《利用基因敲除小鼠研究ABRO1生理功能》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由張建宏擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：利用基因敲除小鼠研究ABRO1生理功能
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張建宏
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
基因敲除小鼠是研究新基因生理功能的理想動物模型。ABRO1作為一個支架分子募集NBA1、BRE和BRCC36等組成BRISC複合體,抑制心肌細胞K63-連結的泛素化，參與心肌保護。目前對ABRO1的功能了解甚少，我們的前期研究結果表明ABRO1是一個新型p53調節分子，通過募集USP7穩定p53蛋白，抑制腫瘤增殖。本研究擬製備ABRO1基因敲除小鼠，通過表型分析確定ABRO1敲除對胚胎髮育、腫瘤易感性、心肌保護、急性腎損傷和DNA損傷修復等多方面的影響，並探討其作用機制。通過分離小鼠MEF細胞，套用流式細胞術分析ABRO1敲除對細胞生長、增殖和凋亡的影響，檢測p53活性的變化，研究ABRO1發揮生理功能是否依賴p53。
結題摘要
ABRO1,也被稱為KIAA0157和FAM175B，定位於 10 q26.13號染色體上。目前關於它的功能了解很少。最近的一項研究表明ABRO1參與BRISC複合體(BRCC36-containing isopeptidase complex)的形成。BRISC複合體由多種蛋白組成，特異性剪下K63連線的泛素鏈。ABRO1作為一個中央支架蛋白組裝並促進BRISC複合體的催化作用。ABRO1和CCDC98 / Abraxas有39%的序列同源性，都包含了一個與NBA1、BRE和BRCC36相互作用的結構域。 CCDC98是BRCA-1的相互作用蛋白質，它是應答電離輻射形成BRCA1 DNA損傷點所必須的。因此，CCDC98在輻射敏感性和DNA損傷誘導的G2/M關卡控制扮演了一個重要角色。雖然ABRO1與CCDC98具有較高同源性，但是ABRO1 C-端缺乏識別BRCA1的BRCT結構域的PSXXF基序，所以，ABRO1不能結合BRCA1。到目前為止，沒有研究表明ABRO1是否參與細胞的DNA損傷反應。最近，ABRO1被報導與控制G2/M期和細胞凋亡的鋅指轉錄因子THAP5相互作用。在心肌細胞中，增加ABRO1表達顯著降低特異靶蛋白K63連結泛素化並減少細胞損傷和細胞死亡。去泛素化酶以及與之相關的蛋白複合體的蛋白質組學分析表明USP7可能結合ABRO1。 在本項研究中，我們的結果證實ABRO1可與USP7，p53形成蛋白質複合體，促進USP7 和p53的相互作用，去泛素化p53，結果是增加p53穩定性，致細胞周期阻滯。在非應激條件下，ABRO1主要定位於細胞質。DNA損傷時，ABRO1表達增加，並轉位入核參與p53 的活化。我們的結果揭示ABRO1是一個新的p53調節分子，在調節細胞增殖和DNA損傷應急反應中起重要作用。 利用同源重組技術建立了ABRO1敲除小鼠，研究發現敲除ABRO1之後，不影響小鼠的正常生長發育。敲除ABRO1促進中性粒細胞在腹腔中的募集，降低CLP導致的系統性炎症反應。進一步機制研究表明，敲除ABRO1增強CXCR2受體活化，促進CXCR2介導的中性粒細胞的遷移，敲除ABRO1抑制NLRP3-ASC-Caspase1複合體的組裝，抑制NLRP3炎症炎症小體的活化。表明ABRO1可能是一個新型的炎症調控因子。
