生物信息學方法預測了10個MLAA-34 HLA-A*0201限制性CTL表位；經典MHC-肽結合力實驗顯示CP701（236ILDRHNFAI244）與HLA-A*0201分子的親和力最強。採用重組GM-CSF、IL-4聯合TNF-α體外誘導HLA-A*0201陽性健康人PBMC成功獲得成熟DC。成熟DC經MLAA-34表位肽CP701負載與經免疫磁珠分選的CD8+ T細胞共培養獲得特異性CTL，在體外對同時表達MLAA-34和HLA-A*0201的白血病細胞及負載CP701肽的T2細胞產生確定的特異性殺傷作用；建立荷人急性單核細胞白血病細胞THP-1的HLA-A＊0201+ hu-PBL-SCID小鼠動物模型，MLAA-34表位肽CP701、T輔助細胞表位和不完全弗氏佐劑組成的多肽疫苗可抑制荷THP-1的hu-PBL-SCID小鼠瘤體增殖，延長其生存，體內可誘導特異性CTL殺傷活性，進一步確證MLAA-34 CP701多肽疫苗體內可誘導有效的免疫應答，具有抗白血病作用。通過以上研究，MLAA-34可為M5的分子診斷、預後判定以及臨床治療提供新的研究依據。
