凝血酶切割點位

凝血酶切割點位是基因工程表達系統中融合蛋白常用的連線序列,凝血酶處理可將融合蛋白中目的蛋白與非目的蛋白的肽段分離,最適切割點位是:P4-P3-P2-Arg↓-P1′-P2′,式中P4和P3為疏水胺基酸,P1′和P2′為非酸性胺基酸,↓為切割點位。融合蛋白有兩種不同的含義,一種是通過DNA重組技術得到的兩個基因重組後的表達產物。另一種含義就是介導兩個細胞質膜融合的一組蛋白。

兩個不同的蛋白質連成一個大分子。可以通過化學方法連線,也可通過基因的融合來實現。在基因操作中,對一些分子數小的多肽基因常採用融合的方法與某一基因(如lac)相連,二者之間接上某一酶(如凝血酶)的切口,以增加在體內表達後產物的穩定性,也有的故意使兩個分子串連融合以提高療效,如IL-3與GM-CSF。也有與分泌性蛋白的信號肽基因組成融合基因,以使表達產物分泌到膜外或胞外。

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