基因表達方法

基因表達方法是使克隆重組體的外源基因發揮其功能或產生其所決定的生命物質的方法。基因表達的一般過程為：DNA先轉錄成RNA，再由RNA轉譯、加工成具有活性的蛋白質。目前已掌握了基因表達的基本條件，通過合理的設計使克隆的外源基因獲得表達。

現以大腸桿菌為例說明該方法的主要步驟：首先要構建增進轉錄的載體;為使克隆的目的基因得到有效的表達，必須將目的基因置於強的啟動子控制之下;目前套用乳糖啟動子，色氨酸啟動子，λ噬菌體左向轉錄啟動子等構建了較為理想的載體。第二，通過修飾調整使目的基因處於正確轉譯相位。第三，調節SD序列與轉譯起始位點之間的距離，使克隆基因最有效地表達。現在除了以大腸桿菌作為表達外源基因的宿主外，在枯草桿菌中也表達產生了B型肝炎病毒核心抗原、口蹄疫病毒的主要抗原、人的β干擾素以及分泌型的人胰島素原C肽。在酵母中已構建了不同啟動基因的表達載體，如醇脫氫酶的啟動基因;並成功地生產出人的干擾素和B型肝炎表面抗原等。以哺乳動物細胞作為受體，亦使兔β珠蛋白，人的生長素等基因表達成功。在植物基因工程方面，已經將多種外源基因(如菜豆的種子蛋白基因和蘇雲金桿菌的毒蛋白基因)引入植物細胞，再生成植株使外源基因得到表達，並隨種子遺傳。