功能等位性是建立一種基於等位基因特異性PCR原理的改良SNP分型新方法。
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介紹
建立一種基於等位基因特異性PCR原理的改良SNP分型新方法:片段長度差異等位基因特異性PCR,並考察特異性引物的3'端第3位、第4位鹼基錯配對特異性延伸的影響。方法 以SNP位點rs759117和rs760887為例,設計兩條長度不同、3'末端分別與SNP兩個等位基因鹼基配對的上游引物,同時在兩個等位基因特異性引物3'端第3或第4位鹼基引入錯配以增加特異性,下游為公用引物。PCR產物經聚丙烯醯胺凝膠電泳、銀染顯帶後確定樣本的基因型。結果 不同SNP純合子為長度不同的單一譜帶,雜合子則為兩條帶,其結果與直接測序完全一致。兩條特異性上游引物3'端第3或第4位鹼基引入錯配後非特異性延伸顯著減少,且對PCR反應條件的嚴格性要求明顯降低。結論 片段長度差異等位基因特異性PCR是一種簡單快速而有效的SNP分型新方法;兩條特異性引物3'端第3、第4位鹼基引入錯配可使特異性顯著增加。
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甘藍型油菜8Z05和青油10號為硼高效品種;Bakow為硼低效品種.2000~2001年度,硼高效品種8Z05×青油10號F2代588個單株種植在缺硼土壤上.花期調查缺硼症狀,表現硼高效的單株數與硼低效的單株數之比為574∶14;結實期分離規律與花期相似.這說明甘藍型油菜硼高效品種8Z05和青油10號硼營養高效主效基因是等位的,同時可能存在微效基因的修飾作用,但微效基因的QTL可能不完全相同.2個年度的試驗結果一致.
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