《布氏錐蟲中tRNA來源的小RNA的鑑定和功能研究》是依託中山大學，由溫硯子擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：布氏錐蟲中tRNA來源的小RNA的鑑定和功能研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：溫硯子
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
布氏錐蟲是非洲人睡眠病和動物錐蟲病的病原體，是世界衛生組織(WHO)和世界動物健康組織(OIE)致力要在全球控制和消滅的重要人畜共患熱帶病病原體之一，也是國際學術界研究宿主與寄生原蟲相互作用關係的重要模式物種。布氏錐蟲在人體和哺乳動物體內的分化和發育是其成功傳播的關鍵，但其分化發育的機理至今仍存在極大的爭議。越來越多研究表明，非編碼小RNA在真核生物的分化發育中具有重要的生物學功能。本項目將利用大規模高通量技術測序得到的布氏錐蟲非編碼小RNA資料庫，尋找轉運核糖核酸（tRNA）產生的小RNA，並研究其與錐蟲分化發育相關的蛋白編碼基因之間的關係，擬闡明錐蟲分化過程的調控機理。研究結果將為揭示小RNA與錐蟲的分化發育關係提供確切的分子證據，為研究真核生物中tRNA的功能進化和RNA水平調控機制的進化提供重要參考。
結題摘要
布氏錐蟲是非洲人睡眠病和動物錐蟲病的病原體，是世界衛生組織(WHO)和世界動物健康組織(OIE)致力要在全球控制和消滅的重要人畜共患熱帶病病原體之一，也是國際學術界研究宿主與寄生原蟲相互作用關係的重要模式物種。布氏錐蟲在人體和哺乳動物體內的分化和發育是其成功傳播的關鍵，但其分化發育的機理至今仍存在極大的爭議。越來越多研究表明，非編碼小RNA在真核生物的分化發育中具有重要的生物學功能。本項目利用高通量技術測序得到的布氏錐蟲非編碼小RNA資料庫，發現一部分小RNA來源於tRNA。進一步研究證實這些小RNA的產生不是隨機的，而是特定來源於tRNA的一些位置，並且這些小RNA與RNA干擾途徑中的DICER蛋白的表達相關，說明它們是具有功能的tRNA來源的siRNA。這些siRNA在布氏錐蟲的不同生活史時期表達量存在差異，也說明這些siRNA在布氏錐蟲的分化過程中發揮作用。同時我們也證實錐蟲中有少量的microRNA，並且它們也與布氏錐蟲的分化相關。研究結果為揭示小RNA與錐蟲的分化發育關係提供確切的分子證據，也為研究真核生物小RNA的進化提供重要的理論依據。另外在項目資助下，我們也獲得計畫外成果，並已發表於SCI期刊。錐蟲亞屬包含布氏錐蟲、伊氏錐蟲和馬媾疫錐蟲三個蟲種，它們彼此間的進化關係一直撲朔迷離。我們採用SSCP和ITS測序的方法對錐蟲亞屬三個蟲種進行分析，再次證實伊氏錐蟲和馬媾疫錐蟲應為布氏錐蟲的亞種甚至蟲株，為進一步釐清三者進化關係提供重要參考。錐蟲的凍存和復甦一向套用哺乳動物細胞的常用方法，少有革新。我們首次將細胞外凍存劑海藻糖及其與胞內凍存劑（甘油和DMSO）組成的混合凍存方案套用於各種生活史時期的錐蟲，探索出一套毒性小、操作簡便、效率更高的凍存方案。這也將為其他原生動物實現有效凍存提供重要的參考。
