微滴式數字PCR

微滴式數字PCR

微滴式數字PCR系統在傳統的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理,即將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬個納升級的微滴,其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個至數個待檢核酸靶分子。經PCR擴增後,逐個對每個微滴進行檢測,有螢光信號的微滴判讀為1,沒有螢光信號的微滴判讀為0,根據泊松分布原理及陽性微滴的個數與比例即可得出靶分子的起始拷貝數或濃度。

基本介紹

  • 中文名:微滴式數字PCR
  • 原理泊松分布
  • 優勢:低成本,且更實用
  • 套用方向:拷貝數變異研究
與傳統PCR相比所具有的優勢
不依賴Ct值或內參基因,即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的絕對數目。微滴技術讓數字PCR更低成本,且更實用。
大致的套用方向
適合於拷貝數變異研究、複雜來源樣品中含量極低核酸分子的檢測、NGS數據驗證、NGS測序文庫的鑑定、miRNA等差異微小的基因表達研究。

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