密度梯度離心技術是用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置於介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。這類分離又可分為速度沉降和等密度沉降平衡兩種。密度梯度離心技術常用的介質為氯化銫,蔗糖和多聚蔗糖。
基本介紹
- 中文名:密度梯度離心技術
- 定義:用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置於介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離
密度梯度離心技術是用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置於介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。這類分離又可分為速度沉降和等密度沉降平衡兩種。密度梯度離心技術常用的介質為氯化銫,蔗糖和多聚蔗糖。
密度梯度離心技術是用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置於介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。這類分離又可分為速度沉降和等密度沉降平衡兩種。密度梯度離心技術常用的介質為...
密度梯度離心(density gradient centrifugation)用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置於介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。這類分離又可分為速度沉降和等密度沉降平衡兩種。密度梯度離心常用的介質為氯化銫,蔗糖和多聚蔗糖。分離活細胞的介質要求:1)能產生...
樣品在離心後與梯度液一起收集,用常規技術去除梯度材料後就得了某個較純的成份。每個單一組份的沉降速率取決於它們的形狀、尺寸、密度、離心力的大小、梯度液的密度和粘性係數。對於相類似的生物體組份常常形狀也相似。在速率區帶離心中我們常常使梯度液的最大密度不超過樣品在該梯度中浮密度。利用這類生物組份在...
等密度梯度離心(isodensity)是一個物理學名詞,此法常用CsCl、蔗糖、甘油等做介質。原理 等密度梯度離心isodensity / isopycnic centrifugation 原理:當不同顆粒存在浮力密度差時,在離心力場下,在密度梯度介質中,顆粒或向下沉降,或向上浮起,一直移動到與它們各自的密度恰好相等的位置,在這裡顆粒沒有重量,不管...
離心浮集法又稱密度梯度(區帶)離心法。指利用分子的沉降速度與其質量和密度的關係而採用密度梯度離心技術,將蛋白質、核酸等高分子分離成區帶並加以收集的技術方法。如果把這些高分子顆粒放在具有密度梯度(density gradiont)的介質中離心時,顆粒沉降到自身密度等於介質密度時,即停止不前,並且各種高分子物質在離心管...
密度梯度區帶離心法是將樣品加在惰性梯度介質中進行離心沉降或沉降平衡,在一定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同區帶的分離方法。此法的優點是:①分離效果好,可一次獲得較純顆粒;②適應範圍廣,能象差速離心法一樣分離具有沉降係數差的顆粒,又能分離有一定浮力密度差的顆粒。顆粒不會擠壓...
利用離心機對樣品進行分離、純化和提取的技術稱為離心分離技術。常用的離心技術包括:沉澱離心、差速離心、密度梯度離心、分析超速離心 、離心淘洗、區帶離心及連續流離心等技術,其中沉澱離心、差速離心和密度梯度離心是實驗室中常用的離心技術。其餘技術均需要特殊的離心機或轉頭。差速離心法 差速離心是根據顆粒大小和...
氯化銫梯度離心法 亦稱平衡密度梯度離心法。用超離心機對小分子物質溶液,長時間加一個離心力場達到沉降平衡,在沉降池內從液面到底部出現一定的密度梯度。若在該溶液里加入少量大分子溶液,則溶液內比溶劑密度大的部分就產生大分子沉降,比溶劑密度小的部分就會上浮,最後在重力和浮力平衡的位置,集聚形成大分子帶狀物...
《密度梯度離心法》是1982年科學出版社出版的圖書,作者是欣頓、多布羅塔。內容簡介 本書綜述了密度梯度離心的原理、方法和套用。內容包括:離心機(各種轉頭)的使用和保養,離心分離的原理和條件,在普通轉頭和區帶轉頭中的離心,離心結果的分析,密度梯度離心技術的套用及其展望。全書共分九章,附有參考文獻和附錄。本...
垂直密度梯度離心全自動血脂譜檢測(Vertical Auto Profile,VAP)是一種新型梯度密度離心後血脂蛋白亞組分分譜分離相檢測方法,可同時檢測外周血RLP、sdLDL-C和LDL-P等。技術原理 VAP(垂直密度梯度離心全自動血脂譜檢測,Vertical Auto Profile)技術是基於密度梯度超高速離心方法分離脂蛋白,再利用特殊的表面活性劑使不同...
等密度離心 在這種梯度離心中,顆粒的密度是影響最終位置的唯一因素,因此用這種方法分離顆粒,主要是根據被分離顆粒的密度差異。只要被分離顆粒間的密度差異大於1% 就可用此法分離。蔗糖或者甘油(它們的最大密度是1.3g/cm3)通常可用於分離膜結合的細胞器,如高爾基體、內質網、溶酶體和線粒體。在等密度梯度離心中...
離心分離生物分子是最常用的生化分離方法,因為不同的生物分子有不同的體積和密度,可在不同離心力的作用下沉降分離。隨著生命科學技術的發展,離心分離技術已成為生物化學與分子生物學中不可缺少的分離技術手段。對於兩相密度相差較小,黏度較大,顆粒粒度較細的非均相體系,在重力場中分離需要很長時間,甚至不能完全...
密度梯度製備儀,是一種採用具有獨家專利的傾斜管旋轉處理技術,40秒內可以製造出6組相同的線性密度的儀器。?處理過程包含了,將兩種不同比例的溶液(例如5%和30%的蔗糖溶液)在離心管里直接分層出來,通過一種特殊的帶磁極的管夾將它放置妥當,固定在儀器上面的鋼板上。兩次按鍵後,製備儀接管並以一定的角度傾斜試管...
浮力密度離心是2008年公布的生物化學與分子生物學名詞。 定義 密度梯度離心達到平衡時,各種顆粒(分子、病毒、亞細胞成分等)會懸浮在與自身密度相同的區帶中而得到分離的依密度分離的離心法。並由此可測得其顆粒密度。密度梯度介質最常用的是氯化銫(CsCl),因為CsCl能提供較高的密度,可用於密度較高的分子(如DNA)分離...
大的離心力、長的離心時間都對細胞不利。大細胞比小細胞更易受高離心力的損傷,而且停留在等密度介質中的細胞比處在移動中的細胞受到更大的損傷。因此,這種方法適於分離細胞器,而不太適於分離和純化細胞。流式細胞術 流式細胞術是對單個細胞進行快速定量分析與分選的一門技術。在分析或分選過程中,包在鞘液中的...
用蔗糖密度梯度離心法進行了禽腦脊髓炎病毒的純化,為了研究高等植物細胞質膜上的質子泵ATP酶的作用機理,需要純化細胞質膜,Hodges等首先使用蔗糖梯度法純化燕麥根細胞質膜,廣泛地套用著,Lundborg等套用水溶性多聚體(PEG/Dextran)兩相分配法純化小麥根細胞質膜後,兩相分配法在質膜純化上逐步引人注意,被認為是一種優...
等密度離心的有效分離取決於顆粒的浮力密度差,密度差越大,分離效果越好,與顆粒的大小和形狀無關。但後兩者決定著達到平衡的速率、時間和區帶的寬度。顆粒的浮力密度不是恆定不變的,還與其原來密度、水化程度及梯度溶質的同透性或溶質與顆粒的結合等因素有關。例如某些顆粒容易發生水化使密度降低。這種技術根據浮力...
對無機功能納米顆粒的液相化學反應機理,包括液相合成、表面反應、以及組裝機理的研究,是其穩定製備與可控組裝的前提,但由於技術條件的限制開展不足。密度梯度離心技術由於其針對多分散體系和可以快速轉換化學環境的特點,為開展上述研究提供了新的可能。本課題擬在前期納米分離工作的基礎上,選擇貴金屬、半導體及其複合...
梯度離心 梯度離心是2014年公布的藥學名詞。定義 被離心樣品置於成梯度分布的介質中進行水平或垂直離心。常用的介質有蔗糖及氯化銫,前者需事先在離心管中配製好連續或不連續梯度,後者配成一定濃度溶液,在離心過程中會形成連續梯度。出處 《藥學名詞》。
《液相密度梯度超離心速率分離膠體顆粒及相關性能研究》是依託北京化工大學,由孫曉明擔任項目負責人的面上項目。項目摘要 尺寸及形狀嚴格均一的可溶性單分散膠體粒子具有獨特的光、電、磁、催化等方面物理、化學特性,是國內外化學及材料學領域研究熱點之一,也是膠體顆粒尺寸效應、性能- - 結構關係研究的前提與基礎。目...
現對血小板分離純化技術發展過程中的代表性方法作一介紹及評價。常用方法介紹 洗滌法 以5%EDTA抗凝的血樣在室溫下,以1500rpm/ 200g離心12分鐘,離心後上層為富血小板血漿,下層為壓積白細胞和紅細胞。將富血小板血漿轉入塑膠試管,3500rpm/1200g離心5min。棄去上層血漿,用血小板洗滌液洗滌3次。梯度密度離心法 梯度...
另一種沉降分析和上述不同,叫等密度沉降分析。它是高分子在密度梯度介質中沉降。樣品密度是在密度梯度介質液柱的液面密度和液底密度之間,因此平衡時樣品將固定在梯度介質與它密度相等的地方。這個方法可以測量浮力密度,用於研究溶劑化作用和樣品的化學組成。套用 超離心分析技術對測定高分子的分子量特別有用,測定的...
《生物大分子離心分離技術》是1990年湖南科學技術出版社出版的圖書,作者是葉正祥。內容介紹 生物學和化學研究中離心技術基本專業知識. 很實用.作品目錄 1儀器 1.1離心機 2離心操作的一般知識 3離心作用的基本理論 5密度梯度離心技術:速率區帶離心 6密度梯度離心技術:等密度梯度離心 7區帶離心技術 8沉降係數的測定...
外周血單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞,其比重為1.070左右,而紅細胞和多核白細胞的比重超過1.080。這樣利用介於兩者比重之間的溶液(稱為分層液)做密度梯度離心,就可得到單個核細胞。最常用的分層液為聚蔗糖和泛影酸鈉混合比重為1.070±0.001的溶液,國內常用泛影葡胺代替泛影酸鈉。二、試劑與器材 1、聚...
細胞分級分離法是根據細胞的密度,沉降率和藉助各類細胞的生物特性,如貼附能力等,對各種細胞進行分離的生物學方法。常用的方法有:自然沉降法、離心沉降法、明膠沉降法、貼附法等。其中比較常用的方法是密度梯度離心法。分離原理可用沉降速度說明:被分離的細胞半徑越大,它與溶液的比重差越大,沉降速度越快。如果...
密度梯度離心法即根據骨髓中各細胞成分比重的不同,分離單核細胞進行貼壁培養。二者本質上無多大區別。隨著對MSC表面抗原認識的深入,又有人利用免疫方法如流式細胞儀法、免疫磁珠法等對其進行分離純化。但經過流式或磁珠分選後的細胞出現了增殖緩慢等一些問題,加之成本較高和技術的難度,在某種程度上限制了這些方法的...
衛星DNA(satelliteDNA)是一類高度重複序列DNA。在介質氯化銫中作密度梯度離心(離心速度可以高達每分鐘幾萬轉)時,DNA分子將按其大小分布在離心管內不同密度的氯化銫介質中,小的分子處於上層,大的分子處於下層。從離心管外看,不同層面的DNA形成了不同的條帶。根據螢光強度的分析,可以看到在一條主帶以外還有一個...
2.密度梯度離心 3.凝膠過濾 二、利用溶解度差別的純化方法 1.等電點沉澱和pH控制 2.蛋白質的鹽溶和鹽析 3.有機溶劑分級分離法 4.溫度對蛋白質溶解度的影響 三、根據電荷不同的純化方法 1.電泳 2.聚丙烯醯胺凝膠電泳 3.毛細管電泳 4.等電聚焦 5.層析聚焦 6.離子交換層析 四、利用選擇性吸附的純化方法 1...
抗凝絮作用,套用物理或化學方法,除掉或抑制血液中的某些凝血因子,阻止血液凝固,稱為抗凝。能夠阻止血液凝固的化學試劑或物質,稱為抗凝劑或抗凝物質。如天然抗凝劑(肝素,水蛭素等)Ca+2鰲合劑(檸檬酸鈉,氟化鉀)原理:使凝血酶原不能激活,Ca+2是凝血因子IV,其他的是蛋白類.離心技術是根據顆粒在勻迷圓周...
液相分離法是指將均勻液相或熔體通過某種機理分離成兩種不同成份互不混溶的液相的方法,包括液相色譜法、多維液相分離等方法。碳納米管的液相分離方法主要包括電泳法、密度梯度離心法、管壁修飾法、凝膠色譜法和萃取法等。定義 液相分離法是指將均勻液相或熔體通過某種機理分離成兩種不同成份互不混溶的液相的方法。液...