基於金屬蛋白表達調控的金屬形態分析新方法研究

《基於金屬蛋白表達調控的金屬形態分析新方法研究》是依託東北大學,由陳明麗擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

  • 中文名:基於金屬蛋白表達調控的金屬形態分析新方法研究
  • 項目類別:面上項目
  • 項目負責人:陳明麗
  • 依託單位:東北大學
中文摘要,結題摘要,

中文摘要

複雜基體樣品中金屬形態的分離分析受到高度關注,而從複雜基體中提取痕量金屬形態依賴於有效的樣品預處理方法。因此發展樣品預處理理論並建立適於複雜基體樣品中金屬形態的高選擇性分離分析方法具有重要科學意義。 本項目的研究宗旨包括:(1)運用分子生物學技術,在宿主細胞表面誘導表達展示對目標金屬元素或其形態具有特異性結合能力的蛋白,研究其對重金屬形態的選擇性、特異性回響及吸附性能;(2)構建表面含有重金屬抗性基因的工程菌株,並在細胞培養過程中調控基因表達和官能團,研究其對目標金屬形態的特異性吸附;(3)建立痕量金屬組分的細胞萃取系統及線上檢測系統,實現痕量金屬形態的分離分析。 鑒於金屬結合蛋白/調節蛋白與其對應的金屬組分結合具有專屬性,本項目擬通過有目的、有針對性的設計細胞/菌體表面金屬結合/調節蛋白的種類及密度,實現對目標金屬形態的高度選擇性,為複雜基體中痕量金屬組分及形態的分離分析開闢新途徑。

結題摘要

複雜基體樣品中金屬形態的分離分析受到高度關注,而從複雜基體中提取痕量金屬形態依賴於有效的樣品預處理方法。因此發展樣品預處理理論並建立適於複雜基體樣品中金屬形態的高選擇性分離分析方法具有重要科學意義。本項目的主要研究內容包括:對微生物細胞在重金屬選擇性分離富集領域的相關套用進行了深入考證,細胞表面豐富的金屬結合位點以及通過化學修飾或基因改造的手段,在細胞表面引入對目標金屬組分具有選擇性結合能力的基團,可以有效提高細胞對目標金屬離子結合的選擇性;基於研究蛋白或金屬結合蛋白與金屬相互作用的目的,探索了一些基於納米結構的新型分離富集載體,討論了其與金屬或特定蛋白質之間的相互作用;利用噬菌體展示文庫篩選技術,篩選出對金屬離子或金屬的特定形態具有特異性結合能力的外源蛋白或多肽基因片段,將其表達並展示在噬菌體表面,並以此噬菌體為固相萃取材料,研究其在提高生物材料對目標元素及其形態的選擇性吸附性能等方面的套用潛力;研究了不同亞型的金屬硫蛋白對痕量金屬元素的選擇性結合能力,為後續在微生物細胞等表面進行接枝和細胞表面的生物誘導或化學改良提供依據。

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