《利用基因敲除小鼠研究FCHSD1在聽覺中的功能》是依託山東大學，由王燕飛擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：利用基因敲除小鼠研究FCHSD1在聽覺中的功能
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王燕飛
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
聽毛細胞是負責感受聲音的感受器細胞，而聽纖毛和表皮板是聽毛細胞中以肌動蛋白纖維（F-actin）為主體的亞細胞結構，對聽覺傳導的發生至關重要。我們發現FCHSD1在表皮板和聽纖毛表達，並且能夠通過與SNX9的結合在體外促進WASP和Arp2/3蛋白複合物依賴的F-actin聚合，因此可能參與調控聽纖毛和表皮板的發育和維持，從而在聽覺傳導中發揮重要作用。為了深入研究FCHSD1在聽覺傳導中的功能，我們計畫在小鼠FCHSD1第三個外顯子兩側引入LoxP位點，並與內耳特異的Cre小鼠交配，從而得到在內耳中特異性敲除FCHSD1表達的基因敲除小鼠。我們會檢測FCHSD1基因敲除小鼠的聽纖毛和表皮板發育是否異常，以及聽力水平是否發生改變。此外我們會對與FCHSD1相關的F-actin調控蛋白在敲除小鼠中的表達進行研究，對FCHSD1調控聽纖毛和表皮板F-actin的分子機制進行深入探討。
結題摘要
聽毛細胞是負責感受聲音的感受器細胞，而聽纖毛和表皮板是聽毛細胞中以肌動蛋白纖維（F-actin）為主體的亞細胞結構，對聽覺傳導的發生至關重要。我們發現FCHSD1在表皮板和聽纖毛表達，並且能夠通過與SNX9的結合在體外促進WASP和Arp2/3蛋白複合物依賴的F-actin聚合，因此可能參與調控聽纖毛和表皮板的發育和維持，從而在聽覺傳導中發揮重要作用。在本項目中，為了深入研究FCHSD1在聽覺傳導中的功能，我們在小鼠FCHSD1第三個外顯子兩側引入LoxP位點，通過與不同的Cre小鼠交配，獲得了全身性及內耳特異性的FCHSD1基因敲除小鼠。HE染色結果顯示敲除小鼠各組織器官無明顯生理變化，統計結果顯示敲除小鼠的生殖狀態也未受影響。整封免疫螢光結果及掃描電鏡結果顯示敲除小鼠的聽覺系統發育基本正常，毛細胞沒有發生嚴重的缺失，聽纖毛形態正常、沒有缺損及凌亂的現象，FM1-43FX染色結果顯示敲除小鼠聽纖毛上的離子通道活性也沒有受到影響。與以上結果一致，ABR測聽結果顯示FCHSD1的敲除並沒有影響小鼠的聽力。我們推測這可能與小鼠中存在FCHSD1的同源基因FCHSD2有關，它的存在有可能代償了FCHSD1的功能，使小鼠的聽覺系統保持正常發育。因此，我們計畫對小鼠進行FCHSD1和FCHSD2的雙基因敲除，來進一步研究FCHSD1的功能，以及它在小鼠聽覺系統發育過程中與其他相關基因之間的聯繫。
