《從蛋白質-mRNA相互作用探討核仁素的心肌保護機制》是依託中南大學，由肖獻忠擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：從蛋白質-mRNA相互作用探討核仁素的心肌保護機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：肖獻忠
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
申請者前期發現核仁素是一可能的心肌內源性保護蛋白，並從核仁素能與含核仁素結合元件的rRNA相結合的事實出發，提出核仁素也能與含有該元件的mRNA相結合從而從轉錄後水平調節某些心肌保護性基因表達並發揮心肌保護作用的假設，通過製備心肌中過表達核仁素的轉基因小鼠和採用cDNA晶片已篩選到多個可能與核仁素結合的心肌保護性基因mRNA。在此基礎上，擬採用上述核仁素轉基因小鼠、核仁素過表達或RNA干擾的心肌細胞，分別製備心肌缺血-再灌注損傷和心肌細胞缺氧-再給氧損傷模型，深入探討核仁素的心肌保護作用，採用生物信息學技術、RNA-EMSA、蛋白質-RNA免疫共沉澱、mRNA穩定性分析、螢光素酶報告基因等技術探討核仁素與3-5個心肌保護性基因的相互作用，從轉錄後水平深入揭示其對這些基因的調控機制，從多個水平闡明核仁素的心肌保護機制。可望發現新的心肌保護分子和信號通路，為心肌損傷保護開闢新的研究領域。
結題摘要
申請者前期工作發現核仁素是一可能的心肌內源性保護蛋白，並從核仁素能與含核仁素結合元件的rRNA相結合的事實出發，提出核仁素也能與含有該元件的mRNA相結合從而在轉錄後水平調節某些心肌保護性基因表達並發揮心肌保護作用的假設。本項目試圖深入探討核仁素的心肌保護作用，揭示核仁素與多個心肌保護性基因的“蛋白質-mRNA”相互作用，從轉錄後水平揭示其對這些基因的調控機制，從分子水平闡明核仁素的心肌保護機制。研究結果顯示：1、大鼠心肌缺血-再灌注損傷及心肌細胞缺氧-再給氧損傷與心肌中核仁素的表達下調及核仁素全長蛋白質的斷裂有關；2、核仁素通過“蛋白質-mRNA”相互作用與心肌保護性基因HSP32和HSP70的mRNA分子相結合，增加後者的穩定性，從轉錄後水平明顯上調HSP32和HSP70的表達，從而在心肌缺血預適應中發揮心肌保護作用；3、核仁素通過“蛋白質-miRNA”相互作用，調控miR-21等miRNA的表達，從而發揮心肌保護作用；4、核仁素通過“蛋白質-mRNA”相互作用從轉錄後水平上調VEGF和MMP9的表達，促進缺血心肌中的血管新生，從而發揮心肌保護作用；5、中藥單體成分羥基紅花黃色素A（HSYA）上調核仁素表達，後者通過“蛋白質-mRNA”相互作用，上調VEGFA和MMP9的表達，從而促進血管新生，減輕心肌細胞凋亡，減輕缺血所致的心肌損傷；6、核仁素通過“蛋白質-mRNA”相互作用，在轉錄後水平上調巨噬細胞中ATP結合盒運轉體（ABCA1）的表達，促進膽固醇流出，抑制動脈粥樣硬化斑塊中巨噬細胞的泡沫化。上述研究結果屬國內外首次發現，深入揭示了核仁素在心肌內源性保護中的作用及其分子機制，為心肌保護研究開闢了新的領域。
