《去乙醯化酶SIRT1 調控胃癌浸潤轉移的機制研究》是依託山東大學，由楊青擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：去乙醯化酶SIRT1 調控胃癌浸潤轉移的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊青
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
浸潤轉移是腫瘤的重要生物學特徵，上皮-間質轉化（EMT）在這一惡性進展過程中發揮重要作用。本課題組發現去乙醯化酶SIRT1可通過誘導細胞周期阻滯抑制胃癌的發生，但SIRT1能否調節EMT影響胃癌的浸潤轉移尚不清楚。我們的初步研究結果顯示胃癌組織中SIRT1的表達與腫瘤的分化存在相關性，抑制SIRT1能誘導胃癌細胞形態從上皮向間質轉化，增強細胞的遷移能力並調節EMT標誌物的表達變化。本課題組擬在前期工作基礎上進行以下研究：（1）利用細胞和動物模型通過體外和體內實驗檢測SIRT1調節EMT在胃癌浸潤轉移過程中的生物學功能，（2）在分子水平探討SIRT1調節EMT影響胃癌浸潤轉移的具體機制，（3）擴大臨床標本容量，從組織水平明確SIRT1與EMT及胃癌臨床病理學特徵間的相關性，從而闡明SIRT1在胃癌浸潤轉移過程中的作用，為抑制胃癌進展提供新的理論依據和治療靶點。
結題摘要
胃癌是消化系統最常見的惡性腫瘤之一，腫瘤的浸潤轉移是胃癌患者死亡最主要的原因。本課題組前期研究證實，去乙醯化酶SIRT1在胃癌組織中呈低表達，且SIRT1通過誘導細胞周期阻滯發揮抑制胃癌生長的作用，但SIRT1在胃癌浸潤轉移過程中的作用及調控機制尚不清楚。我們利用SIRT1過表達和干擾的慢病毒穩轉胃癌細胞株進行體外實驗，發現過表達SIRT1能夠抑制胃癌細胞的遷移和侵襲能力，而抑制SIRT1的表達則能夠促進胃癌細胞的遷移和侵襲。這一結果也得到了裸鼠轉移瘤在體實驗的證實。提示，SIRT1能夠抑制胃癌的浸潤轉移過程。隨後課題組通過晶片技術篩選SIRT1的下游靶基因並在多種胃癌細胞系中進行驗證，發現SIRT1能夠抑制ARHGAP5的表達，而且這一負向調控作用發生在轉錄水平。通過生物信息學預測，我們在ARHGAP5啟動子區尋找到轉錄因子c-JUN和RELA的結合位點。干擾實驗和雙螢光素酶實驗結果表明，轉錄因子c-JUN參與了胃癌細胞中SIRT1對ARHGAP5的負向調控。免疫沉澱及染色質免疫沉澱實驗的結果證實，胃癌細胞中SIRT1能夠與轉錄因子c-JUN形成複合體，通過催化c-JUN的賴氨酸位點發生去乙醯化，促使c-JUN從ARHGAP5的啟動子上解離，從而抑制ARHGAP5基因的轉錄。ARHGAP5是Rho GTP酶激活蛋白家族的重要成員，參與細胞的運動，在乳腺癌、肺癌等多種惡性腫瘤中高表達，促進腫瘤的侵襲轉移過程，但是其在胃癌發生髮展中的作用尚缺乏系統研究。通過對現有資料庫和組織晶片的結果分析，我們發現ARHGAP5在胃癌組織中呈高表達，ARHGAP5的表達水平與胃癌腫瘤的大小、腫瘤浸潤的深度、局部淋巴結轉移及TNM分期等臨床特徵密切相關。生存分析顯示，ARHGAP5高表達的患者生存期較短，預後不良。隨後的細胞學和動物學實驗證實，干擾ARHGAP5的表達，能夠顯著抑制胃癌細胞的浸潤和轉移過程，能夠回復下調SIRT1導致的胃癌細胞浸潤轉移能力的增強。說明，SIRT1通過下調ARHGAP5起到抑制胃癌侵襲和轉移的作用。本項目闡明了SIRT1在胃癌浸潤轉移過程中的生物學功能及具體調控機制，為遏制胃癌進展提供了理論依據和可能的治療靶點。
