姬姆薩染色法

姬姆薩染色法

姬姆薩染色法簡稱姬氏染色,是用天青色素、伊紅、次甲藍混合而成的姬姆薩染料對血液塗抹標本、血球、瘧原蟲、立克次體以及骨髓細胞、脊髓細胞等標本進行染色的染色方法。染前用蛋白酶等進行處理,然後再用姬姆薩染液染色,在染色體上,可以出現不同濃淡的橫紋樣著色。姬姆薩染液可將細胞核染成紫紅色或藍紫色,胞漿染成粉紅色,在光鏡下呈現出清晰的細胞及染色體圖像。

基本介紹

  • 中文名:姬姆薩染色法
  • 外文名:Giemsa staining method
  • 用途:血液塗抹標本、血球、瘧原蟲
  • 別名:姬氏染色法
  • 材料天青色素、伊紅、次甲藍混合
  • 學科:動物生理學
作用機理,操作步驟,注意事項,

作用機理

姬姆薩染色液由天青,伊紅組成。染色原理和結果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒為鹼性蛋白質,與酸性染料伊紅結合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質,細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性,與鹼性染料美藍或天青結合,染紫藍色,稱為嗜鹼性物質,中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合,染淡紫色,稱為中性物質。
PH對細胞染色有一些影響。細胞里各種成分均不蛋白質,因為蛋白質系兩性電解質,帶電荷隨溶液PH而定,在偏酸性環境裡下在電荷增多,易和伊紅結合,染色為偏紅,在偏三性環境裡負電荷增多,易和美藍或天青結合,染色偏藍。所以細胞染色對氫離子濃度十分敏感,染色用正經片一定清潔,要無酸鹼污染。配製頊特液一定用優質甲醇,稀釋染色一定用緩衝液,沖洗一定用水應近中性,不然可導致各種細胞染色反應異常,以致於識別困難,甚至造成錯誤的。
一般性操作技術血塗片製備、細胞染色、顯微檢查、血液病診斷、染色不良。

操作步驟

具體操作步驟: ①滴加姬姆薩染色液A液(0.5〜0.8ml)於塗片上,並讓 染液覆蓋整個標本塗片染色1分鐘;②將姬姆薩染色液B 液滴加於A液上面(滴加之量為A液的2 ~3倍)以洗耳球吹出 微風使液面產生漣漪狀,使兩液充分混合,染色3〜10分鐘; ③水洗(沖洗時不能先倒掉染液,應以流水衝去,以防有沉渣 沉澱在標本上);④乾燥,鏡檢。

注意事項

(1)染色時間要視何種標本,塗片厚薄,有核細胞多少, 何種細胞及室溫等而定;通常染血液塗片時滴加B液後染1〜3 分鐘即可,染骨髓片則應不少於5分鐘。(2)做骨髓塗片時,因為骨髓纖維蛋白含量較高,凝固較 快,所以塗片過程要快。骨髓不可用草酸鹽抗凝,否則會使血細 胞核變形,核染色質緻密,胞質空泡形成,出現草酸鹽結晶。(3)染液量需充足,勿使染液蒸發乾燥,以防染料沉著於塗片上。(4)做血細胞染色時,當天氣寒冷或濕度較大時,應於 37T溫箱中保濕促乾,以免細胞變形縮小。

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