《基於PEAR1受體功能和基因的抗血栓藥理新靶點研究》是依託北京大學，由向倩擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：基於PEAR1受體功能和基因的抗血栓藥理新靶點研究
- 項目負責人：向倩
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
全基因組關聯分析和細胞研究提示PEAR1受體參與血小板聚集、新生血管的形成，但它的作用和機理均未闡明。申請人前期研究發現PEAR1基因多態性與抗血小板藥物藥效相關，還與經皮冠狀動脈介入治療術後的支架內血栓和狹窄相關。據此，申請者推測PEAR1可能通過影響血小板功能、血管內皮細胞功能對抗血小板藥物療效產生至關重要的影響，並可能是潛在的抗血栓新靶點。本項目中我們用已構建的PEAR1基因敲除小鼠模型，模擬PEAR1拮抗或功能缺失的情況，與野生型小鼠比較抗血小板藥物作用下血小板聚集、血栓形成，同時測定PEAR1及下游細胞信號因子磷酸化以證明機理；最後用已建立的患者樣本庫，採用二代測序技術測定PEAR1及相關基因的全序列，分析PEAR1與相關基因的協同作用。本研究將探索PEAR1作為抗血栓藥理學新靶點的可能，並有望發現基因導向個體化治療新位點。
結題摘要
課題承擔人前期研究發現PEAR1基因多態性與抗血小板藥物藥效相關，本項目通過構建PEAR1基因敲除小鼠模型，模擬PEAR1拮抗或功能缺失的情況，進一步闡明PEAR1在血小板功能、抗血小板藥物療效中發揮的作用。與野生型小鼠比較，Pear1基因敲除沒有影響血小板計數等，提示Pear1基因的缺失沒有影響小鼠血小板生成和凋亡過程。Pear1敲除小鼠對40 umol ADP、0.15U/mL凝血酶和2μg/mL膠原等血小板激動劑誘導的血小板聚集反應性增加；栓塊收縮實驗發現， Pear1敲除小鼠血小板栓塊收縮速度快，收縮面積大，表明Pear1的缺失使血栓形成更快、更穩定；Pear1-/-小鼠與野生型小鼠尾出血時間均沒有差異；ADP誘導小鼠急性肺栓塞實驗結果顯示在阿司匹林組和阿司匹林+氯吡格雷組中，Pear1-/-小鼠的死亡率較低。提示Pear1可能對阿司匹林和氯吡格雷的抗血小板效應有關。本課題為期2年，因小鼠繁育時間限制，以上結果有待擴大樣本量、完善實驗條件進一步驗證。此外，課題組還構建了移碼突變、片段篩除兩種PEAR1基因敲除小鼠模型，探討不同基因編輯對表型影響的機理。 臨床研究方面：①基於前期PEAR1外顯子基因多態性對普拉格雷藥效的影響，採用候選基因和通路的方法完成了多基因對普拉格雷藥效的影響研究；②完成了影響冠狀動脈首次支架植入術後再次植入支架的基因多態性研究，測定了包括PEAR1基因上14個SNP在內的全基因組60萬個SNP，發現CDH13基因與再次植入支架相關，未發現PEAR1 SNP與再次植入支架有顯著相關性；③對位於PEAR1上的19個SNP進行了分析，比較健康人和患者基因分布頻率的差異，結果發現PEAR1在兩組人群中SNP分布均不具有統計學意義的差異。 本課題證明，PEAR1作為血小板黏附受體在血塊收縮、血小板聚集中發揮了一定作用，PEAR1基因敲除與抗血小板藥物療效可能存在相互作用；臨床研究顯示人體PEAR1基因多態性可影響血小板聚集和抗血小板藥物藥效學指標，但與患者心血管臨床事件無顯著相關性。以上結果提示，PEAR1對血小板功能有影響，有望作為藥理學靶點研發新藥。
