冷凍蝕刻復型技術

冷凍蝕刻復型技術室電鏡樣品的一種製備技術，以顯示細胞、組織微細結構的立體構象。

基本介紹

• 中文名：冷凍蝕刻復型技術
• 外文名：Freeze etch replica Technology
• 實質：一種製備技術
• 立構對象：顯示細胞、組織微細結構

主要步驟

冷凍

將樣品組織浸入冷凍保護劑中，然後再將樣品放入液氮（-196攝氏度）內快速冷凍。

斷裂

在真空條件下使樣品斷裂，斷裂面常為組織、細胞的薄弱部位，如細胞膜脂質雙分子層的疏水極之間。

蝕刻

在真空內使溫度回升到-100攝氏度，使斷裂面含游離水較多之處的冰晶生化，形成凹凸不平的“浮雕”效果。

復型

在斷裂面上先後噴鍍鉑和碳，形成金屬復型膜稱復型（replica），用次氯酸鈉等腐蝕夜將組織溶解，取復型膜在透射電鏡下觀察。

細胞套用結果

細胞膜的脂質雙分子層被劈分開以後，其外層的內表面稱胞質外面或E面（extracellular face, E face）；其內層的外表面稱胞質面或P面（plasmic face, P face）。P面常見許多膜內粒子，E面則較少。一般認為膜內粒子是細胞膜結構中的向前蛋白顆粒的圖像。膜內粒子的數量與分布隨膜的功能狀態而變化，因此冷凍蝕刻復型技術適用於生物膜內部結構與功能的研究。