小鼠乳腺癌幹細胞通過重編輯免疫逃逸機制的研究

《小鼠乳腺癌幹細胞通過重編輯免疫逃逸機制的研究》是依託江蘇大學，由莊秀芬擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：小鼠乳腺癌幹細胞通過重編輯免疫逃逸機制的研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：莊秀芬
• 依託單位：江蘇大學

項目摘要

腫瘤幹細胞具有自我更新與多向分化潛能，與腫瘤的發生、發展、復發及轉移密切相關。腫瘤免疫編輯理論揭示了機體免疫系統與腫瘤細胞的相互作用最終導致了腫瘤的進展。我們此前的研究已證實在小鼠乳腺癌細胞系4T1中 ALDHbr細胞具有腫瘤幹細胞的特點，並首次發現在免疫功能正常的小鼠體內，原發腫瘤中4T1 ALDHbr細胞的比例隨著腫瘤進展逐漸增高。我們推測這群腫瘤幹細胞受到了免疫系統的“編輯”，發生了免疫逃逸。我們還發現在T細胞缺陷的裸鼠體內，腫瘤中4T1 ALDHbr細胞的比例隨著腫瘤進展反而下降。因此，我們進一步推測T細胞可能是“編輯”4T1 ALDHbr細胞的主要效應細胞。目前關於免疫系統“編輯”腫瘤幹細胞的研究尚未見報導，本項目以4T1小鼠乳腺癌作為腫瘤模型，首次將腫瘤幹細胞與免疫編輯相結合，探索免疫系統特別是T細胞亞群對4T1 ALDHbr細胞的“編輯”作用，並從細胞因子角度初步探討其機制。

結題摘要

腫瘤幹細胞與腫瘤增殖，復發和轉移密切相關。腫瘤免疫編輯理論認為腫瘤的發生、發展是一個機體免疫系統與腫瘤細胞相互作用的動態過程。我們首次發現在免疫功能正常的Balb/c小鼠體內，原發腫瘤組織中具有腫瘤幹細胞特點的4T1 ALDHbr細胞的比例隨著腫瘤進展逐漸增高。而在T細胞免疫缺陷的Balb/c 裸鼠體內，其比例隨著腫瘤進展反而下降。流式細胞儀檢測發現在Balb/c小鼠體內CD8+TL隨著腫瘤進展而逐漸下降。我們推測這群腫瘤幹細胞可能受到了CD8+TL “免疫編輯”。通過流式細胞儀分選出CD8+TL後與普通4T1細胞共培養後，檢測4T1 ALDHbr細胞的比例明顯降低（p小於0.05）。刪除Balb/c小鼠體內CD8+TL後，這群腫瘤幹細胞比例明顯升高（p小於0.05），因此，本研究認為4T1 ALDHbr可以被CD8+TL優先殺傷。IFN-γ是CD8+TL分泌的主要細胞因子，ELISA檢測發現IFN-γ在Balb/c小鼠體內隨著腫瘤進展而逐漸降低，推測IFN-γ可能免疫編輯腫瘤幹細胞。IFN-γ處理4T1細胞後，流式細胞儀檢測4T1 ALDHbr細胞的比例明顯下降（p小於0.05），Western blot檢測發現ALDH1A1蛋白表達也明顯減少。而且，IFN-γ可以明顯減少4T1腫瘤細胞球的形成，但對4T1細胞增殖無明顯影響。本研究通過Transwell檢測發現IFN-γ可以明顯降低4T1細胞侵襲能力。細胞免疫螢光實驗結果表明IFN-γ可以明顯降低4T1細胞中ALDH1蛋白表達，但Real-Time PCR檢測並未發現IFN-γ可以明顯降低ALDH1A1 mRNA的表達。因此，本研究認為IFN-γ可以免疫編輯小鼠乳腺癌幹細胞，有望通過免疫干預為腫瘤幹細胞的靶向治療提供一種新的靶點和途徑，具有重要的理論意義和實際套用價值。