《原核生物多功能蛋白trigger factor體內生理作用機制的研究》是依託哈爾濱工業大學，由劉川鵬擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：原核生物多功能蛋白trigger factor體內生理作用機制的研究
- 依託單位：哈爾濱工業大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉川鵬
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Trigger factor(TF)是原核分子伴侶系統中的重要成員，具有幫助蛋白摺疊、調控核糖體組裝等眾種重要的生理功能。TF的多功能性源自於其所具有的獨特龍形分子結構，人們認為TF表面上存在有多個功能位點，這些位點能夠以多種方式與眾多生物分子發生相互作用，從而賦予TF多樣的生理功能。然而除了核糖體結合位點和PPIase位點外，TF的其他功能位點尚未被鑑定出來。因此TF的生理功能及其作用機制目前尚不清楚。本課題擬運用包括轉錄組學、蛋白組學、表型組學等多種高通量手段致力於TF功能位點的鑑定、TF生理通路的建立等工作；並通過等溫量熱滴定、電鏡等多種分子結構和相互作用研究技術，闡明TF表面上的功能位點與TF通路成員之間的互動關係，從而在殘基甚至在原子水平上揭示TF生理功能的作用機制。這些研究將能夠提高人們對TF、以及分子伴侶系統運行機制的的認識，有助於對大腸桿菌進行改造，提高外源蛋白表達效率。
結題摘要
Trigger factor(TF)是具有多種生理功能的分子伴侶，其多功能性源自於其所具有的獨特龍形分子結構。為了探究TF不同區域結構以及具有不同理化性質的表面微區在TF生理功能，尤其是分子伴侶功能中的作用，本研究通過多種生化、生理、組學研究手段對TF的結構與功能、TF生理通路以及TF生理功能調控機制進行了深入的研究。本研究主要成果有：（1）解析了TF龍形結構的功能面所存在的具有不同理化性質的各種表面微區在TF分子伴侶功能中的作用，鑑定出若干個主要分子伴侶功能區域，並發現這些區域具有不同的作用模式。（2）通過對小分子化合物庫進行篩選，獲得了若干種可以調節TF分子伴侶功能的化合物。（3）通過酵母雙雜交等分子互作技術，鑑定出TF新的體內作用蛋白。（4）通過轉錄組、表型組等多種高通量手段，全面剖析了TF缺失的生理影響傳播途徑和過程，構建了TF生理功能網路，並在此基礎上分析了TF的各個結構域在其中的各自貢獻，以及比較分析了TF與其下游分子伴侶DnaK生理功能的差異。（5）對TF伴侶功能的體內和體外兩種研究方法進行了比較分析，發現兩種方法所得到的結果具有較高的一致性，為以後的TF研究的簡化提供了支持。這些研究將有助於人們對TF結構與功能、生理功能作用機制的認識，為今後對細胞分子伴侶系統進行改造、提高外源蛋白表達效率提供了理論和實踐支持。
